| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 引言 | 第7-26页 |
| 1.1 研究背景 | 第7-25页 |
| 1.1.1 表观遗传学简介 | 第7-9页 |
| 1.1.2 表观遗传学因素简介 | 第9-16页 |
| 1.1.3 组蛋白变体H2A.Z简介 | 第16-21页 |
| 1.1.4 染色质重塑复合物简介 | 第21-23页 |
| 1.1.5 组蛋白分子伴侣简介 | 第23-25页 |
| 1.2 研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 研究材料和研究方法 | 第26-55页 |
| 2.1 组蛋白二聚体的组装 | 第26-33页 |
| 2.1.1 制备感受态细胞 | 第26-27页 |
| 2.1.2 重组载体构建 | 第27-31页 |
| 2.1.3 组蛋白提取 | 第31-32页 |
| 2.1.4 组装组蛋白二聚体 | 第32-33页 |
| 2.2 免疫亲和纯化 | 第33-37页 |
| 2.2.1 核提取物制备 | 第33-34页 |
| 2.2.2 离子交换分离细胞核提取物 | 第34-35页 |
| 2.2.3 Flag抗体琼脂糖凝胶免疫亲和纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.4 银染 | 第36-37页 |
| 2.3 体外重组蛋白之间的pull down | 第37-42页 |
| 2.3.1 组蛋白八聚体的组装 | 第37-38页 |
| 2.3.2 单核小体的组装 | 第38-39页 |
| 2.3.3 重组蛋白的表达及纯化 | 第39-40页 |
| 2.3.4 体外重组蛋白之间的pull down | 第40-42页 |
| 2.4 免疫共沉淀实验 | 第42-49页 |
| 2.4.1 过表达细胞系的建立 | 第42-46页 |
| 2.4.2 基于Flag抗体琼脂糖凝胶的免疫共沉淀 | 第46-47页 |
| 2.4.3 酚氯仿抽提DNA和乙醇沉淀DNA | 第47-48页 |
| 2.4.4 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第48-49页 |
| 2.5 组蛋白分子伴侣与DNA竞争结合组蛋白实验 | 第49-50页 |
| 2.6 染色质免疫沉淀实验 | 第50-52页 |
| 2.6.1 基于Flag抗体琼脂糖凝胶颗粒的染色质免疫共沉淀 | 第50-51页 |
| 2.6.2 基于Dynabeads(?)蛋白A的染色质免疫共沉淀 | 第51-52页 |
| 2.7 高通量测序文库接头的制备 | 第52页 |
| 2.8 高通量测序文库的制备 | 第52-55页 |
| 第三章 研究结果 | 第55-65页 |
| 3.1 免疫亲和纯化实验寻找H2A.Z/H2B特异识别蛋白 | 第55-57页 |
| 3.2 体外亲和pull down实验验证Anp32e能够特异识别H2A.Z/H2B二聚体 | 第57-60页 |
| 3.3 Anp32e蛋白不与含有H2A.Z的核小体结合 | 第60页 |
| 3.5 Anp32e蛋白C端酸性区域与H2A.Z/H2B二聚体结合 | 第60-61页 |
| 3.6 Anp32e能够阻止H2A.Z/H2B二聚体与DNA之间形成非特异的多聚体 | 第61-63页 |
| 3.7 Anp32e具有与H2A.Z相似的基因组分布模式 | 第63-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
