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海洋微生物高效生产19,20-环氧细胞松弛素Q和吡咯喹啉醌的研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 绪论第15-33页
    1.1 前言第15页
    1.2 细胞松弛素类物质的研究概况第15-24页
        1.2.1 细胞松弛素的命名和来源第15-16页
        1.2.2 细胞松弛素的结构第16-17页
        1.2.3 细胞松弛素的活性第17-19页
        1.2.4 细胞松弛素的生物合成和化学合成第19-21页
        1.2.5 19,20-环氧细胞松弛素Q(B5A)的研究概况第21-24页
    1.3 吡咯喹啉醌(PQQ)的研究概况第24-30页
        1.3.1 PQQ的发现和分布第24-25页
        1.3.2 PQQ的生物学功能第25-26页
        1.3.3 PQQ的生物合成第26-27页
        1.3.4 PQQ生物合成的调控第27-28页
        1.3.5 PQQ的分离纯化研究第28-29页
        1.3.6 PQQ的测定方法第29-30页
    1.4 本课题的研究目标和意义第30-33页
第2章 海洋天然产物19,20-环氧细胞松弛素Q分析检测方法的建立第33-43页
    2.1 前言第33页
    2.2 实验材料与方法第33-35页
        2.2.1 实验材料与试剂第33页
        2.2.2 实验仪器设备第33-34页
        2.2.3 B5A产量的HPLC检测方法第34页
        2.2.4 B5A的HPLC-ESI-MS检测方法第34页
        2.2.5 B5A的薄层层析(TLC)检测方法第34-35页
        2.2.6 18S rDNA菌种鉴定方法第35页
    2.3 结果与讨论第35-41页
        2.3.1 菌种鉴定第35-38页
        2.3.2 B5A的HPLC检测第38-40页
        2.3.3 B5A的薄层层析(TLC)检测第40-41页
        2.3.4 HPLC-MS检测第41页
    2.4 本章小结第41-43页
第3章 海洋天然产物19,20-环氧细胞松弛素Q(B5A)的发酵条件优化第43-61页
    3.1 前言第43页
    3.2 实验材料与方法第43-45页
        3.2.1 实验材料与试剂第43页
        3.2.2 实验仪器设备第43页
        3.2.3 培养基第43-44页
        3.2.4 Xylaria sp.sof11的培养和保存第44页
        3.2.5 Xylaria sp.sof11菌体湿重的测定第44-45页
    3.3 结果与讨论第45-59页
        3.3.1 培养基种类对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响第45-46页
        3.3.2 培养时间对发酵的影响第46-47页
        3.3.3 不同碳源对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响第47-48页
        3.3.4 不同有机氮源对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响第48页
        3.3.5 生物合成前体和海盐对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响第48-50页
        3.3.6 副产物的测定及其对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响第50-51页
        3.3.7 Plackett-Burman(PB)实验筛选关键因素第51-53页
        3.3.8 响应面分析法获得最佳组合第53-57页
        3.3.9 优化后培养基发酵能力的验证第57页
        3.3.10 在10 L发酵罐上发酵生产B5A的研究第57-59页
    3.4 本章小结第59-61页
第4章 海洋天然产物19,20-环氧细胞松弛素Q(B5A)的分离纯化第61-72页
    4.1 前言第61页
    4.2 实验材料与方法第61-63页
        4.2.1 实验材料与试剂第61页
        4.2.2 实验仪器设备第61-62页
        4.2.3 硅胶柱层析方法第62页
        4.2.4 半制备HPLC分离方法第62页
        4.2.5 秀丽隐杆线虫的培养和保存第62-63页
        4.2.6 秀丽隐杆线虫存活率测试实验第63页
    4.3 结果与讨论第63-70页
        4.3.1 固液分离及目标产物存在量的确定第63页
        4.3.2 从菌体中萃取B5A第63-66页
        4.3.3 硅胶柱层析分离第66-68页
        4.3.4 半制备色谱纯化第68-69页
        4.3.5 高分辨质谱检测第69页
        4.3.6 B5A的毒性检测第69-70页
    4.4 本章小结第70-72页
第5章 吡咯喹啉醌(PQQ)海洋甲基营养菌的筛选及发酵条件优化第72-85页
    5.1 前言第72页
    5.2 实验材料与方法第72-75页
        5.2.1 实验材料与试剂第72页
        5.2.2 实验仪器设备第72-73页
        5.2.3 培养基第73页
        5.2.4 PQQ的酶法检测方法第73页
        5.2.5 PQQ的化学法检测方法第73-74页
        5.2.6 PQQ的高效液相色谱(HPLC)检测方法第74页
        5.2.7 海洋PQQ产生菌的筛选第74页
        5.2.8 海洋PQQ产生菌的发酵培养第74页
        5.2.9 利用16S rDNA基因序列分析法鉴定菌种第74-75页
    5.3 结果与讨论第75-83页
        5.3.1 菌种筛选第75页
        5.3.2 菌种鉴定第75-78页
        5.3.3 噬甲基菌ZJU414产PQQ的培养条件优化第78-82页
        5.3.4 PQQ在3 L罐发酵上的发酵第82-83页
    5.4 本章小结第83-85页
第6章 吡咯喹啉醌(PQQ)的分离纯化第85-122页
    6.1 前言第85页
    6.2 实验材料与方法第85-88页
        6.2.1 实验材料与仪器设备第85-86页
        6.2.2 离子交换树脂使用前的处理方法第86页
        6.2.3 树脂的筛选方法第86-87页
        6.2.4 静态离子交换平衡时间测定实验第87页
        6.2.5 离子交换吸附等温线第87页
        6.2.6 PQQ在LKA98树脂上的吸附动力学实验第87-88页
        6.2.7 PQQ在离子交换柱上的吸附穿透实验第88页
        6.2.8 洗脱剂及其浓度和流速的选择第88页
        6.2.9 PQQ的结晶第88页
    6.3 结果与讨论第88-120页
        6.3.1 离子交换树脂的筛选第88-89页
        6.3.2 PQQ在LKA98树脂上的离子交换平衡及热力学第89-92页
        6.3.3 PQQ在LKA98树脂上的离子交换动力学第92-101页
        6.3.4 PQQ在LKA98树脂柱上的离子交换过程第101-111页
        6.3.5 PQQ溶液在LKA98树脂柱上的洗脱过程第111-115页
        6.3.6 PQQ发酵液在离子交换树脂上的吸附和洗脱第115页
        6.3.7 PQQ产品的精制第115-118页
        6.3.8 产物分析第118-120页
    6.4 本章小结第120-122页
第7章 结论与展望第122-125页
    7.1 结论第122-124页
    7.2 展望第124-125页
参考文献第125-136页
附录第136-143页
作者简历第143-144页

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