| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第15-29页 |
| 1.1 硒的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1.1 硒和硒蛋白的功能 | 第15-17页 |
| 1.1.2 硒和硒蛋白在心血管系统中的作用 | 第17-18页 |
| 1.1.3 硒与凋亡的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2 miRNA的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.2.1 miRNA的生物合成和作用机制 | 第19-21页 |
| 1.2.2 miRNA和凋亡 | 第21-22页 |
| 1.3 长链非编码RNA的研究进展 | 第22-26页 |
| 1.3.1 长链非编码RNA的概述 | 第22页 |
| 1.3.2 长链非编码RNA的功能和作用机制 | 第22-24页 |
| 1.3.3 LncRNA与疾病 | 第24-25页 |
| 1.3.4 LncRNA与凋亡 | 第25-26页 |
| 1.3.5 LncRNA与miRNA之间的互相调节 | 第26页 |
| 1.4 磷酸肌醇通路的研究进展 | 第26-28页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 2 材料方法 | 第29-47页 |
| 2.1 主要仪器和试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第29页 |
| 2.1.2 主要化学与生物试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 方法 | 第30-47页 |
| 2.2.1 动物和分组 | 第30页 |
| 2.2.2 鸡内皮细胞的原代培养 | 第30-31页 |
| 2.2.3 鸡皮肤、静脉组织病理显微结构观察 | 第31页 |
| 2.2.4 静脉组织中氧化损伤功能的检测 | 第31页 |
| 2.2.5 静脉组织中硒蛋白基因mRNA、细胞因子mRNA、炎症相关基因mRNA、热休克蛋白、磷酸肌醇通路、凋亡通路基因m RNA和蛋白表达的检测 | 第31-35页 |
| 2.2.6 鸡LncRNA组学的检测、靶基因功能富集、测序结果的验证 | 第35-40页 |
| 2.2.7 鸡miRNA组学的检测、靶基因的功能富集、测序结果的验证 | 第40-43页 |
| 2.2.8 mir-223 敲低和过表达模型的细胞建立 | 第43页 |
| 2.2.9 siLncRNA-ALDBGALG0000001600转染细胞模型的建立 | 第43-44页 |
| 2.2.10 生物信息学预测mir-223 的靶基因 | 第44页 |
| 2.2.11 插入靶基因的重组质粒的构建 | 第44页 |
| 2.2.12 Inpp4a和mir-223 荧光素酶报告基因的检测 | 第44-45页 |
| 2.2.13 LncRNA-1600 和mir-223 荧光素酶报告基因的检测 | 第45页 |
| 2.2.14 mir-223 敲低和过表达细胞对磷酸肌醇通路影响的检测 | 第45页 |
| 2.2.15 siLncRNA-1600 转染的细胞对磷酸肌醇通路影响的检测 | 第45页 |
| 2.2.16 mir-223 敲低和过表达细胞对凋亡通路影响的检测 | 第45-46页 |
| 2.2.17 siLncRNA-1600 转染细胞对凋亡通路的影响的检测 | 第46页 |
| 2.2.18 数据分析和统计法 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-84页 |
| 3.1 鸡缺硒性渗出性素质模型的建立 | 第47页 |
| 3.2 缺硒鸡静脉组织病理显微结构观察结果 | 第47-48页 |
| 3.3 缺硒鸡静脉组织超微结构观察结果 | 第48-49页 |
| 3.4 缺硒鸡静脉组织凋亡影响的检测结果 | 第49页 |
| 3.5 缺硒鸡静脉组织氧化应激相关指标的检测结果 | 第49-50页 |
| 3.6 总RNA质量的鉴定结果 | 第50-51页 |
| 3.6.1 RNA浓度及完整性测定 | 第50页 |
| 3.6.2 总RNA完整性检验 | 第50-51页 |
| 3.7 缺硒对鸡静脉组织硒蛋白mRNA的影响的检测结果 | 第51-52页 |
| 3.8 缺硒对鸡静脉组织热休克蛋白表达的影响的检测结果 | 第52页 |
| 3.9 缺硒对鸡静脉组织炎症因子的影响的检测结果 | 第52-53页 |
| 3.10 缺硒对鸡静脉组织细胞因子的影响的检测结果 | 第53-54页 |
| 3.11 缺硒鸡静脉组织miRNA组的测序结果 | 第54-59页 |
| 3.11.1 鸡静脉组织差异miRNA的整体情况 | 第54-55页 |
| 3.11.2 缺硒对鸡静脉差异mirRNA的筛选与验证 | 第55-57页 |
| 3.11.3 缺硒对肉鸡静脉组织中miRNA靶基因富集的分析 | 第57-59页 |
| 3.12 缺硒和正常鸡静脉组织LncRNA测序结果 | 第59-70页 |
| 3.12.1 缺硒和正常鸡静脉组织差异LncRNA结果 | 第59页 |
| 3.12.2 缺硒鸡静脉组织中差异LncRNA预测靶基因的GO和KEGG富集结果 | 第59-62页 |
| 3.12.3 miRNA组学和LncRNA组学联合筛选 | 第62-63页 |
| 3.12.4 静脉组织中参与氧化还原反应的LncRNA的检测 | 第63-65页 |
| 3.12.5 内皮细胞中参与氧化还原反应的mRNA的检测 | 第65-66页 |
| 3.12.6 硒对中内皮细胞中参与氧化还原反应的LncRNA的影响 | 第66-70页 |
| 3.13 缺硒对鸡静脉组织磷酸肌醇通路相关基因表达影响的检测 | 第70-71页 |
| 3.14 缺硒对鸡静脉组织凋亡相关基因Bax，Bcl-2，caspase 3，caspase9表达的影响的检测 | 第71-72页 |
| 3.15 硒对肉鸡静脉组织及内皮细胞中mir-223、Inpp4a和LncRNA-1600 表达的影响 | 第72-73页 |
| 3.16 体外培养的内皮细胞中mir-223 的mimic和inhibitor模型的建立 | 第73页 |
| 3.17 内皮细胞中敲低LncRNA-1600 的模型建立 | 第73-74页 |
| 3.18 mir-223 与mRNA Inpp4a和LncRNA-1600 的结合情况 | 第74页 |
| 3.19 荧光素酶报告基因验证mir-223 靶基因mRNA Inpp4a和Lnc RNA-1600 的检测结果 | 第74-76页 |
| 3.20 敲低和过表达mir-223 后靶基因Inpp4a和LncRNA-1600 表达的检测结果 | 第76-77页 |
| 3.21 内皮细胞中敲低和过表达mir-223 后磷酸肌醇通路中蛋白表达的检测结果 | 第77-78页 |
| 3.22 内皮细胞中转染siLncRNA-1600 后磷酸肌醇通路中蛋白的表达 | 第78-79页 |
| 3.23 内皮细胞中敲低和过表达mir-223 后凋亡水平的表达的检测 | 第79-81页 |
| 3.24 内皮细胞中转染siLncRNA-1600 后凋亡通路中蛋白的表达的检测 | 第81-84页 |
| 4 讨论 | 第84-93页 |
| 4.1 缺硒对鸡静脉中硒蛋白的调控 | 第84-85页 |
| 4.2 硒对鸡静脉中抗氧化酶、热休克蛋白、炎症因子、细胞因子、磷酸肌醇通路分子和凋亡基因的影响 | 第85-88页 |
| 4.2.1 硒对鸡静脉中抗氧化酶的影响 | 第85-86页 |
| 4.2.2 硒对鸡静脉中热休克蛋白的影响 | 第86-87页 |
| 4.2.3 硒对鸡静脉中炎症因子的影响 | 第87页 |
| 4.2.4 硒对鸡静脉中细胞因子的影响 | 第87-88页 |
| 4.2.5 缺硒对鸡静脉中磷酸肌醇分子的影响 | 第88页 |
| 4.2.6 缺硒对鸡静脉中凋亡分子的影响 | 第88页 |
| 4.3 缺硒对mi RNA组学和LncRNA组学的影响 | 第88-90页 |
| 4.3.1 缺硒对miRNA组学的影响 | 第89页 |
| 4.3.2 缺硒对LncRNA组学的影响 | 第89-90页 |
| 4.4 缺硒对参与氧化还原反应的Lnc RNA及其靶mRNA的调控 | 第90-91页 |
| 4.5 鸡静脉中mir-223 和LncRNA-1600 对内皮细胞凋亡的影响 | 第91-93页 |
| 5 结论 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-111页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第111页 |
