| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 主要缩略符号对照表 | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 Obg基因及蛋白功能研究 | 第12-16页 |
| 1.1.1 Obg基因研究 | 第12页 |
| 1.1.2 Obg生物学功能研究 | 第12-15页 |
| 1.1.3 植物ObgC研究 | 第15-16页 |
| 1.2 铁皮石斛研究 | 第16-17页 |
| 1.2.1 生物学研究 | 第16页 |
| 1.2.2 遗传多样性研究 | 第16页 |
| 1.2.3 分子鉴定技术研究 | 第16-17页 |
| 1.2.4 基因克隆及遗传转化研究 | 第17页 |
| 1.3 核糖体形成与叶绿体发育 | 第17-19页 |
| 1.4 植物克隆技术及其应用 | 第19-20页 |
| 1.4.1 RACE技术及其在植物基因克隆应用 | 第19-20页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR技术及其植物研究应用 | 第20页 |
| 1.5 目的与意义 | 第20-22页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第21-22页 |
| 1.6 技术路线 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 菌株和载体 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 RNA提取与cDNA合成 | 第23-24页 |
| 2.2.2 ObgC基因全长序列测定与生物信息学分析 | 第24-27页 |
| 2.2.3 亚细胞定位 | 第27-30页 |
| 2.2.4 功能互补分析 | 第30-32页 |
| 2.2.5 蛋白表达与抗性分析 | 第32-34页 |
| 2.2.6 qRT-PCR法表达分析 | 第34页 |
| 3 结果及分析 | 第34-53页 |
| 3.1 DoObgC基因克隆及生物信息学分析 | 第34-41页 |
| 3.1.1 DoObgC基因克隆cDNA全长序列克隆 | 第34-37页 |
| 3.1.2 DoObgC蛋白生物信息学分析 | 第37-41页 |
| 3.2 DoObgC亚细胞定位 | 第41-45页 |
| 3.2.1 入门载体构建 | 第41-42页 |
| 3.2.2 重组载体构建及农杆菌转化 | 第42-43页 |
| 3.2.3 烟草叶片瞬时表达 | 第43-45页 |
| 3.3 功能互补分析 | 第45-47页 |
| 3.3.1 obg-t拟南芥基因型鉴定 | 第45页 |
| 3.3.2 载体转化 | 第45-46页 |
| 3.3.3 转基因植株鉴定 | 第46-47页 |
| 3.4 抗生素敏感性分析 | 第47-52页 |
| 3.4.1 原核表达 | 第47-50页 |
| 3.4.2 DoObgC_(Δ(1-160))细胞生存力分析 | 第50-52页 |
| 3.5 DoObgC基因定量表达分析 | 第52-53页 |
| 3.5.1 组织表达分析 | 第52-53页 |
| 3.5.2 诱导表达差异分析 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 5 结论 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56-57页 |
| 5.2 实验创新点 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第66页 |
