| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 柑橘黄龙病研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1 危害与病原 | 第13-14页 |
| 1.1.2 病原检测 | 第14-15页 |
| 1.1.3 病原菌的分子生物学研究 | 第15-16页 |
| 1.1.4 柑橘与病原菌的互作研究 | 第16页 |
| 1.1.5 防治方法 | 第16-17页 |
| 1.2 亚洲柑橘木虱研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.1 生物学特征 | 第17-18页 |
| 1.2.2 内共生菌研究 | 第18-19页 |
| 1.2.3 传菌特性 | 第19-20页 |
| 1.2.4 防治方法 | 第20-21页 |
| 1.3 酵母双杂交技术 | 第21-22页 |
| 1.4 转录组研究 | 第22-25页 |
| 第2章 常用仪器、试剂和方法 | 第25-31页 |
| 2.1 常用仪器 | 第25-28页 |
| 2.2.1 培养基 | 第25-26页 |
| 2.2.2 SDS-PAGE试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.3 Western blot试剂 | 第27页 |
| 2.2.4 抗生素配制 | 第27页 |
| 2.2.5 其他试剂 | 第27-28页 |
| 2.3 常用方法 | 第28-31页 |
| 2.3.1 SDS-PAGE | 第28页 |
| 2.3.2 本研究所用引物 | 第28-31页 |
| 第3章 柑橘木虱内共生菌组成分析 | 第31-37页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-33页 |
| 3.1.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1.1 供试昆虫、柑橘与饲养条件 | 第31页 |
| 3.1.1.2 菌株及载体 | 第31页 |
| 3.1.1.3 工具酶及主要试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.2 方法 | 第32-33页 |
| 3.1.2.1 柑橘木虱成虫总DNA提取 | 第32页 |
| 3.1.2.2 内共生菌16S rDNA保守区域扩增 | 第32页 |
| 3.1.2.3 优势内共生菌带菌率检测 | 第32-33页 |
| 3.2 结果与分析 | 第33-35页 |
| 3.2.1 内共生菌群落组成 | 第33-34页 |
| 3.2.2 优势内共生菌带菌率检测 | 第34-35页 |
| 3.3 讨论 | 第35-37页 |
| 第4章 柑橘木虱传菌能力分析 | 第37-41页 |
| 4.1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 4.1.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.1.1 供试昆虫、柑橘与饲养条件 | 第37页 |
| 4.1.1.2 工具酶及主要试剂 | 第37页 |
| 4.1.2 方法 | 第37-38页 |
| 4.1.2.1 柑橘木虱成虫对黄龙病病原菌的获菌能力检测 | 第37-38页 |
| 4.1.2.2 带菌柑橘木虱对健康早橘的传菌能力检测 | 第38页 |
| 4.2 结果与分析 | 第38-39页 |
| 4.2.1 柑橘木虱成虫对黄龙病病原菌的获菌能力 | 第38页 |
| 4.2.2 带菌柑橘木虱对健康早橘的传菌能力 | 第38-39页 |
| 4.3 讨论 | 第39-41页 |
| 第5章 柑橘黄龙病病原菌膜蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 | 第41-47页 |
| 5.1 材料与方法 | 第41-43页 |
| 5.1.1 材料 | 第41-42页 |
| 5.1.1.1 感病柑橘与饲养条件 | 第41页 |
| 5.1.1.2 菌株及载体 | 第41页 |
| 5.1.1.3 工具酶及主要试剂 | 第41-42页 |
| 5.1.2 方法 | 第42-43页 |
| 5.1.2.1 原核表达载体构建 | 第42页 |
| 5.1.2.2 诱导表达 | 第42页 |
| 5.1.2.3 Western blot验证 | 第42-43页 |
| 5.1.2.4 重组蛋白纯化回收及多克隆抗体制备 | 第43页 |
| 5.2 结果与分析 | 第43-46页 |
| 5.2.1 原核表达载体构建 | 第43-44页 |
| 5.2.2 诱导表达及蛋白纯化 | 第44-46页 |
| 5.3 讨论 | 第46-47页 |
| 第6章 酵母双杂交文库构建 | 第47-53页 |
| 6.1 材料与方法 | 第47-50页 |
| 6.1.1 材料 | 第47-48页 |
| 6.1.1.1 供试昆虫、柑橘与饲养条件 | 第47页 |
| 6.1.1.2 菌株及载体 | 第47页 |
| 6.1.1.3 工具酶及主要试剂 | 第47-48页 |
| 6.1.2 方法 | 第48-50页 |
| 6.1.2.1 柑橘木虱总RNA的提取 | 第48页 |
| 6.1.2.2 ds cDNA的合成及纯化 | 第48-49页 |
| 6.1.2.3 酵母Y187感受态细胞制备 | 第49页 |
| 6.1.2.4 ds cDNA转化Y187感受态细胞及文库鉴定 | 第49页 |
| 6.1.2.5 文库菌体收集 | 第49-50页 |
| 6.2 结果与分析 | 第50-51页 |
| 6.2.1 ds cDNA的合成及纯化 | 第50页 |
| 6.2.2 柑橘木虱成虫cDNA文库转化效率、文库鉴定及文库滴度检测 | 第50-51页 |
| 6.3 讨论 | 第51-53页 |
| 第7章 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第53-61页 |
| 7.1 材料与方法 | 第53-56页 |
| 7.1.1 材料 | 第53-54页 |
| 7.1.1.1 菌株及载体 | 第53页 |
| 7.1.1.2 工具酶及主要试剂 | 第53-54页 |
| 7.1.2 方法 | 第54-56页 |
| 7.1.2.1 诱饵载体构建 | 第54页 |
| 7.1.2.2 重组载体转化酵母Y2H Gold并检测毒性和自激活 | 第54页 |
| 7.1.2.3 诱饵蛋白表达检测 | 第54-55页 |
| 7.1.2.4 杂交筛选阳性克隆 | 第55-56页 |
| 7.2 结果与分析 | 第56-60页 |
| 7.2.1 诱饵载体构建 | 第56-57页 |
| 7.2.2 重组载体转化酵母Y2H Gold并检测毒性和自激活 | 第57-58页 |
| 7.2.3 诱饵蛋白表达检测 | 第58-59页 |
| 7.2.4 互作蛋白筛选结果 | 第59-60页 |
| 7.3 讨论 | 第60-61页 |
| 第8章 柑橘木虱转录组和表达谱分析 | 第61-75页 |
| 8.1 材料和方法 | 第61-64页 |
| 8.1.1 材料 | 第61页 |
| 8.1.1.1 供试昆虫、柑橘与饲养条件 | 第61页 |
| 8.1.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 8.1.2 方法 | 第61-64页 |
| 8.1.2.1 cDNA文库构建及测序 | 第61-62页 |
| 8.1.2.2 数据统计组装 | 第62-63页 |
| 8.1.2.3 转录组数据分析 | 第63页 |
| 8.1.2.4 表达谱测序基因表达量统计及差异表达基因筛选 | 第63-64页 |
| 8.1.2.5 表达谱数据分析 | 第64页 |
| 8.2 结果与分析 | 第64-72页 |
| 8.2.1 数据组装结果 | 第64-65页 |
| 8.2.2 转录组数据分析 | 第65-68页 |
| 8.2.3 转录组数据部分基因比对分析 | 第68-72页 |
| 8.2.4 表达谱差异基因分析 | 第72页 |
| 8.3 讨论 | 第72-75页 |
| 总结 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 在读期间发表的论文 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
