摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词表 | 第9-12页 |
第一章 绪论 | 第12-16页 |
1 白血病 | 第12页 |
1.1 白血病的分类 | 第12页 |
1.2 白血病的危害 | 第12页 |
1.3 白血病的治疗 | 第12页 |
2 癌痛 | 第12-13页 |
3 癌痛模型研究现状 | 第13-14页 |
4 神经激肽受体 | 第14页 |
5 神经激肽受体拮抗剂 | 第14-15页 |
6 研究目的和意义 | 第15-16页 |
第二章 材料和方法 | 第16-30页 |
1.实验材料 | 第16页 |
1.1 细胞系 | 第16页 |
1.2 ICR小白鼠和BALB/c裸鼠 | 第16页 |
1.3神经激肽受体拮抗剂SR140333 | 第16页 |
1.4 白血病病人外周血 | 第16页 |
2 实验仪器和试剂 | 第16-19页 |
2.1 实验仪器 | 第16-17页 |
2.2 实验试剂 | 第17-18页 |
2.3 主要试剂及其配制 | 第18-19页 |
3 实验方法 | 第19-30页 |
3.1 细胞复苏、培养及冻存 | 第19-20页 |
3.2 MTT实验 | 第20页 |
3.3 临床血液的收集与处理 | 第20-21页 |
3.4 ICR小鼠骨髓细胞获取与培养 | 第21页 |
3.5 溶血实验 | 第21-22页 |
3.6 Hoechst33342染色检测凋亡 | 第22页 |
3.7 流式细胞术检测细胞周期 | 第22-23页 |
3.8 Westernblotting | 第23-24页 |
3.9 ROS检测 | 第24页 |
3.10 体外移植瘤抑瘤实验 | 第24-25页 |
3.10.1 K562细胞成瘤实验 | 第24-25页 |
3.10.2 D-Luciferin-K562细胞成瘤实验 | 第25页 |
3.11 疼痛行为学实验 | 第25-27页 |
3.11.1 自发性疼痛评分实验 | 第26页 |
3.11.2 斜扳试验 | 第26页 |
3.11.3 机械缩足反射阈值的测定(弗莱毛实验) | 第26-27页 |
3.11.4 热痛缩足潜伏期(PWTL)的测定 | 第27页 |
3.11.5 鼠尾光照测痛实验 | 第27页 |
3.12 胫骨石蜡切片的制作 | 第27-29页 |
3.12.1 苏木精-伊红染色(HE染色) | 第28页 |
3.12.2 免疫组织化学(IHC) | 第28-29页 |
3.13 蛋白质组学和翻译后修饰研究 | 第29页 |
3.14 转录组学研究 | 第29页 |
3.15 结果分析 | 第29-30页 |
第三章 实验结果 | 第30-63页 |
1 白血病人外周血白细胞中NK1R检测 | 第30-32页 |
2 SR140333抑制K562细胞和HL-60细胞的增殖 | 第32-33页 |
3 SR140333对小鼠骨髓细胞的作用 | 第33-35页 |
4 溶血实验 | 第35页 |
5 SR140333对K562细胞内ROS的影响 | 第35-36页 |
6 SR140333对K562细胞周期及周期相关蛋白的影响 | 第36-39页 |
6.1 靶向阻断NK1R对K562细胞周期的影响 | 第36-37页 |
6.2 Westernblotting检测周期相关蛋白 | 第37-39页 |
7 SR140333对K562细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响 | 第39-42页 |
7.1 Hoechst33342染色检测凋亡 | 第39页 |
7.2 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
7.3 Westernblotting检测凋亡相关蛋白 | 第40-42页 |
8 Westernblotting检测自噬相关蛋白 | 第42-43页 |
9 动物水平抑瘤实验 | 第43-45页 |
9.1 K562细胞移植瘤抑瘤实验 | 第43页 |
9.2 D-Luciferin-K562细胞移植瘤抑瘤实验 | 第43-45页 |
10 NK1R拮抗剂SR140333对小鼠骨癌痛的作用及其机制 | 第45-56页 |
10.1 小鼠的基本特征评价 | 第45-49页 |
10.1.1 自发性疼痛评分实验 | 第45页 |
10.1.2 机械缩足反射阈值的测定(弗莱毛实验) | 第45-46页 |
10.1.3 热痛缩足潜伏期测定 | 第46页 |
10.1.4 斜扳试验 | 第46-47页 |
10.1.5 鼠尾光照测痛实验 | 第47-49页 |
10.2 苏木精-伊红染色实验 | 第49-51页 |
10.3 Westernblotting检测SR140333缓解骨癌痛的分子机制 | 第51-54页 |
10.4 免疫组织化学实验(IHC) | 第54-56页 |
11 定量蛋白质组学研究 | 第56-58页 |
12 赖氨酸乙酰化修饰研究 | 第58-60页 |
13 转录组学研究 | 第60-63页 |
第四章 讨论 | 第63-65页 |
第五章 结论与展望 | 第65-67页 |
1 结论 | 第65-66页 |
2 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
研究生期间的研究成果 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |