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嗜热PHA积累菌株的筛选鉴定及其产PHA性能的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第12-25页
    1.1 聚羟基脂肪酸酯(PHA)的简介第12-14页
        1.1.1 PHA 的研究历史第12页
        1.1.2 PHA 的结构及分类第12-13页
        1.1.3 PHB 的结构及理化性质第13-14页
    1.2 PHA 的生物合成第14-16页
        1.2.1 PHA 合成的微生物学意义第14-15页
        1.2.2 合成 PHA 的微生物第15页
        1.2.3 PHA 的微生物合成途径第15-16页
    1.3 PHA 的提取第16-20页
        1.3.1 有机溶剂法第17-18页
        1.3.2 消化方法第18-19页
            1.3.2.1 化学消化第18-19页
            1.3.2.2 酶消化法第19页
        1.3.3 机械破碎法第19页
        1.3.4 超临界流体第19-20页
    1.4 PHA 的检测方法第20-22页
        1.4.1 染色法第20页
        1.4.2 荧光分光光度计法第20-21页
        1.4.3 核磁共振(NMR)法第21页
        1.4.4 重量分析法第21页
        1.4.5 气相色谱(GC)法第21页
        1.4.6 高效液色色谱(HPLC)法第21-22页
    1.5 PHA 的应用第22-23页
        1.5.1 在医药上的应用第22页
        1.5.2 在组织工作领域的应用第22页
        1.5.3 在工农业上的应用第22-23页
        1.5.4 其他应用第23页
    1.6 本论文的选题背景及内容第23-25页
        1.6.1 研究背景及意义第23-24页
        1.6.2 研究内容第24-25页
第二章 产聚羟基脂肪酸酯嗜热菌株的筛选鉴定第25-44页
    2.1 引言第25页
    2.2 菌种来源第25-26页
    2.3 实验材料与方法第26-29页
        2.3.1 培养基及引物第26页
        2.3.2 主要试剂及仪器第26-27页
        2.3.3 尼罗红染色法筛选产 PHA 菌株第27-28页
        2.3.4 荧光显微镜观察细菌体内 PHA 的积累情况第28页
        2.3.5 菌种保藏第28页
        2.3.6 菌种鉴定第28-29页
    2.4 高产 PHA 菌株的筛选第29-32页
        2.4.1 菌种的富集培养第29页
        2.4.2 富集菌液梯度稀释液的制备第29-30页
        2.4.3 高产 PHA 菌株的初筛第30-31页
        2.4.4 高效产 PHA 菌株的复筛第31-32页
    2.5 产 PHA 分离菌 K5 的鉴定第32-42页
        2.5.1 菌株 K5 的生理生化特性实验第32-38页
        2.5.2 16S rDNA 序列同源性分析第38-42页
            2.5.2.1 菌株 K5 的 DNA 提取第39页
            2.5.2.2 PCR 扩增 16S rDNA第39-40页
            2.5.2.3 16S rDNA 测序第40-41页
            2.5.2.4 系统发育树的建立第41-42页
    2.6 本章小结第42-44页
第三章 产物的定性分析及性能测定第44-57页
    3.1 引言第44-45页
    3.2 实验材料与方法第45-47页
        3.2.1 主要的材料、试剂及仪器第45页
        3.2.2 荧光显微镜观察 K5 细胞内 PHA 的颗粒情况第45页
        3.2.3 PHA 的提取第45-46页
        3.2.4 气相色谱(GC)定性分析第46页
        3.2.5 傅里叶红外衍射法(FTIR)分析第46-47页
        3.2.6 核磁共振法(NMR)分析第47页
        3.2.7 热重(TGA)分析第47页
    3.3 荧光显微镜镜检定性第47-48页
    3.4 气相色谱(GC)分析第48-49页
    3.5 产物的傅立叶红外光谱(FTIR)分析第49-51页
    3.6 产物的核磁共振分析第51-52页
    3.7 产物的热重分析第52-53页
    3.8 PHB 的降解性研究第53-55页
        3.8.1 PHB 膜的制备第53-54页
        3.8.2 降解性测定实验设计第54页
        3.8.3 降解性实验结果第54-55页
    3.9 本章小结第55-57页
第四章 K5 产 PHB 发酵的初步条件优化第57-68页
    4.1 引言第57页
    4.2 实验材料与方法第57-59页
        4.2.1 菌株第57页
        4.2.2 培养基第57-58页
        4.2.3 主要试剂及仪器第58页
        4.2.4 生物量的测定及公式定义第58页
        4.2.5 气相检测前的样品预处理第58页
        4.2.6 气相色谱(GC)内标法定量分析第58-59页
    4.3 不同碳源对菌体生长及产 PHB 的影响第59-60页
    4.4 菌株 K5 的生长及 PHB 积累曲线第60-62页
    4.5 培养温度对菌体产 PHB 的影响第62-63页
    4.6 培养基初始 pH 对菌体产 PHB 的影响第63-64页
    4.7 生物反应器的扩大培养第64-66页
    4.8 本章小结第66-68页
结论与展望第68-70页
参考文献第70-80页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第80-81页
致谢第81-82页
附件第82页

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