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家蚕雄蛾触角特异谷胱甘肽-S-转移酶BmGSTD4的基因克隆、表达及功能研究

摘要第8-11页
Abstract第11-13页
第一章 文献综述第14-24页
    1.1 谷胱甘肽-s-转移酶概述第14页
    1.2 谷胱甘肽-S-转移酶的分类及命名第14-15页
    1.3 谷胱甘肽S-转移酶的结构第15页
    1.4 谷胱甘肽-S-转移酶的进化第15-16页
    1.5 谷胱甘肽-S转移酶的功能第16-19页
        1.5.1 谷胱甘肽-S-转移酶的解毒代谢第16-17页
        1.5.2 谷胱甘肽S-转移酶的配体功能第17-18页
        1.5.3 谷胱甘肽-S-转移酶在嗅觉中的作用第18-19页
    1.6 谷胱甘肽-S-转移酶的研究进展第19-24页
        1.6.1 谷胱甘肽S-转移酶在非昆虫中的研究进展第19-20页
        1.6.2 谷胱甘肽S-转移酶在昆虫中的研究进展第20-21页
        1.6.3 谷胱甘肽-S转移酶在家蚕中的研究进展第21-22页
        1.6.4 谷胱甘肽转移酶在嗅觉系统中的研究进展第22-24页
第二章 引言第24-26页
    2.1 研宄背景及意义第24页
    2.2 研究内容第24页
    2.3 技术路线第24-26页
第三章 家蚕BmGSTd4 基因表达特征分析第26-34页
    3.1 材料与试剂第26-27页
        3.1.1 实验材料第26页
        3.1.2 实验试剂第26-27页
        3.1.3 主要溶液及配制第27页
        3.1.4 主要仪器设备第27页
    3.2 方法与步骤第27-30页
        3.2.1 家蚕样品总RNA的提取第27-28页
        3.2.2 RNA的检测第28页
        3.2.3 cDNA的制备及检测第28-29页
        3.2.4 BmGSTdA基因转录水平的RT-PCR第29-30页
    3.3 结果与分析第30-31页
        3.3.1 BmGSTd4在五龄第3天不同组织的表达特征第30页
        3.3.2 BmGSTd4在不同时期的表达特征第30-31页
        3.3.3 BmGSTd4在蛾第1天不同组织的表达特征第31页
    3.4 讨论第31-34页
第四章 BmGSTd4基因的全长克隆及序列分析第34-44页
    4.1 材料与试剂第34-35页
        4.1.1 实验材料第34页
        4.1.2 实验试剂第34页
        4.1.3 主要溶剂及配制第34-35页
        4.1.4 主要仪器第35页
    4.2 实验方法第35-39页
        4.2.1 家蚕Delta亚家族GSTs的生物信息学第35页
        4.2.2 全长克隆第35-38页
        4.2.3 BmGSTd4 ORF的克隆第38-39页
    4.3 结果与分析第39-43页
        4.3.1 家蚕Delta亚家族GSTs生物信息学分析第39-40页
        4.3.2 BmGSTd4全长核苷酸与氨基酸序列分析第40-41页
        4.3.3 BmGSTd4基因的结构分析第41页
        4.3.4 BmGSTd4基因的蛋白结构域分析第41-42页
        4.3.5 BmGSTd4基因的进化关系分析第42页
        4.3.6 BmGSTd4 ORF克隆第42-43页
    4.4 讨论第43-44页
第五章 BmGSTD4的原核表达与多克隆抗体制备第44-54页
    5.1 材料与试剂第44-46页
        5.1.1 表达载体与表达菌株第44页
        5.1.2 实验试剂第44页
        5.1.3 实验仪器第44页
        5.1.4 主要溶剂配制第44-46页
    5.2 方法第46-50页
        5.2.1 重组表达载体的构建第46-48页
        5.2.2 原核表达第48-49页
        5.2.3 目的蛋白纯化第49-50页
    5.3 结果与分析第50-53页
        5.3.1 原核表达重组质粒的构建第50-51页
        5.3.2 原核表达目的蛋白第51-52页
        5.3.3 目的蛋白的纯化第52-53页
    5.4 讨论第53-54页
第六章 家蚕BmGSTd4基因的功能研究第54-62页
    6.1 材料与试剂第54-56页
        6.1.1 材料第54页
        6.1.2 试剂第54-55页
        6.1.3 仪器第55页
        6.1.4 主要溶剂配制第55-56页
    6.2 实验方法第56-59页
        6.2.1 western blot验证第56-57页
        6.2.2 免疫荧光定位第57-58页
        6.2.3 酶活测定第58-59页
    6.3 结果第59-61页
        6.3.1 酶活测定第59页
        6.3.2 Western blot验证第59-60页
        6.3.3 免疫荧光定位第60-61页
    6.4 讨论第61-62页
第七章 结论第62-64页
    7.1 BmGSTd4基因的表达特征分析第62页
    7.2 BmGSTd4基因的全长克隆及序列分析第62页
    7.3 BmGSTd4基因的原核表达与抗体制备第62-63页
    7.4 BmGSTD4的功能初探第63-64页
参考文献第64-72页
在校期间发表论文、申请专利与参与课题第72-74页
致谢第74页

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