| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 植物抗寒性的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 生物膜系统与植物抗寒性的研究 | 第10-11页 |
| 1.1.2 渗透调节物质与植物抗寒性的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.3 酶系统与植物抗寒性的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.4 植物抗寒的分子机制研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 类受体蛋白激酶的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 SgLRPK基因 | 第14-15页 |
| 1.2.2 SgCRK基因 | 第15-16页 |
| 1.3 柱花草研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 柱花草概况 | 第16页 |
| 1.3.2 分子技术在柱花草研究上的应用进展 | 第16-17页 |
| 1.3.3 柱花草抗寒性的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.2 主要试剂和仪器 | 第19-21页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.3 培养基配方 | 第21-22页 |
| 2.4 SgLRPK1的克隆与载体构建 | 第22-29页 |
| 2.4.1 柱花草材料培养 | 第22页 |
| 2.4.2 总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.4.3 cDNA第一链的合成 | 第23页 |
| 2.4.4 SgLRPK1基因主体片段的克隆 | 第23-24页 |
| 2.4.5 SgLRPK1基因3'端的克隆 | 第24页 |
| 2.4.6 SgLRPK1基因5'端的克隆 | 第24-25页 |
| 2.4.7 SgLRPK1基因编码区的克隆 | 第25-27页 |
| 2.4.8 SgLRPK1过表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.4.9 SgLRPK1打靶载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.5 农杆菌介导转化柱花草 | 第29-30页 |
| 2.5.1 菌液的活化与悬浮 | 第29页 |
| 2.5.2 农杆菌的侵染以及共培养 | 第29页 |
| 2.5.3 恢复培养、Basta筛选和组织分化培养 | 第29-30页 |
| 2.5.4 再生植株的生根、炼苗、移栽、收种 | 第30页 |
| 2.6 DNA的提取 | 第30页 |
| 2.7 PCR检测转基因柱花草的BAR基因 | 第30-31页 |
| 2.8 CDNA的合成 | 第31页 |
| 2.9 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| 3.1 SgLRPK1的分子克隆 | 第32-40页 |
| 3.1.1 SgLRPK1基因主体片段、3'端及5'端的克隆 | 第32页 |
| 3.1.2 SgLRPK1基因表达载体的构建 | 第32-35页 |
| 3.1.3 SgLRPK1蛋白的结构预测及分析 | 第35-36页 |
| 3.1.4 柱花草SgLRPK1蛋白与其他LRPK蛋白的同源性分析 | 第36-37页 |
| 3.1.5 柱花草在低温胁迫下SgLRPK1基因的相对表达量分析 | 第37-38页 |
| 3.1.6 农杆菌介导SgLRPK1转化柱花草 | 第38-39页 |
| 3.1.7 表达SgLRPK1转基因柱花草的分子检测 | 第39-40页 |
| 3.2 SgCRK1的分子克隆 | 第40-46页 |
| 3.2.1 SgCRK1基因主体片段、3'端及5'端的克隆 | 第40-41页 |
| 3.2.2 SgCRK1基因完整编码区的克隆，过表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.2.3 SgCRK1蛋白的结构预测及同源性分析 | 第42-44页 |
| 3.2.4 柱花草在低温胁迫下SgCRK1基因的相对表达量分析 | 第44页 |
| 3.2.5 农杆菌介导SgCRK1转化柱花草 | 第44页 |
| 3.2.6 过表达SgCRK1柱花草的分子鉴定 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 SgLRPK1及SgCRK1基因的克隆 | 第46页 |
| 4.2 SgLRPK1及SgCRK1蛋白序列的分析 | 第46-47页 |
| 4.3 LRPK基因与植物抗逆性的关系 | 第47-48页 |
| 4.4 CRK基因与植物抗逆性的关系 | 第48-49页 |
| 4.5 转基因植物的组织培养 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
