| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 脊椎动物胚胎肌肉发育过程及调控机制 | 第9-19页 |
| 1.1 肌肉发育过程 | 第9-16页 |
| 1.1.1 胚胎期成肌细胞的发生 | 第9-11页 |
| 1.1.2 成肌细胞分化发育的调节因子 | 第11-13页 |
| 1.1.3 非肌肉型肌球蛋白重链的结构及其在成肌细胞分化中的功能 | 第13-16页 |
| 1.2 MicroRNAs调控肌肉发育过程 | 第16-19页 |
| 1.2.1 MicroRNAs的生成及作用机制 | 第16-17页 |
| 1.2.2 MicroRNAs在成肌发育中的调控网络 | 第17-19页 |
| 第二章 MiR-199通过抑制NMHC ⅡA而调控鸡品系胚胎时期肌肉发育的分子机制研究 | 第19-45页 |
| 2.1 前言 | 第19-22页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第22页 |
| 2.2.3 冰冻切片及HE染色 | 第22-23页 |
| 2.2.3.1 冰冻切片实验方法 | 第22页 |
| 2.2.3.2 冰冻切片的HE染色方法 | 第22-23页 |
| 2.2.4 鸡的原代成肌细胞的体外培养 | 第23-24页 |
| 2.2.5 鸡原代成肌细胞的免疫荧光 | 第24-25页 |
| 2.2.6 鸡胚胎原代成肌细胞蛋白提取 | 第25-26页 |
| 2.2.7 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第26-27页 |
| 2.2.8 鸡原代成肌细胞的总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.9 特异性MicroRNA的反转录 | 第28-30页 |
| 2.2.9.1 miR-199特异性颈环引物设计 | 第28-29页 |
| 2.2.9.2 miR-199的反转录(Reverse transcription,RT)体系 | 第29页 |
| 2.2.9.3 实时荧光定量PCR检测miR-199的反应体系和反应条件 | 第29-30页 |
| 2.2.10 总RNA反转录以及MYH9的荧光定量检测 | 第30-31页 |
| 2.2.10.1. MYH9与内参的荧光定量PCR引物 | 第30页 |
| 2.2.10.2 总的mRNA的反转录体系 | 第30页 |
| 2.2.10.3 MYH9的荧光定量PGR反应体系及条件 | 第30-31页 |
| 2.2.11 成肌细胞转染实验 | 第31-32页 |
| 2.2.12 肌肉组织蛋白与RNA的提取 | 第32页 |
| 2.2.14 统计学处理 | 第32-33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-43页 |
| 2.3.1 蛋鸡及肉鸡品种的选取 | 第33页 |
| 2.3.2. 40天左右海兰蛋鸡与罗斯肉鸡外形的对比 | 第33页 |
| 2.3.3 罗斯肉鸡与海兰蛋鸡骨諮肌性状的对比 | 第33-35页 |
| 2.3.4 罗斯肉鸡与海兰蛋鸡发育过程中NMHC IIA的表达 | 第35-36页 |
| 2.3.5 生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 2.3.6 鸡胚胎发育过程中miR-199的表达 | 第37-38页 |
| 2.3.7 两种鸡品系的原代成肌细胞的培养与分化模型的建立 | 第38-39页 |
| 2.3.8 两种原代成肌细胞分化过程中相关因子的表达 | 第39-41页 |
| 2.3.9 两种原代成肌细胞miR-199转染： | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
