| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-36页 |
| ·类病毒概述 | 第13-19页 |
| ·类病毒的发现及分类 | 第13-15页 |
| ·类病毒的生物学特征 | 第15-19页 |
| ·类病毒的结构 | 第19-21页 |
| ·类病毒的复制 | 第21-26页 |
| ·类病毒的亚细胞定位 | 第22页 |
| ·RNA 转录 | 第22-25页 |
| ·剪切和连接 | 第25-26页 |
| ·类病毒的移动和运输 | 第26-28页 |
| ·细胞与细胞间的转运 | 第27页 |
| ·长距离运输 | 第27-28页 |
| ·类病毒的致病机制 | 第28-32页 |
| ·类病毒与寄主因子的相互作用 | 第28-31页 |
| ·RNA 沉默与类病毒致病性 | 第31页 |
| ·类病毒的侵染对寄主特定基因的表达的影响 | 第31-32页 |
| ·类病毒的遗传与进化 | 第32页 |
| ·种群形成机制 | 第32页 |
| ·遗传多样性与寄主的适应性 | 第32页 |
| ·类病毒研究的基础生物学意义 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的、意义及技术路线 | 第33-36页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第34-36页 |
| 第二章 多聚探针同时检测 4 种侵染葡萄的类病毒 | 第36-46页 |
| ·前言 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·材料的采集 | 第37页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·总 RNA 提取 | 第38页 |
| ·RT-PCR，克隆和测序 | 第38-39页 |
| ·单个类病毒的探针和多聚探针 (Polyprobe) 的制备 | 第39-40页 |
| ·斑点杂交 (Dot-blot hybridization) | 第40页 |
| ·结果 | 第40-44页 |
| ·提取的葡萄总 RNA 的质量 | 第40页 |
| ·多聚探针检测的特异性和灵敏度测定 | 第40-41页 |
| ·使用多聚探针检测田间葡萄样品 | 第41-42页 |
| ·葡萄类病毒田间发生分布的调查 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 HSVd 发生和分布的调查及遗传进化分析 | 第46-68页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-49页 |
| ·样品采集 | 第46-47页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第47-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-53页 |
| ·低分子量 RNA 的提取及浓度测定 | 第49页 |
| ·HSVd-cRNA 探针制备及斑点杂交 (dot-blot hybridization) | 第49-51页 |
| ·RT-PCR、克隆和测序 | 第51-53页 |
| ·序列分析及 HSVd 二级结构预测 | 第53页 |
| ·系统发育分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-64页 |
| ·发生和分布 | 第53页 |
| ·多序列比对 | 第53-55页 |
| ·系统发育分析 | 第55-62页 |
| ·重组分析 | 第62-63页 |
| ·突变位点及信息位点的分析 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| ·HSVd 在不同寄主间的交叉传播 | 第64-66页 |
| ·重组和突变是 HSVd 进化的动力 | 第66页 |
| ·HSVd 复制相关的 Hairpin I 和 Loop E-like 结构基序 | 第66-68页 |
| 第四章 HSVd-KY04 及 HSVd-KFKi 的寄主适应性和致病性研究 | 第68-91页 |
| ·前言 | 第68页 |
| ·实验材料 | 第68-70页 |
| ·接种植株和接种物 | 第68-69页 |
| ·试剂及常用溶液配制 | 第69-70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-74页 |
| ·侵染性克隆的构建 | 第70-72页 |
| ·RNA 的提取 | 第72页 |
| ·小 RNA 的分离与纯化 | 第72页 |
| ·核酸分子杂交检测 | 第72-73页 |
| ·HSVd 的克隆及测序 | 第73-74页 |
| ·高通量测序及分析 | 第74页 |
| ·结果 | 第74-89页 |
| ·HSVd-KY04 和 KFKi 的侵染性和复制稳定性 | 第74-77页 |
| ·HSVd-KY04 和 KFKi 的致病性 | 第77-78页 |
| ·HSVd-KY04 和 KFKi 的复制能力 | 第78-79页 |
| ·HSVd-KY04 和 KFKi 的基因组 RNA 和 sRNAs 的积累 | 第79-80页 |
| ·HSVd- KY04 和 KFKi 的结构稳定性 | 第80-81页 |
| ·HSVd-KY04 和 KFKi 的高通量测序 | 第81-82页 |
| ·HSVd-sRNAs (21~24 nt) 的分析 | 第82-83页 |
| ·HSVd-sRNA 的大小分布 | 第83-84页 |
| ·HSVd-sRNA 的 5~’末端碱基分析 | 第84-85页 |
| ·HSVd-sRNA 在基因组上的不均衡分布 | 第85-89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| ·HSVd 在啤酒花上的进化 | 第89页 |
| ·HSVd-KFKi 与 HSVd-KY04 的致病性变化 | 第89-91页 |
| 全文结论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简历 | 第106页 |
