| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 选题意义 | 第15页 |
| 1.2 纤维素酶简介 | 第15-17页 |
| 1.2.1 纤维素酶分类 | 第16页 |
| 1.2.2 纤维素酶作用机制 | 第16-17页 |
| 1.3 纤维素酶的来源 | 第17-18页 |
| 1.3.1 细菌 | 第17页 |
| 1.3.2 真菌 | 第17-18页 |
| 1.3.3 放线菌 | 第18页 |
| 1.4 高产纤维素酶菌株的选育 | 第18-19页 |
| 1.4.1 自然选育 | 第18页 |
| 1.4.2 诱变育种 | 第18-19页 |
| 1.4.3 基因工程 | 第19页 |
| 1.5 发酵条件对纤维素酶的影响 | 第19-21页 |
| 1.5.1 培养基组分对纤维素酶的影响 | 第20-21页 |
| 1.5.2 培养条件对纤维素酶产量的影响 | 第21页 |
| 1.6 研究目的及内容 | 第21-23页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第21-22页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 匍枝根霉纤维素酶高产菌株的诱变选育 | 第23-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌种 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第24页 |
| 2.1.4 培养基 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.2.1 孢子悬浮液的制备 | 第25页 |
| 2.2.2 菌株诱变及筛选 | 第25页 |
| 2.2.3 突变株的筛选 | 第25页 |
| 2.2.4 致死率计算 | 第25-26页 |
| 2.2.5 测定方法 | 第26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-31页 |
| 2.3.1 葡萄糖标准曲线 | 第26页 |
| 2.3.2 紫外诱变 | 第26-28页 |
| 2.3.3 EMS诱变 | 第28-29页 |
| 2.3.4 复合诱变 | 第29-30页 |
| 2.3.5 遗传稳定性 | 第30-31页 |
| 2.4 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 高产菌株发酵产纤维素酶培养基及培养条件优化 | 第32-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1 菌种 | 第32页 |
| 3.1.2 试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 仪器与设备 | 第33页 |
| 3.1.4 培养基 | 第33页 |
| 3.1.5 测定方法 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 碳源对纤维素酶产生的影响 | 第34页 |
| 3.2.2 氮源对纤维素酶产生的影响 | 第34页 |
| 3.2.3 聚乙二醇系列对纤维素酶产生的影响 | 第34页 |
| 3.2.4 各种氨基酸的添加对纤维素酶产生的影响 | 第34页 |
| 3.2.5 正交实验优化培养基组分 | 第34-35页 |
| 3.2.6 培养条件对纤维素酶产生的影响 | 第35-36页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第36-42页 |
| 3.3.1 碳源对纤维素酶产生的影响 | 第36页 |
| 3.3.2 氮源对纤维素酶产生的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.3 聚乙二醇系列物质对纤维素酶的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.4 各种氨基酸的添加对纤维素酶的影响 | 第38页 |
| 3.3.5 正交试验优化培养基组分 | 第38-40页 |
| 3.3.6 培养温度对纤维素酶活的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.7 初始pH对纤维素酶活的影响 | 第41页 |
| 3.3.8 摇瓶发酵最优条件下产纤维素酶的比较 | 第41-42页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第42-44页 |
| 第4章 10L发酵罐发酵工艺研究 | 第44-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第44-46页 |
| 4.1.1 菌种 | 第44页 |
| 4.1.2 试剂 | 第44-45页 |
| 4.1.3 仪器与设备 | 第45页 |
| 4.1.4 培养基 | 第45-46页 |
| 4.1.5 酶活测定方法 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-47页 |
| 4.2.1 10L发酵罐一般放大实验 | 第46页 |
| 4.2.2 控制pH和溶氧对产酶的影响 | 第46页 |
| 4.2.3 补料对产酶的影响 | 第46页 |
| 4.2.4 优化后纤维素酶发酵情况 | 第46-47页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第47-52页 |
| 4.3.1 10L发酵罐一般放大实验 | 第47-48页 |
| 4.3.2 控制pH和溶氧对产酶的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.3 补料对产酶的影响 | 第49-51页 |
| 4.3.4 优化后纤维素酶发酵情况 | 第51-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-53页 |
| 第五章 诱变株β-葡萄糖苷酶特性变化分子机制研究 | 第53-66页 |
| 5.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 5.1.1 菌种及质粒 | 第53页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
| 5.1.3 主要实验仪器 | 第54页 |
| 5.1.4 培养基及主要溶液 | 第54-55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 5.2.1 菌丝体培养及预处理 | 第55页 |
| 5.2.2 基因组DNA提取 | 第55页 |
| 5.2.3 q-PCR检测β-葡萄糖苷酶mRNA转录水平 | 第55页 |
| 5.2.4 目的片段扩增 | 第55-57页 |
| 5.2.5 目的片段纯化 | 第57页 |
| 5.2.6 大肠杆菌JM109感受态的制备 | 第57页 |
| 5.2.7 bgl4基因与pUCM-T载体的连接及转化 | 第57页 |
| 5.2.8 筛选、验证阳性转化子及目的基因测序 | 第57-58页 |
| 5.2.9 生物信息学分析 | 第58页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第58-65页 |
| 5.3.1 诱变株与原菌在酶活及转录水平上的差异比较 | 第58-59页 |
| 5.3.2 诱变株β-葡萄糖苷酶BGLIV基因的获取 | 第59-61页 |
| 5.3.3 BGL IV基本特性分析 | 第61-62页 |
| 5.3.4 BGL IV生物信息学分析 | 第62-65页 |
| 5.4 小结 | 第65-66页 |
| 第六章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 6.1 结论 | 第66-67页 |
| 6.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
