| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 硫修饰DNA的发现 | 第12-13页 |
| 1.2 磷硫酰化修饰DNA的特征 | 第13-15页 |
| 1.2.1 DNA磷硫酰化修饰具有立体选择性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 DNA磷硫酰化修饰具有序列选择性 | 第14页 |
| 1.2.3 DNA磷硫酰化修饰是一种复制后修饰 | 第14-15页 |
| 1.2.4 DNA磷硫修饰具有广泛性 | 第15页 |
| 1.3 硫元素的渗入通过dnd基因控制 | 第15-16页 |
| 1.4 磷硫酰化修饰DNA可能具有的生理学功能 | 第16页 |
| 1.5 磷硫酰化修饰DNA的最新进展 | 第16-17页 |
| 1.5.1 R_p型磷硫酰化修饰的DNA在构象上趋于不稳定 | 第16-17页 |
| 1.5.2 磷硫酰化修饰的DNA具有抗氧化性 | 第17页 |
| 1.6 本论文主要研究内容、目的、意义及创新点 | 第17-20页 |
| 1.6.1 主要研究内容 | 第17-18页 |
| 1.6.2 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.6.3 本课题研究创新之处 | 第19-20页 |
| 第二章 核磁共振(NMR)技术在核酸(DNA)研究中的应用方法 | 第20-30页 |
| 2.1 核磁共振(NMR)技术简介 | 第20页 |
| 2.2 二维核磁共振 | 第20-22页 |
| 2.2.1 COSY谱(Correlated spectroscopy) | 第21-22页 |
| 2.2.2 全相关谱TOCSY (total correlation spectroscopy) | 第22页 |
| 2.2.3 NOESY谱(Nuclear Overhauser Effect spectroscopy) | 第22页 |
| 2.3 NMR在研究DNA中的应用 | 第22-30页 |
| 2.3.1 NMR波谱学分析与DNA溶液结构研究 | 第23-24页 |
| 2.3.2 DNA质子在NMR图谱上的分布特征 | 第24-26页 |
| 2.3.3 DNA二维图谱NMR信号的归属 | 第26-27页 |
| 2.3.4 NMR约束及DNA结构计算 | 第27-28页 |
| 2.3.5 核磁共振(NMR)技术在DNA动力学中的应用 | 第28-30页 |
| 第三章 实验样品纯化以及R型与S型硫修饰DNA的确认 | 第30-44页 |
| 3.1 骨架磷硫修饰DNA及其对应的没有进行骨架磷硫修DNA的合成 | 第30页 |
| 3.2 样品纯化所需材料、试剂、仪器等 | 第30-32页 |
| 3.2.1 实验所需试剂及缓冲溶液的配制 | 第30-31页 |
| 3.2.2 实验用到的主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 3.3 骨架磷未经硫修饰的DNA纯化方法 | 第32页 |
| 3.4 骨架磷硫修饰的DNA纯化分离方法 | 第32-33页 |
| 3.5 骨架磷硫修饰DNA的R_p型与S_p型构象确认 | 第33-34页 |
| 3.6 实验结果 | 第34-42页 |
| 3.6.1 骨架磷未经硫修饰的DNA经阴离子交换色谱柱的纯化结果 | 第35-36页 |
| 3.6.2 骨架发生磷硫修饰的DNA氨解后经C18反相柱的纯化结果 | 第36页 |
| 3.6.3 骨架磷硫修饰的DNA(Dnd1与Dnd2)首次经色谱柱分离纯化结果 | 第36-38页 |
| 3.6.4 骨架磷硫修饰的DNA (Dnd1与Dnd2)再次经色谱柱分离纯化结果 | 第38-40页 |
| 3.6.5 骨架磷硫酰化修饰DNA立体结构的确认 | 第40-42页 |
| 3.7 双链dsDNA样品的配置 | 第42-44页 |
| 第四章 骨架未磷硫修饰的dsDNA与骨架磷硫修饰的R型dsDNA与S型硫修饰dsDNA表征 | 第44-48页 |
| 4.1 实验所用仪器与试剂 | 第44页 |
| 4.2 利用圆二色谱法检测骨架未磷硫修饰的dsDNA与骨架磷硫修饰的R型dsDNA与S型硫修饰dsDNA的二级结构 | 第44-45页 |
| 4.2.1 骨架未磷硫修饰的dsDNA与骨架磷硫修饰的R型dsDNA与S型硫修饰dsDNA二级结构测定结果与讨论 | 第44-45页 |
| 4.3 热变性温度(Tm值)法研究dsDNA二级结构的转变 | 第45-48页 |
| 第五章 DNA核磁样品谱图的采集、核磁信号的归属以及结构计算 | 第48-59页 |
| 5.1 dsDNA核磁样品配制,图谱采集信号归属以及dsDNA结构计算的材料与方法 | 第48-50页 |
| 5.1.1 试剂和仪器 | 第48页 |
| 5.1.2 dsDNA核磁共振样品的配制 | 第48-49页 |
| 5.1.3 dsDNA核磁样品信号采集方法 | 第49页 |
| 5.1.4 骨架磷硫修dsDNA与正常dsDNA的核磁信号的归属与结构计算 | 第49-50页 |
| 5.2 实验结果与讨论 | 第50-59页 |
| 5.2.1 dsDNA-3(骨架未进行磷硫修饰)的NOESY谱归属结果 | 第50-55页 |
| 5.2.2 dsDNA-2(S_p型硫修饰DNA)的NOESY谱归属结果 | 第55页 |
| 5.2.3 dsDNA-1(R_p硫修饰DNA)的NOESY谱归属结果 | 第55-56页 |
| 5.2.4 三种双链dsDNA的~(31)p-~1H HETCOR图谱的归属结果 | 第56-58页 |
| 5.2.5 三种双链dsDNA的溶液三维结构的计算及构象评估 | 第58-59页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
