| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词 | 第15-16页 |
| 文献综述 | 第16-38页 |
| 1 花柱自交(不)亲和决定因子：S-RNase基因 | 第17-20页 |
| 1.1 S-RNase结构和功能 | 第18页 |
| 1.2 S基因型鉴定方法 | 第18-20页 |
| 2 花粉自交不亲和性特异性决定因子 | 第20-25页 |
| 2.1 与S基因座连锁的基因 | 第20页 |
| 2.2 S基因座F-box基因(SLF/SFB)-花粉S基因 | 第20-21页 |
| 2.3 鉴定F-box基因的方法 | 第21-23页 |
| 2.4 S-RNase与SLF/SFBs的作用机理 | 第23页 |
| 2.5 SFB基因与自交不亲和性及亲和性的关系 | 第23-25页 |
| 3 参与S-RNase介导SI反应的其它因子 | 第25-26页 |
| 3.1 HT修饰基因 | 第25页 |
| 3.2 其它因子 | 第25-26页 |
| 4 自交不亲和性反应机理模型 | 第26-28页 |
| 4.1 简单的胞内抑制剂工作模型 | 第27页 |
| 4.2 改进的胞内抑制剂工作模型 | 第27-28页 |
| 5 梨自交不亲和性研究进展 | 第28-33页 |
| 5.1 梨SI的表现 | 第28-29页 |
| 5.2 梨自交不亲和性花柱S基因蛋白产物的分离及特性鉴定 | 第29-30页 |
| 5.3 梨自交不亲和基因表达特性 | 第30-31页 |
| 5.4 梨花柱S-RNase的作用机理 | 第31页 |
| 5.5 梨花柱S基因的克隆及梨品种S基因型鉴定 | 第31-33页 |
| 6 梨自交亲和性的表现机制及应用进展 | 第33-36页 |
| 6.1 梨自交亲和性的表现 | 第33页 |
| 6.2 梨自交亲和性的机制 | 第33-36页 |
| 6.3 梨自交亲和性的应用 | 第36页 |
| 7 梨自交(不)亲和性研究展望 | 第36-38页 |
| 第一章 四倍体梨‘沙01’自交亲和性的突变机制 | 第38-58页 |
| 1 材料和方法 | 第39-43页 |
| 1.1 授粉试验 | 第39-40页 |
| 1.2 花粉管原位萌发荧光检测 | 第40页 |
| 1.3 DNA和RNA提取 | 第40页 |
| 1.4 S-RNase基因的PCR扩增和测序 | 第40-42页 |
| 1.5 S-RNase基因real-time PCR分析 | 第42-43页 |
| 1.6 细胞学鉴定 | 第43页 |
| 1.7 流式细胞仪关于DNA含量的检测 | 第43页 |
| 1.8 花朵、子房和花药大小比较 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-55页 |
| 2.1 ‘沙01’自花及异花授粉花粉管生长特性及坐果率 | 第43-45页 |
| 2.2 花朵、子房和花药大小比较 | 第45-46页 |
| 2.3 染色体数目比较 | 第46-47页 |
| 2.4 ‘沙01’自交后代倍性的鉴定 | 第47-49页 |
| 2.5 ‘库尔勒香梨’和‘沙01’均含有S_(22)-RNase和S_(28)-RNase基因 | 第49-50页 |
| 2.6 ‘沙01’自交后代S基因遗传规律的研究 | 第50-55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| 4 小结 | 第56-58页 |
| 第二章 二倍体梨‘早冠’自交亲和性的突变机制 | 第58-76页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 1.1 田间授粉试验 | 第59页 |
| 1.2 花粉管原位萌发荧光检测 | 第59页 |
| 1.3 DNA和RNA提取 | 第59页 |
| 1.4 S-RNase基因的PCR扩增和测序 | 第59-60页 |
| 1.5 S-RNase基因real-time PCR分析 | 第60-61页 |
| 1.6 ‘早冠’自交后代的基因型分离规律 | 第61页 |
| 1.7 花柱可溶性蛋白2D-PAGE分析 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-74页 |
| 2.1 ‘早冠’、‘雅清’及‘新雅’基因型的鉴定 | 第62-64页 |
| 2.2 自花授粉以及相互授粉条件下坐果率的比较分析 | 第64-65页 |
| 2.3 自花授粉以及相互授粉条件下花粉管萌发和生长的比较分析 | 第65-67页 |
