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A型FMDV感染BHK-21细胞差异表达基因的筛选和初步分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-22页
   ·研究目的和意义第12-13页
   ·国内外研究现状第13-22页
     ·口蹄疫病毒的先天性免疫反应研究进展第13-16页
     ·芯片及其在医学研究中的应用进展第16-22页
第二章 A 型FMDV 感染BHK-21 细胞表达谱芯片杂交模型的建立及初步分析第22-44页
   ·实验材料与仪器第22-23页
     ·实验材料第22页
     ·实验仪器第22-23页
   ·实验方法第23-34页
     ·BHK-21 细胞复苏第23页
     ·BHK-21 细胞的传代第23页
     ·细胞毒传代及TCID50 的测定第23-24页
     ·总RNA 提取(TRIzol 法)第24页
     ·总 RNA 定量第24页
     ·RNA 完整性的测定第24-27页
     ·总 RNA 的纯化第27页
     ·双链 cDNA 合成第27-29页
     ·体外转录合成cRNA 及其纯化第29-31页
     ·cDNA 单链的合成和纯化第31-32页
     ·单链DNA 片段化和标记第32-33页
     ·芯片杂交第33-34页
     ·芯片洗脱、染色和扫描第34页
   ·结果第34-40页
     ·TCID50 测定的结果第34-35页
     ·RNA 质量第35-37页
     ·Affymetrix GeneChip Mouse Gene 1.0 ST 芯片模型的建立第37-38页
     ·A 型( A/WH/CHA/09)FMDV 流行毒株和重组毒株感染细胞的差异 表达基因第38-40页
   ·讨论第40-44页
     ·A 型流行FMDV 毒株(A/WH/CHA/09)感染BHK-21 细胞第40-41页
     ·A 型重组毒株感染BHK-21 细胞第41-42页
     ·A 型FMDV 流行毒株和重组毒株具有的相同差异表达基因第42-44页
第三章 实时定量PCR 验证差异表达基因第44-50页
   ·实验材料第44页
     ·实验试剂第44页
     ·引物合成第44页
     ·主要仪器第44页
   ·实验方法第44-45页
     ·将细胞总RNA 反转录为cDNA第44-45页
     ·实时荧光定量PCR 检测第45页
     ·数据分析第45页
   ·实验结果第45-49页
   ·讨论第49-50页
第四章 全文结论第50-51页
参考文献第51-59页
致谢第59-60页
作者简历第60页

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