猪睾丸组织的miRNA表达谱分析
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 miRNA研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 miRNA的发现 | 第11页 |
| 1.1.2 miRNA的生物合成 | 第11-12页 |
| 1.1.3 miRNA作用机制 | 第12-13页 |
| 1.1.4 miRNA研究方法 | 第13-14页 |
| 1.2 哺乳动物生殖发生与miRNA研究现状 | 第14-17页 |
| 1.2.1 哺乳动物的精子发生过程 | 第14-15页 |
| 1.2.2 miRNA与精子发生 | 第15-16页 |
| 1.2.3 睾丸组织中miRNA的表达 | 第16-17页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第17-20页 |
| 1.3.1 实时荧光定量PCR的技术原理 | 第17页 |
| 1.3.2 荧光定量PCR的定量方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 miRNA荧光定量PCR | 第18-20页 |
| 1.4 本实验研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2 试验时间与地点 | 第21页 |
| 2.3 主要仪器 | 第21页 |
| 2.4 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.5 RNA的制备 | 第22-23页 |
| 2.5.1 RNA提取主要步骤 | 第22-23页 |
| 2.5.2 RNA质量检测 | 第23页 |
| 2.6. 小RNA建库测序 | 第23-24页 |
| 2.7 测序数据的处理 | 第24-25页 |
| 2.7.1 测序数据过滤与定位比对 | 第24-25页 |
| 2.7.2 测序数据的分类 | 第25页 |
| 2.8 差异分析 | 第25页 |
| 2.9 Q-PCR验证 | 第25-27页 |
| 2.9.1 cDNA的制备 | 第25-26页 |
| 2.9.2 Real-time PCR | 第26-27页 |
| 2.10 靶基因的预测和功能分析 | 第27页 |
| 2.11 数据库及分析软件 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-40页 |
| 3.1 RNA质检结果 | 第28页 |
| 3.2 高通量数据结果 | 第28-29页 |
| 3.3 猪睾丸组织的miRNA转录组的鉴别和特征 | 第29-31页 |
| 3.4 猪睾丸组织中高表达的miRNAs | 第31-32页 |
| 3.5 猪睾丸组织中差异表达的miRNA | 第32-33页 |
| 3.6 靶基因预测和功能分析 | 第33-35页 |
| 3.7 miRNA的染色体分布 | 第35-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 4.1 高通量的高检测率 | 第40-41页 |
| 4.2 高表达的miRNAs具有显著调控作用 | 第41页 |
| 4.3 差异表达的miRNA参与调控生精过程 | 第41-42页 |
| 4.4 miRNA的X染色体趋向性表达 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |
