| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 缩略词简表 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 农用抗生素和尼莫克汀 | 第13-14页 |
| 1.2 尼莫克汀结构特征 | 第14-15页 |
| 1.3 尼莫克汀衍生物——莫西菌素 | 第15-18页 |
| 1.3.1 莫西菌素的结构特征 | 第15页 |
| 1.3.2 莫西菌素的驱虫活性和作用机制 | 第15-16页 |
| 1.3.3 莫西菌素的半化学合成 | 第16-18页 |
| 1.4 尼莫克汀的生物合成 | 第18-20页 |
| 1.4.1 尼莫克汀的生物合成基因簇 | 第18-19页 |
| 1.4.2 尼莫克汀生物合成途径 | 第19-20页 |
| 1.5 尼莫克汀的生产现状 | 第20-21页 |
| 1.6 立题依据 | 第21-22页 |
| 第二章 nemD基因敲除菌株的构建 | 第22-37页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第23-27页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第23-25页 |
| 2.1.3 培养基 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 链霉菌的发酵培养方法 | 第27页 |
| 2.2.2 发酵液的HPLC分析方法 | 第27-28页 |
| 2.2.3 基因组提取 | 第28页 |
| 2.2.4 孢子悬液的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.5 敲除质粒构建 | 第29-31页 |
| 2.2.6 接合转移 | 第31页 |
| 2.2.7 双交换筛选 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第32-36页 |
| 2.3.1 敲除质粒pSET-nemD的构建 | 第32页 |
| 2.3.2 敲除菌株的单/双交换筛选 | 第32-34页 |
| 2.3.3 敲除菌株MOX-△nemD149的发酵验证 | 第34-35页 |
| 2.3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.4 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 寡霉素类似物基因oli敲除菌的构建 | 第37-49页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第39-40页 |
| 3.1.1 质粒与菌株 | 第39页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第39-40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.2.1 敲除质粒pKC1139-oli的构建 | 第40-42页 |
| 3.2.2 接合转移构建单交换菌株 | 第42页 |
| 3.2.3 双交换诱导 | 第42页 |
| 3.2.4 敲除菌株MOX-△oli-72的发酵验证 | 第42页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第42-48页 |
| 3.3.1 敲除质粒pKC1139-oli的构建 | 第42-43页 |
| 3.3.2 敲除菌株的单/双交换筛选 | 第43-45页 |
| 3.3.3 敲除菌株MOX-△oli-72的发酵结果 | 第45-47页 |
| 3.3.4 讨论 | 第47-48页 |
| 3.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 点突变以获得尼莫克汀酮工程菌 | 第49-60页 |
| 4.1 试剂与仪器 | 第50-51页 |
| 4.1.1 质粒与菌株 | 第50-51页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 点突变质粒的构建 | 第51-54页 |
| 4.2.2 点突变单/双交换菌株的构建 | 第54页 |
| 4.2.3 发酵培养与验证 | 第54页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第54-59页 |
| 4.3.1 点突变质粒的构建 | 第54-55页 |
| 4.3.2 单/双交换菌株的筛选 | 第55-56页 |
| 4.3.3 发酵培养与验证 | 第56-57页 |
| 4.3.4 讨论 | 第57-59页 |
| 4.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 总结与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录 | 第67页 |
