摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-30页 |
1.1 miRNA简介 | 第10-15页 |
1.1.1 miRNA发现过程 | 第10页 |
1.1.2 miRNA命名及鉴定 | 第10-12页 |
1.1.3 miRNA研究方法 | 第12-15页 |
1.2 miRNA生物合成 | 第15-21页 |
1.2.1 miRNA基因转录 | 第15-16页 |
1.2.2 剪切加工 | 第16-18页 |
1.2.3 形成成熟的miRNA | 第18-19页 |
1.2.4 miRNA合成及功能相关的几种关键蛋白质 | 第19-21页 |
1.3 miRNA作用机制 | 第21-22页 |
1.3.1 通过翻译抑制进行调控 | 第21-22页 |
1.3.2 通过诱导mRNA降解进行调控 | 第22页 |
1.4 miRNA功能研究进展 | 第22-26页 |
1.4.1 miRNA在植物形态发生过程中起关键作用 | 第23-25页 |
1.4.2 miRNA在植物的非生物胁迫应答反应中有重要作用 | 第25-26页 |
1.5 miRNA在植物与病原物的相互作用中起重要作用 | 第26-28页 |
1.5.1 miRNA在抗病毒的防卫反应中有重要作用 | 第27页 |
1.5.2 miRNA在抗病原菌的防卫反应中有重要作用 | 第27-28页 |
1.6 十字花科黑腐病菌简介 | 第28页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-43页 |
2.1 材料与试剂 | 第30-37页 |
2.1.1 供试植物材料 | 第30-31页 |
2.1.2 供试菌株 | 第31-32页 |
2.1.3 抗生索及使用浓度 | 第32页 |
2.1.4 培养基及营养土配方 | 第32-33页 |
2.1.5 RNA探针及其合成模板 | 第33-34页 |
2.1.6 主要试剂及配置 | 第34-37页 |
2.1.7 相关数据库及技术支持网站 | 第37页 |
2.2 试验方法 | 第37-43页 |
2.2.1 拟南芥培养 | 第37-38页 |
2.2.2 菌悬液制备方法 | 第38页 |
2.2.3 真空抽滤方法 | 第38-39页 |
2.2.4 拟南芥叶子保存 | 第39-40页 |
2.2.5 拟南芥总RNA提取 | 第40页 |
2.2.6 探针合成方法 | 第40-41页 |
2.2.7 Northern blot验证 | 第41-43页 |
第三章 结果与分析 | 第43-71页 |
3.1 引言 | 第43页 |
3.2 技术路线 | 第43-44页 |
3.3 拟南芥接种方法优化 | 第44-48页 |
3.3.1 拟南芥培养 | 第44-45页 |
3.3.2 真空抽滤 | 第45-47页 |
3.3.3 拟南芥接种Xcc | 第47-48页 |
3.4 拟南芥受Xcc诱导或抑制的候选miRNA | 第48-63页 |
3.4.1 总RNA提取 | 第48-49页 |
3.4.2 小RNA文库的构建及测序 | 第49页 |
3.4.3 测序结果生物信息学分析 | 第49-63页 |
3.5 候选miRNA的验证 | 第63-68页 |
3.5.1 已知miRNA差异表达验证 | 第63-67页 |
3.5.2 新的miRNA杂交验证 | 第67-68页 |
3.6 本章小结及讨论 | 第68-71页 |
3.6.1 实验设计 | 第68页 |
3.6.2 拟南芥接种方法讨论 | 第68-69页 |
3.6.3 候选miRNA验证 | 第69-70页 |
3.6.4 验证结果分析 | 第70-71页 |
第四章 讨论与展望 | 第71-74页 |
4.1 拟南芥接种方法研究 | 第71页 |
4.2 miRNA检测方法比较 | 第71-73页 |
4.3 差异表达miRNA分析 | 第73页 |
4.4 展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第84页 |