| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 肝再生的研究进展 | 第11-18页 |
| 1.1.1 肝脏的解剖结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 肝脏的发育 | 第12-13页 |
| 1.1.3 肝脏对损伤的反应 | 第13-14页 |
| 1.1.4 肝损伤后Lgr5阳性细胞的作用 | 第14页 |
| 1.1.5 肝损伤后成熟肝细胞的作用 | 第14-16页 |
| 1.1.6 肝损伤后肝星形细胞的作用 | 第16-17页 |
| 1.1.7 肝损伤后窦内皮细胞的作用 | 第17页 |
| 1.1.8 结论 | 第17-18页 |
| 1.2 OPN生物功能的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 OPN的结构 | 第18-19页 |
| 1.2.2 OPN和先天免疫 | 第19-22页 |
| 1.3 OPN在肝损伤中的作用研究 | 第22-26页 |
| 1.3.1 OPN在酒精脂肪肝炎中的作用 | 第22-23页 |
| 1.3.2 OPN在非酒精脂肪肝炎中的作用 | 第23-24页 |
| 1.3.3 OPN在对乙氨基酚介导的肝损伤中的作用 | 第24页 |
| 1.3.4 OPN在肝脏CCl4毒性和肉芽肿形成中的作用 | 第24-25页 |
| 1.3.5 OPN在缺血再灌注肝损伤中的作用 | 第25-26页 |
| 1.3.6 OPN在急性肝功能衰竭中的作用 | 第26页 |
| 1.4 本论文的研究目的和意义 | 第26-29页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第26-27页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第27-29页 |
| 第二章 OPN过表达对BRL-3A细胞生长的作用研究 | 第29-49页 |
| 引言 | 第29页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 细胞 | 第29页 |
| 2.1.2 包装慢病毒系统 | 第29-30页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2.1.4 主要耗材 | 第30页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第31页 |
| 2.2.2 OPN慢病毒重组载体构建及病毒颗粒包装 | 第31-35页 |
| 2.2.3 OPN慢病毒感染BRL-3A细胞及单克隆筛选 | 第35页 |
| 2.2.4 RNA提取 | 第35页 |
| 2.2.5 荧光定量聚合酶链式反应 | 第35-37页 |
| 2.2.6 MTT法 | 第37-38页 |
| 2.2.7 流式细胞术 | 第38页 |
| 2.2.8 蛋白免疫印迹法 | 第38页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第38-39页 |
| 2.3 结果 | 第39-46页 |
| 2.3.1 pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-OPN重组载体酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.2 pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-OPN重组质粒测序结果 | 第40-42页 |
| 2.3.3 慢病毒质粒共转染HEK293T细胞 | 第42-43页 |
| 2.3.4 慢病毒侵染BRL-3A细胞系及效率检测 | 第43-44页 |
| 2.3.5 OPN过表达对BRL-3A细胞活力影响 | 第44-45页 |
| 2.3.6 OPN过表达对BRL-3A细胞周期的影响 | 第45页 |
| 2.3.7 OPN过表达OPN信号通路相关基因、蛋白的表达影响 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 减少OPN表达对BRL-3A细胞生长的作用研究 | 第49-61页 |
| 引言 | 第49页 |
| 3.1 材料 | 第49-50页 |
| 3.1.1 细胞 | 第49-50页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 3.1.3 主要耗材 | 第50页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第50页 |
| 3.2.2 干涉片段siRNA设计与合成 | 第50-51页 |
| 3.2.3 细胞转染 | 第51-52页 |
| 3.2.4 RNA提取 | 第52页 |
| 3.2.5 荧光定量聚合酶链式反应 | 第52页 |
| 3.2.6 MTT法 | 第52页 |
| 3.2.7 流式细胞术 | 第52页 |
| 3.2.8 BrdU免疫荧光 | 第52-53页 |
| 3.2.9 蛋白免疫印迹法 | 第53页 |
| 3.2.10 统计学分析 | 第53-54页 |
| 3.3 结果 | 第54-57页 |
| 3.3.1 qRT-PCR检测OPN-siRNA干涉片段效果 | 第54页 |
| 3.3.2 OPN siRNA对BRL-3A细胞活力的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.3 OPN siRNA对BRL-3A细胞增殖力的影响 | 第55页 |
| 3.3.4 OPN siRNA对BRL-3A细胞周期的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.5 OPN siRNA对OPN信号通路相关基因、蛋白的表达影响 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-61页 |
| 总结与结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表论文 | 第73-74页 |
