| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第15-33页 |
| 1.1 前言 | 第15页 |
| 1.2 细胞松弛素类物质的研究概况 | 第15-24页 |
| 1.2.1 细胞松弛素的命名和来源 | 第15-16页 |
| 1.2.2 细胞松弛素的结构 | 第16-17页 |
| 1.2.3 细胞松弛素的活性 | 第17-19页 |
| 1.2.4 细胞松弛素的生物合成和化学合成 | 第19-21页 |
| 1.2.5 19,20-环氧细胞松弛素Q(B5A)的研究概况 | 第21-24页 |
| 1.3 吡咯喹啉醌(PQQ)的研究概况 | 第24-30页 |
| 1.3.1 PQQ的发现和分布 | 第24-25页 |
| 1.3.2 PQQ的生物学功能 | 第25-26页 |
| 1.3.3 PQQ的生物合成 | 第26-27页 |
| 1.3.4 PQQ生物合成的调控 | 第27-28页 |
| 1.3.5 PQQ的分离纯化研究 | 第28-29页 |
| 1.3.6 PQQ的测定方法 | 第29-30页 |
| 1.4 本课题的研究目标和意义 | 第30-33页 |
| 第2章 海洋天然产物19,20-环氧细胞松弛素Q分析检测方法的建立 | 第33-43页 |
| 2.1 前言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第33-35页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第33页 |
| 2.2.2 实验仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.2.3 B5A产量的HPLC检测方法 | 第34页 |
| 2.2.4 B5A的HPLC-ESI-MS检测方法 | 第34页 |
| 2.2.5 B5A的薄层层析(TLC)检测方法 | 第34-35页 |
| 2.2.6 18S rDNA菌种鉴定方法 | 第35页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第35-41页 |
| 2.3.1 菌种鉴定 | 第35-38页 |
| 2.3.2 B5A的HPLC检测 | 第38-40页 |
| 2.3.3 B5A的薄层层析(TLC)检测 | 第40-41页 |
| 2.3.4 HPLC-MS检测 | 第41页 |
| 2.4 本章小结 | 第41-43页 |
| 第3章 海洋天然产物19,20-环氧细胞松弛素Q(B5A)的发酵条件优化 | 第43-61页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第43页 |
| 3.2.2 实验仪器设备 | 第43页 |
| 3.2.3 培养基 | 第43-44页 |
| 3.2.4 Xylaria sp.sof11的培养和保存 | 第44页 |
| 3.2.5 Xylaria sp.sof11菌体湿重的测定 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-59页 |
| 3.3.1 培养基种类对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 培养时间对发酵的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 不同碳源对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.4 不同有机氮源对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响 | 第48页 |
| 3.3.5 生物合成前体和海盐对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响 | 第48-50页 |
| 3.3.6 副产物的测定及其对Xylaria sp.sof11生长和B5A合成的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.7 Plackett-Burman(PB)实验筛选关键因素 | 第51-53页 |
| 3.3.8 响应面分析法获得最佳组合 | 第53-57页 |
| 3.3.9 优化后培养基发酵能力的验证 | 第57页 |
| 3.3.10 在10 L发酵罐上发酵生产B5A的研究 | 第57-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第4章 海洋天然产物19,20-环氧细胞松弛素Q(B5A)的分离纯化 | 第61-72页 |
| 4.1 前言 | 第61页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第61-63页 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 | 第61页 |
| 4.2.2 实验仪器设备 | 第61-62页 |
| 4.2.3 硅胶柱层析方法 | 第62页 |
| 4.2.4 半制备HPLC分离方法 | 第62页 |
| 4.2.5 秀丽隐杆线虫的培养和保存 | 第62-63页 |
| 4.2.6 秀丽隐杆线虫存活率测试实验 | 第63页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第63-70页 |
| 4.3.1 固液分离及目标产物存在量的确定 | 第63页 |
| 4.3.2 从菌体中萃取B5A | 第63-66页 |
| 4.3.3 硅胶柱层析分离 | 第66-68页 |
| 4.3.4 半制备色谱纯化 | 第68-69页 |
| 4.3.5 高分辨质谱检测 | 第69页 |
| 4.3.6 B5A的毒性检测 | 第69-70页 |
| 4.4 本章小结 | 第70-72页 |
| 第5章 吡咯喹啉醌(PQQ)海洋甲基营养菌的筛选及发酵条件优化 | 第72-85页 |
| 5.1 前言 | 第72页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第72-75页 |
| 5.2.1 实验材料与试剂 | 第72页 |
| 5.2.2 实验仪器设备 | 第72-73页 |
| 5.2.3 培养基 | 第73页 |
| 5.2.4 PQQ的酶法检测方法 | 第73页 |
| 5.2.5 PQQ的化学法检测方法 | 第73-74页 |
| 5.2.6 PQQ的高效液相色谱(HPLC)检测方法 | 第74页 |
| 5.2.7 海洋PQQ产生菌的筛选 | 第74页 |
| 5.2.8 海洋PQQ产生菌的发酵培养 | 第74页 |
| 5.2.9 利用16S rDNA基因序列分析法鉴定菌种 | 第74-75页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第75-83页 |
| 5.3.1 菌种筛选 | 第75页 |
| 5.3.2 菌种鉴定 | 第75-78页 |
| 5.3.3 噬甲基菌ZJU414产PQQ的培养条件优化 | 第78-82页 |
| 5.3.4 PQQ在3 L罐发酵上的发酵 | 第82-83页 |
| 5.4 本章小结 | 第83-85页 |
| 第6章 吡咯喹啉醌(PQQ)的分离纯化 | 第85-122页 |
| 6.1 前言 | 第85页 |
| 6.2 实验材料与方法 | 第85-88页 |
| 6.2.1 实验材料与仪器设备 | 第85-86页 |
| 6.2.2 离子交换树脂使用前的处理方法 | 第86页 |
| 6.2.3 树脂的筛选方法 | 第86-87页 |
| 6.2.4 静态离子交换平衡时间测定实验 | 第87页 |
| 6.2.5 离子交换吸附等温线 | 第87页 |
| 6.2.6 PQQ在LKA98树脂上的吸附动力学实验 | 第87-88页 |
| 6.2.7 PQQ在离子交换柱上的吸附穿透实验 | 第88页 |
| 6.2.8 洗脱剂及其浓度和流速的选择 | 第88页 |
| 6.2.9 PQQ的结晶 | 第88页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第88-120页 |
| 6.3.1 离子交换树脂的筛选 | 第88-89页 |
| 6.3.2 PQQ在LKA98树脂上的离子交换平衡及热力学 | 第89-92页 |
| 6.3.3 PQQ在LKA98树脂上的离子交换动力学 | 第92-101页 |
| 6.3.4 PQQ在LKA98树脂柱上的离子交换过程 | 第101-111页 |
| 6.3.5 PQQ溶液在LKA98树脂柱上的洗脱过程 | 第111-115页 |
| 6.3.6 PQQ发酵液在离子交换树脂上的吸附和洗脱 | 第115页 |
| 6.3.7 PQQ产品的精制 | 第115-118页 |
| 6.3.8 产物分析 | 第118-120页 |
| 6.4 本章小结 | 第120-122页 |
| 第7章 结论与展望 | 第122-125页 |
| 7.1 结论 | 第122-124页 |
| 7.2 展望 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-136页 |
| 附录 | 第136-143页 |
| 作者简历 | 第143-144页 |
