| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 英文缩写词表 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一章 不同磷水平和砷浓度交互处理对三七生长皂苷积累及抗氧化系统的影响 | 第20-53页 |
| 引言 | 第20页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1 材料 | 第20页 |
| 1.2 主要仪器设备、试剂 | 第20-21页 |
| 2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.1 三七苗的筛选和处理 | 第21-22页 |
| 2.2 栽培管理 | 第22页 |
| 2.3 试验组别的设计 | 第22页 |
| 2.4 有效磷含量的测定 | 第22-23页 |
| 2.5 总磷含量的测定 | 第23-24页 |
| 2.6 砷含量的测定 | 第24-25页 |
| 2.7 生物量的测定 | 第25页 |
| 2.8 供试品溶液的制备 | 第25页 |
| 2.9 对照品溶液的制备 | 第25-26页 |
| 2.10 色谱分析 | 第26-27页 |
| 2.11 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第27-28页 |
| 2.12 过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第28-29页 |
| 2.13 过氧化氢酶(CAT)活性的测定 | 第29页 |
| 2.14 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.15 谷胱甘肽(GSH)含量的测定 | 第30-32页 |
| 2.16 β-类胡萝卜素的测定 | 第32页 |
| 2.17 脯氨酸含量的测定 | 第32页 |
| 2.18 数据处理 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-51页 |
| 3.1 不同磷水平、砷浓度对三七根部总磷含量的影响 | 第33页 |
| 3.2 不同磷水平、砷浓度对三七茎叶总磷含量的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 不同磷水平、砷浓度对三七根部砷含量的影响 | 第34页 |
| 3.4 不同磷水平、砷浓度对三七茎叶砷含量的影响 | 第34-35页 |
| 3.5 不同磷水平、砷浓度对三七植株体内砷吸收转移的影响 | 第35-36页 |
| 3.6 不同磷水平、砷浓度对三七总重的影响 | 第36-37页 |
| 3.7 不同磷水平、砷浓度对三七根重的影响 | 第37-38页 |
| 3.8 不同磷水平、砷浓度对三七株高的影响 | 第38页 |
| 3.9 不同磷水平、砷浓度对三七根长的影响 | 第38-39页 |
| 3.10 皂苷含量的测定 | 第39-46页 |
| 3.11 抗氧化性的影响 | 第46-51页 |
| 4 本章小结与讨论 | 第51-53页 |
| 4.1 讨论 | 第51页 |
| 4.2 小结 | 第51-53页 |
| 第二章 不同磷水平、砷浓度交互处理对三七根转录调控的影响 | 第53-71页 |
| 引言 | 第53页 |
| 1 实验材料与方法 | 第53-54页 |
| 1.1 供试植物 | 第53页 |
| 1.2 总RNA完整性和纯度检测及测序 | 第53-54页 |
| 1.3 基因表达差异分析 | 第54页 |
| 1.4 差异表达基因的GO、KOG和KEGG | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-68页 |
| 2.1 三七根样总RNA质量分析 | 第54-55页 |
| 2.2 RNA-seq数据质量分析 | 第55-57页 |
| 2.3 转录组拼接 | 第57页 |
| 2.4 样品重复性相关分析 | 第57-58页 |
| 2.5 qRT-PCR验证差异表达基因分析 | 第58-59页 |
| 2.6 差异表达基因分析 | 第59-61页 |
| 2.7 Nr库注释结果统计 | 第61-62页 |
| 2.8 GO注释结果统计 | 第62-64页 |
| 2.9 差异表达基因的KOG的分析 | 第64-65页 |
| 2.10 差异表达基因的KEGG代谢途径分析 | 第65-67页 |
| 2.11 皂苷合成关键酶基因差异表达聚类分析 | 第67-68页 |
| 3 本章小结与讨论 | 第68-71页 |
| 3.1 讨论 | 第68-69页 |
| 3.2 小结 | 第69-71页 |
| 第三章 磷酸盐转运蛋白生物信息学分析和目标基因的筛选及克隆鉴定 | 第71-102页 |
| 引言 | 第71页 |
| 1 实验材料 | 第71-72页 |
| 2 实验方法 | 第72-83页 |
| 2.1 cDNA反转录 | 第72-73页 |
| 2.2 qPCR实验 | 第73-74页 |
| 2.3 qPCR引物设计 | 第74-75页 |
| 2.4 cDNA第一链的合成 | 第75-76页 |
| 2.5 ORF引物设计与磷酸盐转运蛋白基因cDNA-ORF的扩增 | 第76-80页 |
| 2.6 扩增产物的连接、转化和验证 | 第80-83页 |
| 2.7 统计分析 | 第83页 |
| 3 结果与分析 | 第83-99页 |
| 3.1 目标基因的筛选 | 第86-90页 |
| 3.2 磷酸盐转运蛋白基因生物信息学分析 | 第90-99页 |
| 4 本章小结与讨论 | 第99-102页 |
| 4.1 讨论 | 第99-100页 |
| 4.2 小结 | 第100-102页 |
| 第四章 三七源PnPht1;2、PnPht1;4、PnPht1;5和PnPhO;17的功能验证及亚细胞定位分析 | 第102-117页 |
| 引言 | 第102页 |
| 1 实验材料 | 第102-103页 |
| 1.1 主要试剂及材料 | 第102-103页 |
| 1.2 主要仪器 | 第103页 |
| 2 实验方法 | 第103-109页 |
| 2.1 质粒的提取 | 第103页 |
| 2.2 酶切与酶连 | 第103-104页 |
| 2.3 酶连产物的转化 | 第104页 |
| 2.4 重组子的筛选和阳性克隆的鉴定 | 第104-105页 |
| 2.5 阳性克隆质粒的提取与菌体保存 | 第105页 |
| 2.6 酵母的活化 | 第105页 |
| 2.7 酵母感受态细胞的制备 | 第105-106页 |
| 2.8 酵母的转化 | 第106-107页 |
| 2.9 酵母质粒的提取与验证 | 第107-108页 |
| 2.10 磷酸盐转运蛋白基因在酵母中的功能测定 | 第108-109页 |
| 3 结果与分析 | 第109-115页 |
| 3.1 酵母互补实验颜色反应 | 第109-110页 |
| 3.2 磷酸盐转运蛋白基因MB192-PnPht1;2、MB192-PnPht1;4、MB192-PnPht1;5、MB192-PnPhO;17与质子的共转运 | 第110-112页 |
| 3.3 磷酸盐转运蛋白基因MB192-PnPht1;2、MB192-PnPht1;4、MB192-PnPht1;5、MB192-PnPhO;17解偶联剂与质子泵抑制剂实验 | 第112-113页 |
| 3.4 磷酸盐转运蛋白基因MB192-PnPht1;2、MB192-PnPht1;4、MB192-PnPht1;5、MB192-PnPh O;17酸性磷酸酶活性 | 第113-114页 |
| 3.5 PnPht1;2、PnPht1;4亚细胞定位分析 | 第114-115页 |
| 4 本章小结与讨论 | 第115-117页 |
| 4.1 讨论 | 第115-116页 |
| 4.2 小结 | 第116-117页 |
| 第五章 总结与展望 | 第117-120页 |
| 1 论文的主要成果及创新点 | 第117-118页 |
| 1.1 本文的主要结论 | 第117-118页 |
| 1.2 创新点 | 第118页 |
| 2 存在的问题与展望 | 第118-120页 |
| 第六章 文献综述 | 第120-126页 |
| 参考文献 | 第126-132页 |
| 附录 | 第132-150页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
