| 摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-16页 |
| 英文缩略语 | 第17-21页 |
| 第一部分 肺腺癌组织及细胞系中circPUM1的表达 | 第21-31页 |
| 1 前言 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-26页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 细胞系 | 第23页 |
| 2.2 组织标本收集 | 第23页 |
| 2.3 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.4 RNA逆转录为cDNA | 第24-25页 |
| 2.5 qPCR(real-timequantitativePCR)检测组织及细胞系中circPUM1表达 | 第25-26页 |
| 2.6 统计学分析 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| 3.1 环状RNAcircPUM1鉴定及其在肺腺癌细胞系中表达水平 | 第26-27页 |
| 3.2 研究对象基本情况 | 第27页 |
| 3.3 肺癌患者组织中circPUM1表达水平 | 第27-28页 |
| 3.4 circPUM1表达水平与临床病理特征相关性分析 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 结论 | 第30-31页 |
| 第二部分 过表达/敲除肺腺癌细胞中circPUM1对细胞增殖、侵袭、转移的影响 | 第31-43页 |
| 1 前言 | 第31-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-35页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 2.1.3 细胞系 | 第32-33页 |
| 2.2 载体 | 第33页 |
| 2.3 细胞培养及转染 | 第33页 |
| 2.4 MTT细胞活性测定 | 第33页 |
| 2.5 EdU检测细胞增殖 | 第33-34页 |
| 2.6 细胞凋亡检测 | 第34页 |
| 2.7 细胞划痕实验 | 第34页 |
| 2.8 Transwell细胞侵袭实验 | 第34页 |
| 2.9 统计学分析 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-40页 |
| 3.1 转染效率鉴定 | 第35页 |
| 3.2 MTT检测细胞增殖结果 | 第35-36页 |
| 3.3 EdU检测细胞增殖结果 | 第36-37页 |
| 3.4 流式细胞术检测细胞凋亡结果 | 第37-38页 |
| 3.5 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第38-39页 |
| 3.6 Transwell检测细胞侵袭能力 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 第三部分 circPUM1对肺腺癌作用机制分析 | 第43-53页 |
| 1 前言 | 第43-44页 |
| 2 材料和方法 | 第44-47页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第44-45页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第44页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第44-45页 |
| 2.1.3 细胞系 | 第45页 |
| 2.2 载体 | 第45页 |
| 2.3 细胞培养及转染 | 第45页 |
| 2.4 裸鼠体内成瘤实验 | 第45-46页 |
| 2.5 生物信息学预测 | 第46页 |
| 2.6 荧光素酶报告实验 | 第46页 |
| 2.7 Westernblot检测蛋白质水平 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-50页 |
| 3.1 circPUM1敲减抑制裸鼠体内成瘤 | 第47-48页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第48页 |
| 3.3 双荧光素酶实验证明circPUM1作为miR-326海绵 | 第48-49页 |
| 3.4 Western检测miR-326下游靶蛋白 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 综述 | 第60-72页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74页 |
