摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩写名词表 | 第9-10页 |
1. 文献综述 | 第10-29页 |
前言 | 第10页 |
1.1 拟南芥气孔发育基因的研究进展 | 第10-14页 |
1.2 外部信号对气孔发育的影响 | 第14-18页 |
1.2.1 CO_2浓度对气孔发育的影响 | 第16页 |
1.2.2 光对气孔发育的影响 | 第16-18页 |
1.3 EPF家族基因调控气孔发育 | 第18-24页 |
1.3.1 EPF家族基因在气孔发育中研究进展 | 第18-20页 |
1.3.2 EPF家族原肽剪切的蛋白酶研究 | 第20-21页 |
1.3.3 EPF家族启动子活性的研究 | 第21-23页 |
1.3.4 EPFL9和EPF2在遗传改良中的应用 | 第23-24页 |
1.4 植物气孔发育的进化上的保守与差异 | 第24-28页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第28-29页 |
2. 材料和研究方法 | 第29-41页 |
2.1 实验材料、仪器、试剂 | 第29-32页 |
2.1.1 油菜和拟南芥材料 | 第29页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第29页 |
2.1.3 抗生素的配制 | 第29页 |
2.1.4 激素母液的配制 | 第29-30页 |
2.1.5 其它组培试剂 | 第30页 |
2.1.6 培养基的配制方法 | 第30-31页 |
2.1.7 主要仪器 | 第31-32页 |
2.1.8 主要分子实验试剂 | 第32页 |
2.2 研究方法 | 第32-41页 |
2.2.1 菌株培养条件 | 第32页 |
2.2.2 拟南芥和油菜种植 | 第32-33页 |
2.2.3 CTAB法提取DNA | 第33页 |
2.2.4 RNA提取步骤 | 第33-34页 |
2.2.5 反转录合成cDNA | 第34页 |
2.2.6 PCR反应体系和程序 | 第34-36页 |
2.2.7 醋酸钠法回收纯化DNA和载体 | 第36页 |
2.2.8 双酶切体系 | 第36-37页 |
2.2.9 载体和外源片段酶连 | 第37页 |
2.2.10 阳性克隆的筛选 | 第37页 |
2.2.11 转化农杆菌 | 第37-38页 |
2.2.12 遗传转化 | 第38页 |
2.2.13 GUS染色进行启动子分析 | 第38-39页 |
2.2.14 拟南芥突变体的订购和鉴定 | 第39页 |
2.2.15 实时荧光定量PCR进行基因表达分析 | 第39-40页 |
2.2.16 气孔观察和密度的统计 | 第40-41页 |
3. 结果与分析 | 第41-56页 |
3.1 生物信息学确定同源基因 | 第41-42页 |
3.2 BnA.EPF2和BnA.EPFL9在拟南芥中的功能研究 | 第42-50页 |
3.2.1 BnA.EPF2和BnA.EPFL9在拟南芥中超量表达植株的表型分析 | 第42-45页 |
3.2.2 BnA.EPF2和BnA.EPFL9回补拟南芥相应突变体的表型分析 | 第45-48页 |
3.2.3 BnA.EPF2和BnA.EPFL9的启动子分析 | 第48-50页 |
3.3 BnA.EPF2和BnA.EPFL9在拟南芥中超表达材料的生理性状的分析 | 第50-53页 |
3.4 BnA.EPF2和BnA.EPFL9在油菜中的功能研究 | 第53-56页 |
3.4.1 BnA.EPF2和BnA.EPFL9转化油菜和阳性植株的鉴定 | 第53-54页 |
3.4.2 BnA.EPF2和BnA.EPFL9转化油菜阳性植株的表型分析 | 第54-56页 |
4. 讨论与展望 | 第56-60页 |
4.1 结果讨论 | 第56-58页 |
4.1.1 BnA.EPF2和BnA.EPFL9调控拟南芥气孔发育 | 第56-57页 |
4.1.2 BnA.EPF2和BnA.EPFL9的功能并不等同于EPF2和EPFL9 | 第57页 |
4.1.3 BnA.EPF2和BnA.EPFL9能改善拟南芥的生理性状 | 第57-58页 |
4.1.4 BnA.EPF2和BnA.EPFL9调控油菜气孔发育 | 第58页 |
4.2 展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
附录 | 第70-73页 |
致谢 | 第73页 |