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S.boulardii预防DON诱导猪巨噬细胞凋亡的作用机理研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 绪论第10-20页
    1.1 DON毒素的概述第10-14页
        1.1.1 单端孢霉烯族毒素作用研究第10页
        1.1.2 DON毒素研究第10-14页
    1.2 p38MAPK通路的概述第14-17页
        1.2.1 p38MAPK概述第14-15页
        1.2.2 p38MAPK调控的细胞反应第15-17页
    1.3 S.boulardii对免疫活性的影响第17-18页
        1.3.1 益生菌的免疫作用第17页
        1.3.2 S.boulardii治疗肠道疾病第17-18页
        1.3.3 S.boulardii对p38MAPK通路的影响第18页
    1.4 研究目的与意义第18-19页
    1.5 主要研究内容第19-20页
2 DON对PAM凋亡的毒性研究第20-36页
    2.1 实验材料第20-22页
        2.1.1 主要试剂及材料第20-21页
        2.1.2 主要仪器设备第21页
        2.1.3 试剂制备第21-22页
    2.2 试验方法第22-27页
        2.2.1 细胞培养第22页
        2.2.2 MTT法检测DON对猪肺泡巨噬细胞活力影响第22-23页
        2.2.3 Annexin-V FITC /PI双染法检测细胞凋亡第23页
        2.2.4 ELISA法检测上清中因子含量第23-24页
        2.2.5 实时荧光定量法检测m RNA表达第24-27页
        2.2.6 统计学分析第27页
    2.3 结果与讨论第27-34页
        2.3.1 MTT法检测毒素对细胞增值率影响第27-29页
        2.3.2 Annexin-V FITC /PI双染法检测DON导致的细胞凋亡结果第29-31页
        2.3.3 ELISA检测炎性因子含量第31-33页
        2.3.4 DON对各炎性因子m RNA表达的影响第33-34页
    2.4 本章小结第34-36页
3 S.boulardii对DON毒性的干预作用第36-55页
    3.1 实验材料第36-38页
        3.1.1 主要试剂及材料第36-37页
        3.1.2 主要仪器设备第37-38页
        3.1.3 试剂准备第38页
    3.2 试验方法第38-43页
        3.2.1 S.boulardii菌液制备第38-39页
        3.2.2 DON毒素对S.boulardii作用影响第39页
        3.2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡第39-40页
        3.2.4 S.boulardii对损伤细胞炎性因子m RNA表达影响第40页
        3.2.5 S.boulardii对凋亡调控因子m RNA表达影响第40-41页
        3.2.6 Westernblot检测蛋白表达水平第41-43页
        3.2.7 S.boulardii细胞壁对损伤细胞炎性因子m RNA表达量影响第43页
        3.2.8 统计学分析第43页
    3.3 结果与讨论第43-54页
        3.3.1 DON对S.boulardii影响第43-44页
        3.3.2 Annexin V-FITC/PI检测S.boulardii对细胞凋亡影响第44-46页
        3.3.3 S.boulardii对细胞炎性因子m RNA表达影响第46-48页
        3.3.4 S.boulardii对凋亡调控因子m RNA表达影响第48-50页
        3.3.5 S.boulardii对p38MAPK m RNA表达的影响第50-51页
        3.3.6 Western blot印迹杂交检测蛋白表达量第51-52页
        3.3.7 S.boulardii细胞壁对炎性因子m RNA表达影响第52-54页
    3.4 本章小结第54-55页
4 结论与展望第55-57页
    4.1 结论第55-56页
    4.2 研究特色第56页
    4.3 展望第56-57页
参考文献第57-64页
致谢第64-65页
附录A第65-66页
附录B第66-69页
攻读学位期间的研究成果第69页

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