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LaeA调控黄曲霉毒素合成的胞外蛋白研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第11-19页
    1.1 黄曲霉毒素的概述第11-12页
        1.1.1 黄曲霉菌简介第11页
        1.1.2 黄曲霉毒素的产生第11-12页
        1.1.3 黄曲霉毒素的理化性质第12页
    1.2 黄曲霉毒素的合成途径第12-14页
    1.3 LAEA的全局性调控作用机制第14页
    1.4 LAEA对黄曲霉毒素合成的调控作用第14-16页
    1.5 研究目的和意义第16-17页
    1.6 研究内容和技术路线第17-19页
        1.6.1 本论文主要研究内容第17-18页
        1.6.2 本论文主要技术路线第18-19页
第二章 黄曲霉野生型和LaeA缺陷型胞外差异蛋白分析鉴定第19-31页
    2.1 引言第19页
    2.2 实验材料与仪器设备第19-21页
        2.2.1 主要仪器设备第19-20页
        2.2.2 主要试剂第20页
        2.2.3 主要溶液配制第20-21页
        2.2.4 主要培养基配制第21页
        2.2.5 实验菌株第21页
    2.3 实验方法第21-23页
        2.3.1 孢子悬浮液的制备第21页
        2.3.2 小麦、玉米和YES培养基的接种第21-22页
        2.3.3 胞外蛋白的提取、含量测定及电泳分离第22页
        2.3.4 蛋白质谱鉴定及数据分析第22-23页
        2.3.5 黄曲霉毒素定性分析第23页
    2.4 结果与分析第23-29页
        2.4.1 黄曲霉在小麦、玉米基质中生长时胞外蛋白含量变化第23-24页
        2.4.2 黄曲霉胞外蛋白分析鉴定及黄曲霉毒素测定第24-29页
    2.5 讨论第29-30页
    2.6 本章小结第30-31页
第三章 黄曲霉野生型和LaeA缺陷型胞外差异蛋白的转录水平表达情况分析第31-44页
    3.1 引言第31页
    3.2 实验材料与仪器设备第31-33页
        3.2.1 主要仪器与设备第31-32页
        3.2.2 主要试剂第32页
        3.2.3 实验菌株第32页
        3.2.4 所用引物序列第32-33页
        3.2.5 培养基的配制第33页
        3.2.6 溶液的配制第33页
    3.3 实验方法第33-36页
        3.3.1 黄曲霉菌体的培养第33页
        3.3.2 RNA的提取第33-34页
        3.3.3 RNA 电泳检测第34页
        3.3.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测第34-36页
    3.4 结果与分析第36-42页
        3.4.1 RNA的电泳检测结果第36-37页
        3.4.2 所用引物溶解曲线第37页
        3.4.3 RT-PCR结果分析第37-42页
    3.5 讨论第42-43页
    3.6 本章小结第43-44页
第四章 黄曲霉catB缺失突变株的构建及表型分析第44-64页
    4.1 引言第44页
    4.2 实验材料和仪器设备第44-48页
        4.2.1 主要仪器设备第44-45页
        4.2.2 菌种和质粒第45页
        4.2.3 主要试剂第45页
        4.2.4 所用引物序列第45-46页
        4.2.5 培养基的配制第46-47页
        4.2.6 溶液的配制第47-48页
    4.3 实验方法第48-55页
        4.3.1 菌体的培养第48页
        4.3.2 黄曲霉突变株载体的构建第48-53页
        4.3.3 黄曲霉突变株的构建第53-54页
        4.3.4 黄曲霉突变株的鉴定第54-55页
        4.3.5 黄曲霉突变株毒素的测定和分析第55页
    4.4 结果与分析第55-63页
        4.4.1 catB和TPI基因敲除载体的构建第55-58页
        4.4.2 黄曲霉CA14突变株的转化第58-59页
        4.4.3 黄曲霉CA14突变株的鉴定第59页
        4.4.4 黄曲霉CA14突变株的抗氧化压力表型分析第59-61页
        4.4.5 黄曲霉CA14突变株毒素测定分析第61-63页
    4.5 讨论第63页
    4.6 本章小结第63-64页
结论与展望第64-66页
参考文献第66-71页
致谢第71-72页
个人简历第72页

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