| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-16页 |
| 第一部分 Ndfip1在小鼠大脑皮质和海马的表达及增龄性改变 | 第16-33页 |
| 1 前言 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第18页 |
| 2.1.2 主要抗体、试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 小鼠脑组织取材 | 第19-20页 |
| 2.2.2 免疫组织化学、免疫荧光染色 | 第20页 |
| 2.2.3 WesternBlot检测 | 第20-22页 |
| 2.2.4 RT-PCR | 第22-23页 |
| 2.2.5 统计学处理 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-30页 |
| 3.1 Ndfip1在成年小鼠大脑皮质和海马的分布和表达 | 第24-27页 |
| 3.2 年龄因素对小鼠大脑皮质和海马Ndfip1表达的影响 | 第27-28页 |
| 3.3 年龄因素对小鼠大脑皮质和海马DMT1-IRE和DMT1-nonIRE表达的影响 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 Ndfip1在阿尔茨海默病小鼠模型和细胞模型的表达 | 第33-48页 |
| 1 前言 | 第33-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第35页 |
| 2.1.2 主要抗体、试剂 | 第35页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第35-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 鉴定APP/PS1转基因小鼠 | 第37-38页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第38页 |
| 2.2.3 标本制备 | 第38页 |
| 2.2.4 免疫组织化学、免疫荧光染色 | 第38页 |
| 2.2.5 WesternBlot检测 | 第38-39页 |
| 2.2.6 RT-PCR | 第39页 |
| 2.2.7酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞分泌Aβ1-42 | 第39页 |
| 2.2.8 统计学处理 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-45页 |
| 3.1 APP/PS1转基因小鼠基因型鉴定 | 第40页 |
| 3.2 Ndfip1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮质和海马的分布与表达 | 第40-42页 |
| 3.3 Ndfip1在稳定转染人APPswcDNA的SH-SY5Y细胞的表达 | 第42-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 第三部分 Ndfip1通过调控DMT1表达和活性,影响APP代谢过程,减弱铁离子对细胞的毒性作用 | 第48-64页 |
| 1 前言 | 第48-49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-55页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第49-51页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第49页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第49-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第51页 |
| 2.2.2 Ndfip1过表达真核质粒构建 | 第51-52页 |
| 2.2.3 质粒DNA的转化 | 第52页 |
| 2.2.4 质粒DNA的提取 | 第52-53页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第53页 |
| 2.2.6 WesternBlot检测 | 第53页 |
| 2.2.7 细胞分泌Aβ1-42水平检测 | 第53页 |
| 2.2.8 Ndfip1过表达对Fe2+转运的影响 | 第53-54页 |
| 2.2.9 MTT法检测细胞生存率 | 第54页 |
| 2.2.10 统计学处理 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-61页 |
| 3.1 构建Ndfip1真核过表达质粒 | 第55页 |
| 3.2 Ndfip1质粒转染效果 | 第55-56页 |
| 3.3 Ndfip1过表达对APPsw细胞APP代谢的影响 | 第56-57页 |
| 3.4 Ndfip1过表达对APPsw细胞DMT1表达的影响 | 第57-58页 |
| 3.5 Ndfip1过表达对APPsw细胞摄铁能力的影响 | 第58-59页 |
| 3.6 金属离子对APPsw细胞生存率的影响 | 第59-60页 |
| 3.7 Ndfip1过表达对APPsw细胞生存率的影响 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 综述 | 第71-81页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 个人简介 | 第83页 |
