中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词表Abbreviations | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-21页 |
1.1 漆酶概述 | 第10-12页 |
1.1.1 漆酶及其来源 | 第10-11页 |
1.1.2 漆酶的结构与催化机理 | 第11页 |
1.1.3 漆酶的生化特性 | 第11-12页 |
1.1.4 漆酶的应用 | 第12页 |
1.2 真菌漆酶基因表达调控的研究进展 | 第12-17页 |
1.2.1 漆酶基因结构 | 第12-13页 |
1.2.2 漆酶基因的表达调控 | 第13-15页 |
1.2.3 漆酶基因启动子区域调控元件的种类及功能 | 第15-17页 |
1.3 实时荧光定量PCR(qPCR)技术及其应用 | 第17-18页 |
1.3.1 qPCR技术的基本原理 | 第17页 |
1.3.2 qPCR技术在真菌漆酶基因表达调控研究中的应用 | 第17-18页 |
1.4 真菌漆酶基因表达调控研究的意义 | 第18-19页 |
1.5 选题依据 | 第19页 |
1.6 主要研究内容 | 第19-21页 |
1.6.1 产漆酶诱导条件的筛选 | 第19页 |
1.6.2 qPCR内参基因的选择与验证 | 第19页 |
1.6.3 不同条件下漆酶基因的表达调控分析 | 第19-21页 |
第二章 Cerrena unicolor产酶诱导条件的筛选 | 第21-36页 |
2.1 实验材料与设备 | 第21-24页 |
2.1.1 实验菌株 | 第21页 |
2.1.2 培养基 | 第21-23页 |
2.1.3 主要试剂及配制方法 | 第23页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-26页 |
2.2.1 产酶培养基对HYB07菌株产漆酶的影响 | 第24-25页 |
2.2.2 金属离子对HYB07菌株产漆酶的影响 | 第25页 |
2.2.3 芳香族化合物对HYB07菌株产漆酶的影响 | 第25-26页 |
2.2.4 碳氮比及碳氮源种类对HYB07菌株产漆酶的影响 | 第26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-34页 |
2.3.1 不同产酶培养基对产酶的影响 | 第26-28页 |
2.3.2 金属离子对产酶的影响 | 第28-30页 |
2.3.3 芳香族化合物对产酶的影响 | 第30-32页 |
2.3.4 碳氮比及碳氮源种类对产酶的影响 | 第32-34页 |
2.4 小结 | 第34-36页 |
第三章 Cerrena unicolor实时荧光定量PCR内参基因的选择与验证 | 第36-58页 |
3.1 实验材料与设备 | 第36-38页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第36页 |
3.1.2 培养基 | 第36-37页 |
3.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-43页 |
3.2.1 候选内参基因的克隆 | 第38-39页 |
3.2.2 候选内参基因qPCR引物的设计与特异性验证 | 第39-40页 |
3.2.3 qPCR内参基因的选择 | 第40-43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-56页 |
3.3.1 候选内参基因qPCR引物的设计及特异性验证结果 | 第43-46页 |
3.3.2 候选内参基因的稳定性分析结果 | 第46-56页 |
3.4 小结 | 第56-58页 |
第四章 不同条件下Cerrena unicolor漆酶基因的表达调控分析 | 第58-95页 |
4.1 实验材料与设备 | 第58-59页 |
4.1.1 菌株 | 第58页 |
4.1.2 培养基 | 第58-59页 |
4.1.3 主要试剂 | 第59页 |
4.1.4 主要仪器与数据处理软件 | 第59页 |
4.2 实验方法 | 第59-62页 |
4.2.1 漆酶基因qPCR引物的设计与特异性验证 | 第59页 |
4.2.2 不同实验条件菌体样品的收集 | 第59-60页 |
4.2.3 RNA提取及反转录 | 第60页 |
4.2.4 qPCR | 第60页 |
4.2.5 定量策略与qPCR数据处理 | 第60-61页 |
4.2.6 生物量和漆酶活力测定 | 第61页 |
4.2.7 漆酶基因启动子序列分析 | 第61-62页 |
4.3 结果与分析 | 第62-94页 |
4.3.1 漆酶基因qPCR引物的设计与特异性验证结果 | 第62-65页 |
4.3.2 不同生长阶段漆酶基因的表达变化 | 第65-72页 |
4.3.3 金属离子对漆酶基因表达的影响 | 第72-78页 |
4.3.4 芳香族化合物对漆酶基因表达的影响 | 第78-82页 |
4.3.5 碳氮比对漆酶基因表达的影响 | 第82-84页 |
4.3.6 碳、氮源种类对漆酶基因表达的影响 | 第84-88页 |
4.3.7 不同因素对漆酶基因表达调控的综合分析 | 第88-89页 |
4.3.8 漆酶基因差异性表达与启动子序列分析结合 | 第89-94页 |
4.4 小结 | 第94-95页 |
结论与展望 | 第95-98页 |
结论 | 第95-97页 |
展望 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-105页 |
附录 | 第105-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
个人简历 | 第116页 |