| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·miRNA的生物学特点与合成机制 | 第10-12页 |
| ·miRNA的基因组位置与结构 | 第11页 |
| ·miRNA合成的一般过程 | 第11-12页 |
| ·动植物中miRNA合成的差异 | 第12页 |
| ·miRNA的功能 | 第12-15页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第12-13页 |
| ·miRNA的功能 | 第13-15页 |
| ·miRNA靶位点分析与鉴定 | 第15-17页 |
| ·计算机分析miRNA靶位点的原理与应用 | 第15-16页 |
| ·miRNA靶位点的鉴定 | 第16-17页 |
| ·过氧化物酶体与过氧化物酶体疾病 | 第17-20页 |
| ·过氧化物酶体 | 第17-18页 |
| ·过氧化物酶体生物发生与增殖 | 第18-20页 |
| ·过氧化物酶体相关疾病 | 第20页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 材料 | 第22-29页 |
| ·使用的数据库及分析软件 | 第22-23页 |
| ·细胞和质粒 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·试剂与耗材 | 第26-27页 |
| ·引物序列 | 第27-29页 |
| 第三章 方法 | 第29-40页 |
| ·调控过氧化物酶体生物发生与增殖的miRNA预测 | 第29-30页 |
| ·选择调节过氧化物酶体生物合成与增殖的基因作为研究对象 | 第29页 |
| ·miRNA靶位点确定 | 第29页 |
| ·预测结果的可靠性分析 | 第29页 |
| ·候选miRNA与候选靶基因的组织表达特异性相关性分析 | 第29-30页 |
| ·预测结果的实验验证 | 第30-40页 |
| ·miRNA表达载体构建 | 第30-33页 |
| ·构建携带靶基因3'UTR的psicheck-2质粒 | 第33-38页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·转染meNPC细胞 | 第39页 |
| ·利用双萤光素酶报告系统检测miRNA对携带靶位点序列的萤光素酶报告基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 第四章 结果与分析 | 第40-61页 |
| ·调控过氧化物酶体生物合成与增殖的miRNA预测 | 第40-53页 |
| ·miRNA靶位点确定 | 第40-44页 |
| ·靶位点保守性分析 | 第44-51页 |
| ·预测结果的可靠性分析 | 第51-52页 |
| ·候选miRNA与候选靶基因的组织表达特异性相关性分析 | 第52-53页 |
| ·micro表达载体构建 | 第53-56页 |
| ·miRNA Stem-Loop序列扩增 | 第53页 |
| ·菌落PCR鉴定miRNA表达载体 | 第53-54页 |
| ·miRNA表达载体测序 | 第54-56页 |
| ·携带靶基因3'UTR的psicheck-2质粒构建 | 第56-59页 |
| ·小鼠基因组DNA提取 | 第56页 |
| ·靶序列扩增 | 第56-57页 |
| ·菌落PCR鉴定各pMD-19-utr阳性克隆 | 第57-58页 |
| ·阳性克隆测序鉴定 | 第58-59页 |
| ·酶切验证阳性psiCHECK-2重组质粒 | 第59页 |
| ·报告基因检测 | 第59-61页 |
| 第五章 讨论 | 第61-64页 |
| ·过氧化物酶体生物合成与增殖在细胞中可能受到miRNA的复杂调控 | 第61页 |
| ·计算机预测是miRNA功能研究的重要方法 | 第61-62页 |
| ·miRNA靶位点预测应考虑miRNA与靶基因的表达变化相关性 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第68页 |
