摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 谷胱甘肽-s-转移酶概述 | 第14页 |
1.2 谷胱甘肽-S-转移酶的分类及命名 | 第14-15页 |
1.3 谷胱甘肽S-转移酶的结构 | 第15页 |
1.4 谷胱甘肽-S-转移酶的进化 | 第15-16页 |
1.5 谷胱甘肽-S转移酶的功能 | 第16-19页 |
1.5.1 谷胱甘肽-S-转移酶的解毒代谢 | 第16-17页 |
1.5.2 谷胱甘肽S-转移酶的配体功能 | 第17-18页 |
1.5.3 谷胱甘肽-S-转移酶在嗅觉中的作用 | 第18-19页 |
1.6 谷胱甘肽-S-转移酶的研究进展 | 第19-24页 |
1.6.1 谷胱甘肽S-转移酶在非昆虫中的研究进展 | 第19-20页 |
1.6.2 谷胱甘肽S-转移酶在昆虫中的研究进展 | 第20-21页 |
1.6.3 谷胱甘肽-S转移酶在家蚕中的研究进展 | 第21-22页 |
1.6.4 谷胱甘肽转移酶在嗅觉系统中的研究进展 | 第22-24页 |
第二章 引言 | 第24-26页 |
2.1 研宄背景及意义 | 第24页 |
2.2 研究内容 | 第24页 |
2.3 技术路线 | 第24-26页 |
第三章 家蚕BmGSTd4 基因表达特征分析 | 第26-34页 |
3.1 材料与试剂 | 第26-27页 |
3.1.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
3.1.3 主要溶液及配制 | 第27页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第27页 |
3.2 方法与步骤 | 第27-30页 |
3.2.1 家蚕样品总RNA的提取 | 第27-28页 |
3.2.2 RNA的检测 | 第28页 |
3.2.3 cDNA的制备及检测 | 第28-29页 |
3.2.4 BmGSTdA基因转录水平的RT-PCR | 第29-30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-31页 |
3.3.1 BmGSTd4在五龄第3天不同组织的表达特征 | 第30页 |
3.3.2 BmGSTd4在不同时期的表达特征 | 第30-31页 |
3.3.3 BmGSTd4在蛾第1天不同组织的表达特征 | 第31页 |
3.4 讨论 | 第31-34页 |
第四章 BmGSTd4基因的全长克隆及序列分析 | 第34-44页 |
4.1 材料与试剂 | 第34-35页 |
4.1.1 实验材料 | 第34页 |
4.1.2 实验试剂 | 第34页 |
4.1.3 主要溶剂及配制 | 第34-35页 |
4.1.4 主要仪器 | 第35页 |
4.2 实验方法 | 第35-39页 |
4.2.1 家蚕Delta亚家族GSTs的生物信息学 | 第35页 |
4.2.2 全长克隆 | 第35-38页 |
4.2.3 BmGSTd4 ORF的克隆 | 第38-39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-43页 |
4.3.1 家蚕Delta亚家族GSTs生物信息学分析 | 第39-40页 |
4.3.2 BmGSTd4全长核苷酸与氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
4.3.3 BmGSTd4基因的结构分析 | 第41页 |
4.3.4 BmGSTd4基因的蛋白结构域分析 | 第41-42页 |
4.3.5 BmGSTd4基因的进化关系分析 | 第42页 |
4.3.6 BmGSTd4 ORF克隆 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-44页 |
第五章 BmGSTD4的原核表达与多克隆抗体制备 | 第44-54页 |
5.1 材料与试剂 | 第44-46页 |
5.1.1 表达载体与表达菌株 | 第44页 |
5.1.2 实验试剂 | 第44页 |
5.1.3 实验仪器 | 第44页 |
5.1.4 主要溶剂配制 | 第44-46页 |
5.2 方法 | 第46-50页 |
5.2.1 重组表达载体的构建 | 第46-48页 |
5.2.2 原核表达 | 第48-49页 |
5.2.3 目的蛋白纯化 | 第49-50页 |
5.3 结果与分析 | 第50-53页 |
5.3.1 原核表达重组质粒的构建 | 第50-51页 |
5.3.2 原核表达目的蛋白 | 第51-52页 |
5.3.3 目的蛋白的纯化 | 第52-53页 |
5.4 讨论 | 第53-54页 |
第六章 家蚕BmGSTd4基因的功能研究 | 第54-62页 |
6.1 材料与试剂 | 第54-56页 |
6.1.1 材料 | 第54页 |
6.1.2 试剂 | 第54-55页 |
6.1.3 仪器 | 第55页 |
6.1.4 主要溶剂配制 | 第55-56页 |
6.2 实验方法 | 第56-59页 |
6.2.1 western blot验证 | 第56-57页 |
6.2.2 免疫荧光定位 | 第57-58页 |
6.2.3 酶活测定 | 第58-59页 |
6.3 结果 | 第59-61页 |
6.3.1 酶活测定 | 第59页 |
6.3.2 Western blot验证 | 第59-60页 |
6.3.3 免疫荧光定位 | 第60-61页 |
6.4 讨论 | 第61-62页 |
第七章 结论 | 第62-64页 |
7.1 BmGSTd4基因的表达特征分析 | 第62页 |
7.2 BmGSTd4基因的全长克隆及序列分析 | 第62页 |
7.3 BmGSTd4基因的原核表达与抗体制备 | 第62-63页 |
7.4 BmGSTD4的功能初探 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
在校期间发表论文、申请专利与参与课题 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |