| 前言 | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-19页 |
| 1.1 核黄素简介 | 第7页 |
| 1.2 核黄素的生物合成途径 | 第7-9页 |
| 1.3 核黄素合成基因的结构与编码产物功能 | 第9-12页 |
| 1.3.1 B.subtilis 核黄素操纵子的结构和产物功能 | 第9-11页 |
| 1.3.2 其他生物中的核黄素合成基因 | 第11-12页 |
| 1.4 核黄素生物合成途径中的代谢调节机制 | 第12-14页 |
| 1.4.1 前体物 GTP 合成的代谢调节机制 | 第12页 |
| 1.4.2 前体物 GTP 到核黄素的调节机制 | 第12-14页 |
| 1.5 核黄素高产菌的育种思路和方法与研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5.1 核黄素高产菌的育种思路和方法 | 第14页 |
| 1.5.2 产核黄素基因工程菌构建的进展和国内外研究现状 | 第14-16页 |
| 1.6 生物信息学与免费生物信息资源介绍 | 第16-18页 |
| 1.6.1 生物信息学的内容和研究方向 | 第16-17页 |
| 1.6.2 免费生物信息资源介绍 | 第17-18页 |
| 1.7 Bacillus cereHs(蜡样芽孢杆菌)简介 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.3 药品与试剂 | 第20-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 生物信息学方法 | 第23-24页 |
| 2.2.2 质粒 pMx45 的消除 | 第24-25页 |
| 2.2.3 粒的小规模提取 | 第25页 |
| 2.2.4 原生质体转化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 Spizzenn 转化 | 第26页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第26页 |
| 2.2.7 革兰氏阳性菌染色体 DNA 的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.8 PCR 扩增目的基因 | 第27-29页 |
| 2.2.9 PCR 方法替换 B cerus ATCC 14579 核黄素操纵子启动子 | 第29-30页 |
| 2.2.10 核黄素发酵及核黄素的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.11 核黄素的色谱定性 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-58页 |
| 3.1 B.cereus 核黄素操纵子片段的生物信息学分析 | 第32-40页 |
| 3.1.1 B cereus 基因组的 BLAST 分析 | 第32页 |
| 3.1.2 ORE finder 及 BLAST 对编码区的注释 | 第32-37页 |
| 3.1.3 核黄素操纵子结构基因的比较 | 第37-39页 |
| 3.1.4 T-COFFEE 对核黄素操纵子编码产物的同源性分析 | 第39-40页 |
| 3.2 受体菌株的改造 | 第40-50页 |
| 3.2.1 B.subtilis 24／pMX45 的质粒消除 | 第41-43页 |
| 3.2.2 B.subtilis 24 recA 功能的恢复 | 第43-47页 |
| 3.2.3 B.subtilis 24RD 的构建 | 第47-50页 |
| 3.3 B.cereHs 核黄素操纵子的克隆与表达 | 第50-54页 |
| 3.3.1 B.cereus 核黄素操纵子分析的实验验证 | 第50-53页 |
| 3.3.2 B.ceretus ATCC 14579 核黄素操纵子在 B.subtilis 中的表达 | 第53-54页 |
| 3.4 B.cereus ATCC 14579 核黄素操纵子启动子的替换及在 B.subtilis 中表达 | 第54-58页 |
| 第四章 结 论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 论文发表 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
