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PKCε重组腺病毒载体的构建及真核表达

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第6-8页
英文缩写及全文和中文对照表第8-9页
第1章 引言第9-10页
第2章 材料与方法第10-30页
    2.1 实验主要材料与试剂第10-11页
    2.2 实验主要仪器和设备第11-13页
    2.3 实验方法第13-29页
        2.3.1 PCR克隆人野生型全长PKCεDNA序列第13-15页
        2.3.2 穿梭质粒pShuttle-CMV-PKCε的构建第15-18页
        2.3.3 穿梭质粒pShuttle-CMV-PKCε与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183中同源重组第18-21页
        2.3.4 人胚肾上皮细胞HEK293细胞的培养第21-23页
        2.3.5 重组腺病毒载体pAdEasy-1/PKCε转染HEK293细胞包装病毒第23-25页
        2.3.6 腺病毒感染大鼠原代心肌细胞第25-26页
        2.3.7 大鼠原代心肌细胞PKCε蛋白的检测第26-27页
        2.3.8 MTT比色法检测大鼠原代心肌细胞存活率第27-29页
    2.4 数据处理第29-30页
第3章 实验结果第30-36页
    3.1 PCR扩增PKCεcDNA第30页
    3.2 重组质粒pShuttle-CMV-PKCε的提取纯化及酶切鉴定第30-31页
    3.3 重组质粒pShuttle-CMV-PKCε的测序鉴定第31-32页
    3.4 重组质粒pAdEasy-1/PKCε的提取纯化及酶切鉴定第32-33页
    3.5 PKC ε腺病毒载体在HEK293细胞中的包装与扩增第33-34页
    3.6 PKCε腺病毒上调大鼠原代心肌细胞PKCε蛋白的表达第34-35页
    3.7 PKC ε腺病毒感染对大鼠原代心肌细胞A/R损伤后细胞存活率的影响第35-36页
第4章 讨论第36-39页
第5章 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-43页
综述第43-51页
    参考文献第50-51页

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