| 中英文缩略语对照表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 脊椎动物性别决定与分化 | 第12-13页 |
| 2 Rspo1/Wnt/β-catenin信号通路在性别决定与分化过程中作用 | 第13-21页 |
| 2.1 雌性性腺被动发育这一传统观点受到挑战 | 第13-14页 |
| 2.2 Rspo1/Wnt/β-catenin信号通路传导过程 | 第14-17页 |
| 2.2.1 Rspo1激活的Wnt/β-catenin信号通路 | 第15-16页 |
| 2.2.2 β-catenin | 第16-17页 |
| 2.3 Rspo1/Wnt/β-catenin信号通路拮抗分子Dickkopf | 第17-19页 |
| 2.4 Rspo1/Wnt/β-catenin通路在脊椎动物性别决定与分化研究进展 | 第19-21页 |
| 2.4.1 Rspo1、β-catenin对哺乳动物性别决定与分化影响 | 第19-20页 |
| 2.4.2 Rspo1、β-catenin对硬骨鱼类性别决定与分化影响 | 第20-21页 |
| 3 反向遗传学技术及其在性别决定与分化研究中的应用 | 第21-24页 |
| 4 科学问题的提出和本研究的目的意义 | 第24-27页 |
| 第二章 罗非鱼Rspo1早期表达和功能研究 | 第27-48页 |
| 1 引言 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-39页 |
| 2.1 实验动物 | 第28页 |
| 2.2 药品和仪器 | 第28-30页 |
| 2.3 试剂配制 | 第30-32页 |
| 2.4 实验方法 | 第32-39页 |
| 2.4.1 罗非鱼不同发育时期性腺RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.4.2 第一链cDNA合成 | 第33-34页 |
| 2.4.3 定量PCR检测Rspo1在不同时期性腺表达模式 | 第34页 |
| 2.4.4 Rspo1对 β-catenin介导信号通路调控作用 | 第34-35页 |
| 2.4.5 TALEN靶位点选取、左右臂构建、显微注射 | 第35-36页 |
| 2.4.6 G0代阳性鱼筛选、性腺表型分析、血清激素水平测定 | 第36-39页 |
| 3 结果 | 第39-45页 |
| 3.1 Rspo1在不同发育时期性腺中表达模式 | 第39-40页 |
| 3.2 Rspo1可激活 β-catenin1介导的信号通路 | 第40-41页 |
| 3.3 TALENs成功突变Rspo1基因 | 第41-43页 |
| 3.4 Rspo1敲降使卵巢减数分裂延迟 | 第43页 |
| 3.5 Rspo1敲降使卵巢雄性化 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 Rspo1在早期性腺表达分析 | 第45页 |
| 4.2 Rspo1对 β-catenin1介导的经典Wnt信号通路的调控作用 | 第45-46页 |
| 4.3 Rspo1信号通路异常对卵巢分化、发育影响 | 第46页 |
| 4.4 Rspo1信号通路与Foxl2-雌激素信号通路的关系 | 第46-48页 |
| 第三章 罗非鱼 β-catenin早期表达和功能研究 | 第48-65页 |
| 1 引言 | 第48-49页 |
| 2 材料和方法 | 第49-53页 |
| 2.1 实验动物 | 第49页 |
| 2.2 药品、试剂配制和仪器 | 第49页 |
| 2.3 方法 | 第49-53页 |
| 2.3.1 罗非鱼卵巢性腺RNA提取、第一链cDNA合成 | 第49页 |
| 2.3.2 定量PCR检测 β-catenin1和2在不同时期卵巢中表达模式 | 第49页 |
| 2.3.3 β-catenin1和 β-catenin2转录激活能力检测 | 第49-50页 |
| 2.3.4 β-catenin2对 β-catenin1激活靶基因的调控作用 | 第50页 |
| 2.3.5 哺乳动物双杂交 | 第50-51页 |
| 2.3.6 TALEN靶位点的选择和载体构建、左右臂mRNA合成、显微注射 | 第51页 |
| 2.3.7 G0代阳性鱼筛选 | 第51-52页 |
| 2.3.8 β-catenin1或 β-catenin2敲降对性腺发育及血清激素水平的影响 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-62页 |
| 3.1 β-catenin1和 β-catenin2在不同发育时期卵巢中表达模式 | 第53-54页 |
| 3.2 β-catenin2可以增强 β-catenin1激活的靶基因表达 | 第54-55页 |
| 3.3 TALENs成功敲降 β-catenin1和 β-catenin2基因 | 第55-58页 |
| 3.4 β-catenin基因敲降对卵巢发育的影响 | 第58-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 4.1 β-catenin1有激活靶基因功能，而 β-catenin2无 | 第62页 |
| 4.2 β-catenin1和 β-catenin2间协同作用 | 第62页 |
| 4.3 β-catenin1和 β-catenin2在减数分裂过程中的作用 | 第62-63页 |
| 4.4 β-catenin1和 β-catenin2在卵巢中抑制雄性通路基因表达和雄激素合成 | 第63页 |
| 4.5 β-catenin信号通路与Foxl2信号通路间关系 | 第63-65页 |
| 第四章 抑制Wnt信号通路对性别分化相关基因表达影响 | 第65-72页 |
| 1 引言 | 第65页 |
| 2 材料和方法 | 第65-67页 |
| 2.1 实验动物 | 第65页 |
| 2.2 药品、试剂配制和仪器 | 第65-66页 |
| 2.3 罗非鱼Dkk1重组蛋白的制备以及性腺离体孵育实验 | 第66页 |
| 2.4 FH535离体孵育罗非鱼卵巢对基因表达影响 | 第66-67页 |
| 3 结果 | 第67-70页 |
| 3.1 成功制备罗非鱼Dkk1重组蛋白 | 第67页 |
| 3.2 Dkk1下调 β-catenin1和 β-catenin2基因表达、上调雄性基因表达 | 第67-68页 |
| 3.3 FH535阻断Rspo1/Wnt/β-catenin信号通路对基因表达变化影响 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 4.1 阻断Rspo1/Wnt/β-catenin信号通路对基因表达影响 | 第70-72页 |
| 结论与展望 | 第72-74页 |
| 本研究的主要创新点 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 在读期间发表的主要论文 | 第89页 |
| 在读期间参加科研情况 | 第89页 |