| 2.4 ‘早冠’后代S基因分离规律的鉴定 | 第67-69页 |
| 2.5 ‘早冠’S-RNase基因全长RT-PCR及结构分析 | 第69-72页 |
| 2.6 花柱可溶性蛋白的2D-PAGE检测 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 4 小结 | 第75-76页 |
| 第三章 ‘鸭梨’和‘金坠梨’花粉SFBB基因的分离及SLF/SFB基因间进化关系 | 第76-90页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| 1.1 试验材料 | 第77页 |
| 1.2 基因组DNA提取 | 第77-78页 |
| 1.3 ‘鸭梨’和‘金坠梨’花粉SFBB基因型鉴定 | 第78页 |
| 1.4 SFBB基因扩增片段的回收、测序 | 第78页 |
| 1.5 SFBB基因遗传多样性的分析 | 第78-79页 |
| 2 结果 | 第79-85页 |
| 2.1 ‘金坠梨’和‘鸭梨’SFBB结构域的分析 | 第79-82页 |
| 2.2 梨不同PpSFB基因的聚类分析 | 第82-85页 |
| 3 讨论 | 第85-88页 |
| 3.1 ‘金坠梨’和‘鸭梨’SFBB结构域氨基酸序列无差异 | 第85-86页 |
| 3.2 蔷薇科植物SLF/SFB基因之间的进化关系 | 第86-88页 |
| 4 小结 | 第88-90页 |
| 第四章 梨自花结实性种质的创制及分子标记辅助选择 | 第90-106页 |
| 第一节 快速鉴定梨自花结实性株系的分子标记方法 | 第90-97页 |
| 1 材料与方法 | 第92-93页 |
| 1.1 植物材料 | 第92页 |
| 1.2 田间授粉及杂交种育苗 | 第92页 |
| 1.3 DNA提取 | 第92页 |
| 1.4 S-RNase基因特异性PCR扩增 | 第92-93页 |
| 1.5 产物的回收、测序 | 第93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-95页 |
| 2.1 自花结实性株系的标记与鉴定 | 第93-95页 |
| 2.2 S_4~(sm)-RNase基因的验证 | 第95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 第二节 一种创造100%梨自交亲和性种质的方法 | 第97-106页 |
| 1 材料与方法 | 第97-99页 |
| 1.1 植物材料 | 第97-98页 |
| 1.2 田间授粉及杂交种育苗 | 第98页 |
| 1.3 DNA提取 | 第98页 |
| 1.4 S-RNase基因特异性PCR扩增 | 第98-99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-102页 |
| 2.1 S-RNase基因扩增与鉴定 | 第99-100页 |
| 2.2 后代株系中S_4~(sm)-RNase基因的验证 | 第100-102页 |
| 3 讨论 | 第102-104页 |
| 3.1 利用亲和性S基因纯合体来快速创制自花结实性种质 | 第102-103页 |
| 3.2 鉴定梨自花结实的方法 | 第103-104页 |
| 4 本章小结 | 第104-106页 |
| 第五章 梨S-RNase基因纯合体种质的创制与鉴定 | 第106-116页 |
| 1 材料与方法 | 第107-108页 |
| 1.1 试验材料 | 第107页 |
| 1.2 授粉处理 | 第107页 |
| 1.3 DNA提取 | 第107页 |
| 1.4 S-RNase基因的PCR扩增 | 第107-108页 |
| 2 结果与分析 | 第108-113页 |
| 2.1 田间坐果率调查 | 第108-109页 |
| 2.2 S-RNase基因型鉴定 | 第109-112页 |
| 2.3 纯合体植株S-RNase基因的克隆与验证 | 第112-113页 |
| 3 讨论 | 第113-115页 |
| 4 小结 | 第115-116页 |
| 综合讨论 | 第116-124页 |
| 全文结论 | 第124-126页 |
| 创新之处 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-144页 |
| 附图 | 第144-146页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文和成果 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
