| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 英文缩略表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-30页 |
| ·PPRV 的研究进展 | 第17-21页 |
| ·PPRV 的结构与功能 | 第17-18页 |
| ·PPRV 的复制 | 第18-19页 |
| ·PPRV 在动物体内的传播与感染过程 | 第19-20页 |
| ·PPRV 对免疫系统细胞的感染 | 第20页 |
| ·PPRV 的持续性感染 | 第20-21页 |
| ·SLAM 的研究进展 | 第21-30页 |
| ·SLAM 家族及其功能 | 第21-23页 |
| ·SLAM 的结构 | 第23-26页 |
| ·先天性免疫应答中的 SLAM | 第26页 |
| ·获得性免疫应答中的 SLAM | 第26-28页 |
| ·SLAM 与麻疹病毒属病毒的感染 | 第28页 |
| ·SLAM 在人类疾病中的作用 | 第28-30页 |
| 第二章 PPRV H 基因胞外区的克隆、表达 | 第30-43页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·载体和菌种 | 第31页 |
| ·酶和试剂 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·溶液 | 第31-32页 |
| ·主要仪器与设备 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-38页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·重组表达载体 pPIC9K-tH 电转化毕赤酵母 GS115 | 第34-35页 |
| ·重组菌的原核表达 | 第35-36页 |
| ·pET-30a(+)-tH 表达产物的纯化 | 第36页 |
| ·tH 重组蛋白抗体的制备 | 第36-37页 |
| ·pPIC9K-tH 重组酵母菌株的诱导表达 | 第37页 |
| ·Western blotting 分析表达蛋白 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·重组蛋白 tH 的原核表达 | 第38-40页 |
| ·tH 蛋白的真核表达 | 第40-42页 |
| ·分析讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 山羊 SLAM 基因的克隆、表达及结构预测 | 第43-59页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·试验动物、菌种和载体 | 第43-44页 |
| ·酶和试剂 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·溶液 | 第44页 |
| ·主要仪器与设备 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·引物设计与合成 | 第44页 |
| ·淋巴细胞的分离 | 第44-45页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第45页 |
| ·RT-PCR 扩增目的基因 | 第45页 |
| ·SLAM 的克隆 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·重组表达载体 pPIC9K-SLAM 电转化毕赤酵母 GS115 | 第47页 |
| ·重组菌的原核表达 | 第47页 |
| ·pET-30a(+)-SLAM 重组蛋白的纯化 | 第47页 |
| ·SLAM 重组蛋白抗体的制备 | 第47页 |
| ·pPIC9K-SLAM 重组酵母菌株的诱导表达 | 第47页 |
| ·Western blotting 分析表达蛋白 | 第47-48页 |
| ·结果 | 第48-57页 |
| ·山羊 SLAM 基因的克隆及分析 | 第48-52页 |
| ·原核表达 | 第52-55页 |
| ·真核表达 | 第55-57页 |
| ·分析讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 PPRV H 蛋白与受体蛋白 SLAM 间相互作用的验证 | 第59-69页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·质粒、菌株和细胞株 | 第59页 |
| ·酶和试剂 | 第59-60页 |
| ·培养基和溶液 | 第60页 |
| ·主要仪器与设备 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-64页 |
| ·引物设计及合成 | 第60-61页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第61页 |
| ·细胞培养 | 第61-62页 |
| ·细胞转染 | 第62-63页 |
| ·免疫共沉淀验证蛋白之间的相互作用 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-67页 |
| ·真核表达载体的构建及鉴定 | 第64-65页 |
| ·重组质粒在 CHO-K1 细胞中的表达 | 第65-66页 |
| ·Western blotting 分析表达蛋白 | 第66页 |
| ·山羊 SLAM 与 PPRV H 蛋白相互作用的功能位点 | 第66-67页 |
| ·分析讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 病毒受体 SLAM 在山羊体内的分布 | 第69-80页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第69-70页 |
| ·试剂 | 第70页 |
| ·溶液 | 第70页 |
| ·主要仪器与设备 | 第70页 |
| ·方法 | 第70-73页 |
| ·引物设计及合成 | 第70页 |
| ·RNA 的提取 | 第70-71页 |
| ·RNA 的纯化 | 第71页 |
| ·反转录 | 第71页 |
| ·Real-time PCR 条件的优化 | 第71页 |
| ·目的基因扩增效率比较及标准曲线的建立 | 第71-72页 |
| ·实时定量 PCR 反应 | 第72页 |
| ·基因测序验证 | 第72页 |
| ·数据分析 | 第72-73页 |
| ·免疫组化 | 第73页 |
| ·结果 | 第73-78页 |
| ·RNA 提取结果 | 第73页 |
| ·Real-time PCR 反应条件的优化 | 第73页 |
| ·目的基因的扩增效率和标准曲线的建立 | 第73-75页 |
| ·山羊体内不同组织中 SLAM 基因 mRNA 的转录水平 | 第75-76页 |
| ·SLAM 蛋白在山羊体内的组织分布 | 第76-78页 |
| ·分析讨论 | 第78-80页 |
| 第六章 小反刍兽疫病毒在感染山羊体内的分布 | 第80-93页 |
| ·材料 | 第81页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第81页 |
| ·病毒和细胞 | 第81页 |
| ·试剂 | 第81页 |
| ·溶液 | 第81页 |
| ·主要仪器与设备 | 第81页 |
| ·方法 | 第81-83页 |
| ·病毒培养 | 第81页 |
| ·动物接种 | 第81-82页 |
| ·引物设计及合成 | 第82页 |
| ·RNA 的提取 | 第82页 |
| ·RNA 的纯化 | 第82页 |
| ·反转录 | 第82页 |
| ·Real-time PCR 反应条件的优化 | 第82-83页 |
| ·目的基因的扩增效率比较和标准曲线的建立 | 第83页 |
| ·实时定量 PCR 反应 | 第83页 |
| ·基因测序验证 | 第83页 |
| ·数据分析 | 第83页 |
| ·苏木素—伊红染色 | 第83页 |
| ·免疫组化 | 第83页 |
| ·结果 | 第83-91页 |
| ·RNA 提取结果 | 第83-84页 |
| ·Real-time PCR 反应条件的优化 | 第84页 |
| ·目的基因的扩增效率和标准曲线的建立 | 第84-85页 |
| ·人工感染山羊体不同组织中 PPRV N 基因 mRNA 的转录水平 | 第85-87页 |
| ·PPRV 感染后对山羊体造成的病理变化 | 第87-89页 |
| ·PPRV 感染后在山羊体内的分布 | 第89-91页 |
| ·分析讨论 | 第91-93页 |
| 第七章 小反刍兽疫病毒细胞膜受体的鉴定 | 第93-97页 |
| ·材料 | 第93-94页 |
| ·试验动物、菌种和载体 | 第93页 |
| ·病毒和细胞 | 第93页 |
| ·试剂 | 第93页 |
| ·溶液 | 第93-94页 |
| ·主要仪器与设备 | 第94页 |
| ·方法 | 第94-95页 |
| ·病毒培养 | 第94页 |
| ·淋巴细胞的分离 | 第94页 |
| ·外周血淋巴细胞膜蛋白的提取 | 第94页 |
| ·VOPBA 鉴定 | 第94-95页 |
| ·结果 | 第95-96页 |
| ·外周血淋巴细胞膜蛋白 | 第95页 |
| ·山羊外周血淋巴细胞膜 PPRV 病毒受体的鉴定 | 第95-96页 |
| ·分析讨论 | 第96-97页 |
| 第八章 全文结论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 作者简历 | 第109-110页 |
