| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1 植物的先天防御系统 | 第12-14页 |
| 2 植物模式识别受体(PRRs)的研究进展 | 第14-15页 |
| 3 受体类激酶(RLKs)的研究进展 | 第15-17页 |
| 3.1 鞭毛蛋白受体FLS2的相关研究进展 | 第15-16页 |
| 3.2 FLS2的共受体BAK1的研究进展 | 第16-17页 |
| 4 病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)研究进展 | 第17-18页 |
| 5 本研究的目的以及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-42页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1 植物材料 | 第20页 |
| 1.2 菌种和病毒材料 | 第20页 |
| 1.3 实验试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 1.4 实验设计软件 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-42页 |
| 2.1 大豆培养 | 第21-22页 |
| 2.2 受体类激酶GmFLS2和GmBAK1沉默载体的构建 | 第22-30页 |
| 2.2.1 小量质粒的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 目的片段的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.3 切胶回收 | 第24-25页 |
| 2.2.4 质粒与目的片段的酶切、纯化与连接 | 第25-27页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.6 热激转化 | 第28-29页 |
| 2.2.7 菌落PCR鉴定 | 第29页 |
| 2.2.8 质粒酶切验证 | 第29-30页 |
| 2.3 基因枪法获得GmFLS2和GmBAK1沉默植株 | 第30-32页 |
| 2.4 沉默植株表型的鉴定及验证 | 第32-38页 |
| 2.4.1 表型的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.4.2 病毒汁液的保存与接种 | 第33-34页 |
| 2.4.3 大豆RNA的提取及逆转录 | 第34-36页 |
| 2.4.4 大豆基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.4.5 半定量R-PCR | 第37-38页 |
| 2.5 细菌侵染植株 | 第38-39页 |
| 2.6 GUS染色 | 第39-40页 |
| 2.7 蛋白激酶的分析 | 第40-42页 |
| 第三章 实验结果分析 | 第42-55页 |
| 3.1 沉默载体构建的策略 | 第42-44页 |
| 3.2 BPMV-GmFLS2和BPMV-GmBAK1沉默植株的表型分析 | 第44-46页 |
| 3.3 BPMV-GmFLS2和BPMV-GmBAK1沉默株沉默效果的分子检测 | 第46-47页 |
| 3.4 BPMV-GmFLS2和BPMV-GmBAK1沉默植株对Xag (Xanthomonas campestris pv.glycines大豆斑疹病菌)和Psg (Pseudomonas syringae pv. glycinea大豆斑点病菌)的抗性降低 | 第47-52页 |
| 3.5 BPMV-GmBAK1沉默植株对Soybean mosaic viru (SMV)的抗性增强 | 第52-53页 |
| 3.6 沉默GmFLS2对flg22应答效应 | 第53-55页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 附录 | 第68-76页 |
| 1 实验常用培养基的配制方法 | 第68-69页 |
| 2 常用试剂和缓冲液的配方 | 第69-73页 |
| 3 引物列表 | 第73-75页 |
| 4 flg22氨基酸序列在Psg与Pst中的差异 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77-79页 |
