| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第13-31页 |
| 1.1 环介导等温扩增技术 | 第13-30页 |
| 1.1.1 LAMP技术的引物设计 | 第13-15页 |
| 1.1.2 LAMP技术的原理 | 第15-18页 |
| 1.1.3 LAMP技术的特点 | 第18页 |
| 1.1.4 LAMP反应产物的检测 | 第18-21页 |
| 1.1.5 LAMP技术在分析检测中的应用 | 第21-30页 |
| 1.2 本研究论文的构想 | 第30-31页 |
| 第2章 基于连接的环介导等温扩增方法用于microRNA的高灵敏检测 | 第31-46页 |
| 2.1 前言 | 第31-32页 |
| 2.2 实验部分 | 第32-34页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第32-33页 |
| 2.2.2 Ligation-LAMP方法对miRNA的分析检测 | 第33-34页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第34页 |
| 2.2.4 细胞的培养和总RNA的提取 | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-45页 |
| 2.3.1 实验设计原理 | 第34-36页 |
| 2.3.2 实验原理验证 | 第36-38页 |
| 2.3.3 实验条件优化 | 第38-40页 |
| 2.3.4 miRNA的定量检测 | 第40-43页 |
| 2.3.5 Ligation-LAMP方法的特异性研究 | 第43-44页 |
| 2.3.6 Ligation-LAMP方法用于实际样品中miRNA的分析检测 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 第3章 茎-环引物介导的指数放大用于尿嘧啶-DNA糖基化酶的活性检测 | 第46-58页 |
| 3.1 前言 | 第46-47页 |
| 3.2 实验部分 | 第47-49页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第47-48页 |
| 3.2.2 UDG活性及其抑制剂的检测 | 第48页 |
| 3.2.3 凝胶电泳分析 | 第48-49页 |
| 3.2.4 细胞培养与细胞裂解液的制备 | 第49页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第49-57页 |
| 3.3.1 UDG活性检测的实验原理 | 第49-50页 |
| 3.3.2 实验可行性验证 | 第50-52页 |
| 3.3.3 实验条件优化 | 第52-53页 |
| 3.3.4 UDG活性的定量检测 | 第53-54页 |
| 3.3.5 SPEA方法用于UDG活性检测的特异性 | 第54-55页 |
| 3.3.6 UDG抑制剂的测定 | 第55-56页 |
| 3.3.7 复杂样品中UDG的分析检测 | 第56-57页 |
| 3.4 小结 | 第57-58页 |
| 第4章 引物激活的环介导等温扩增方法用于基因的单核苷酸多态性检测 | 第58-80页 |
| 4.1 前言 | 第58-59页 |
| 4.2 实验部分 | 第59-63页 |
| 4.2.1 试剂 | 第59-62页 |
| 4.2.2 SNP的分析检测实验 | 第62页 |
| 4.2.3 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第62页 |
| 4.2.4 细胞的培养和基因组DNA的提取 | 第62-63页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第63-79页 |
| 4.3.1 SNP检测实验原理 | 第63-64页 |
| 4.3.2 RNase H2酶对等位特异性的区分能力探究 | 第64-65页 |
| 4.3.3 KRAS突变基因的检测 | 第65-74页 |
| 4.3.4 β-地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C>T)突变基因的检测 | 第74-79页 |
| 4.4 小结 | 第79-80页 |
| 第5章 引物激活的环介导等温扩增方法用于致病菌的双重检测 | 第80-94页 |
| 5.1 前言 | 第80-81页 |
| 5.2 实验部分 | 第81-84页 |
| 5.2.1 试剂 | 第81页 |
| 5.2.2 艰难梭菌TcdB基因和嗜肺军团菌mip基因的单重检测 | 第81-83页 |
| 5.2.3 艰难梭菌TcdB基因和嗜肺军团菌mip基因的双重检测 | 第83页 |
| 5.2.4 反应产物的熔解曲线的测定 | 第83-84页 |
| 5.2.5 细菌的培养和基因组样品的提取 | 第84页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第84-93页 |
| 5.3.1 引物的设计与优化 | 第84-86页 |
| 5.3.2 温度优化 | 第86-87页 |
| 5.3.3 LAMP反应产物的熔解曲线表征 | 第87-88页 |
| 5.3.4 TcdB基因和mip基因的单重检测的灵敏度分析 | 第88-90页 |
| 5.3.5 艰难梭菌和嗜肺军团菌的双重检测 | 第90-93页 |
| 5.4 小结 | 第93-94页 |
| 结论 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-115页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文及专利目录 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
