| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 甘蔗的简介 | 第9-10页 |
| 1.2 甘蔗中碳的分配 | 第10-13页 |
| 1.2.1 甘蔗中的源库系统 | 第10-11页 |
| 1.2.2 蔗糖在甘蔗中积累 | 第11页 |
| 1.2.3 甘蔗韧皮部装载 | 第11-12页 |
| 1.2.4 韧皮部的糖运输蛋白 | 第12-13页 |
| 1.3 植物中SWEET基因家族研究进展 | 第13-19页 |
| 1.3.1 SWEET蛋白的由来和结构特征 | 第14-16页 |
| 1.3.2 植物SWEET蛋白的生理生化功能 | 第16-19页 |
| 1.4 本研究的目的意义及技术路线 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究目的意义 | 第19-20页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 实验材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.2 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.3 酶及其他试剂 | 第21页 |
| 2.4 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.5 培养基的配制 | 第21-22页 |
| 2.6 实验方法 | 第22-36页 |
| 2.6.1 甘蔗ShSWEET1和ShSWEET2基因全长的克隆 | 第22-25页 |
| 2.6.2 ShSWEET1和ShSWEET2基因生物信息学序列分析 | 第25-26页 |
| 2.6.3 甘蔗ShSWEET1和ShSWEET2基因RT-qPCR扩增及数据分析 | 第26-27页 |
| 2.6.4 表达载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.6.5 GFP融合载体和植物表达载体冻融法转化农杆菌EHA105 | 第30-31页 |
| 2.6.6 农杆菌介导转染洋葱表皮细胞 | 第31页 |
| 2.6.7 ShSWEET1和ShSWEET2基因遗传转化烟草的研究 | 第31-32页 |
| 2.6.8 ShSWEET1和ShSWEET2基因遗传转化甘蔗的研究 | 第32-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-54页 |
| 3.1 甘蔗不同器官总RNA的提取 | 第36页 |
| 3.2 甘蔗ShSWEET1和ShSWEET2基因的克隆 | 第36-41页 |
| 3.2.1 ShSWEET1基因全长序列扩增 | 第36页 |
| 3.2.2 甘蔗ShSWEET1基因生物信息学分析 | 第36-38页 |
| 3.2.3 ShSWEET2基因全长序列扩增 | 第38页 |
| 3.2.4 甘蔗ShSWEET2基因生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3.2.5 甘蔗ShSWEET1和ShSWEET2的同源性分析 | 第39-41页 |
| 3.3 ShSWEET1和ShSWEET2基因组织表达模式分析 | 第41-43页 |
| 3.3.1 甘蔗不同组织ShSWEET1和ShSWEET2基因表达分析 | 第41-42页 |
| 3.3.2 甘蔗不同病害下ShSWEET1和ShSWEET2基因表达分析 | 第42-43页 |
| 3.3.3 冷胁迫对ShSWEET1和ShSWEET2基因的影响 | 第43页 |
| 3.4 植物表达载体的构建 | 第43-48页 |
| 3.4.1 ShSWEET1和ShSWEET2 GFP融合载体构建 | 第43-45页 |
| 3.4.2 ShSWEET1和ShWEET2在洋葱内表皮中的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.4.3 pShSWEET1植物表达载体构建 | 第46-47页 |
| 3.4.4 pShSWEET2植物表达载体构建 | 第47-48页 |
| 3.5 ShSWEET1和ShSWEET2遗传转化烟草 | 第48-50页 |
| 3.5.1 转基因烟草植株的获得 | 第48-49页 |
| 3.5.2 转基因烟草植株的PCR检测 | 第49-50页 |
| 3.5.3 转基因烟草的冷胁迫处理 | 第50页 |
| 3.6 ShSWEET1和ShSWEET2遗传转化甘蔗 | 第50-54页 |
| 3.6.1 转基因甘蔗的获得 | 第50-51页 |
| 3.6.2 ShSWEET2过表达抗性植株Bar检测 | 第51-52页 |
| 3.6.3 Bar基因的试纸条检测 | 第52页 |
| 3.6.4 ShSWEET2过表达抗性植株目的基因检测 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 6 本研究的后续工作 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
