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侧柏对干旱与自然低温胁迫响应的分子机制研究

摘要第6-9页
Abstract第9-13页
第一章 文献综述第18-42页
    1.1 研究背景第18-19页
    1.2 干旱、低温胁迫响应机理研究第19-33页
        1.2.1 植物干旱胁迫的生理生化响应/适应机制第19-20页
        1.2.2 植物对低温胁迫的生理生化响应/适应机制第20-21页
        1.2.3 胁迫下渗透调节物质第21-24页
        1.2.4 胁迫下抗氧化酶活性第24-25页
        1.2.5 植物对干旱胁迫的分子响应/适应机制第25-26页
        1.2.6 干旱胁迫信号传递第26页
        1.2.7 干旱调控相关基因第26-27页
        1.2.8 ABA-dependent调控路径和ABA-independent调控路径第27-28页
        1.2.9 植物低温信号感知第28-29页
        1.2.10 植物低温胁迫相关基因的表达第29页
        1.2.11 转录因子在干旱、冷胁的调控作用第29-32页
        1.2.12 胁迫下的功能蛋白第32-33页
    1.3 转录组学在植物非生物逆境中研究应用第33-35页
    1.4 蛋白质组研究第35-38页
        1.4.1 蛋白质组学在植物干旱的研究第36-37页
        1.4.2 蛋白质组学在植物低温/冷胁迫的研究第37-38页
    1.5 古树相关的研究现状第38-39页
    1.6 研究的目的和内容第39-42页
        1.6.1 研究目的和意义第39-40页
        1.6.2 研究内容第40页
        1.6.3 技术路线第40-42页
第二章 侧柏幼苗干旱胁迫根系转录组测序研究与差异基因筛选第42-66页
    2.1 引言第42页
    2.2 试验材料第42-47页
        2.2.1 培养条件与处理第42-43页
        2.2.2 RNA提取与质检第43页
        2.2.3 转录组测序第43页
        2.2.4 测序数据质量控制及从头(de novo)组装第43-44页
        2.2.5 组装后序列结构分析与功能注释第44-45页
        2.2.6 与组装结果比对第45页
        2.2.7 表达量分析与表达差异分析第45页
        2.2.8 差异基因GO、KEGG富集分析第45-46页
        2.2.9 SSR检测与转录因子分析第46页
        2.2.10 荧光定量PCR对转录组测序结果的验证第46-47页
    2.3 结果与分析第47-60页
        2.3.1 Illumina双端测序与de novo从头组装第47-49页
        2.3.2 Unigenes功能分析第49页
        2.3.3 GO、KOG功能分类第49-51页
        2.3.4 KEGG通路功能分类第51-53页
        2.3.5 干旱胁迫下的差异基因分析第53页
        2.3.6 干旱胁迫下的转录因子分析第53-57页
        2.3.7 SSR鉴定第57-58页
        2.3.8 qRT-PCR对RNA-seq差异基因的验证第58-60页
    2.4 讨论第60-65页
    2.5 小结第65-66页
第三章 侧柏幼苗根系、叶组织干旱胁迫蛋白质组学分析第66-88页
    3.1 引言第66-67页
    3.2 材料与方法第67-71页
        3.2.1 样品采集第67页
        3.2.2 叶绿素测定第67-68页
        3.2.3 可溶性蛋白含量测定第68页
        3.2.4 侧柏生长观察和水分含量测定第68页
        3.2.5 生理指标测定的统计分析第68页
        3.2.6 蛋白质提取、等点聚焦(IEF)、双向电泳分析和凝胶图像分析第68-69页
        3.2.7 样品蛋白质基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)分析第69页
        3.2.8 蛋白质鉴定数据库分析第69-70页
        3.2.9 蛋白质功能分类第70页
        3.2.10 RNA提取和定量PCR分析第70-71页
    3.3 结果与分析第71-81页
        3.3.1 干旱下可溶性蛋白质、叶绿素和水分含量,植物生长量观测第71-73页
        3.3.2 双向电泳分析与差异蛋白质的鉴定第73-77页
        3.3.3 蛋白质功能分类第77页
        3.3.4 鉴定蛋白质的表达聚类分析第77-80页
        3.3.5 蛋白质对应基因在转录水平变化分析第80-81页
    3.4 讨论第81-87页
        3.4.1 侧柏干旱胁迫下生理变化分析第81-82页
        3.4.2 参与胁迫响应/防御蛋白第82-83页
        3.4.3 碳水化合物代谢蛋白第83-84页
        3.4.4 叶片中光合作用相关蛋白第84-85页
        3.4.5 氮代谢相关蛋白第85页
        3.4.6 根系蛋白质命运(折叠和修饰)和蛋白质水解相关蛋白第85-86页
        3.4.7 其他分类蛋白质参与干旱胁迫第86-87页
        3.4.8 mRNA表达水平研究第87页
    3.5 小结第87-88页
第四章 侧柏干旱胁迫响应基因在干旱后复水表达分析验证第88-110页
    4.1 材料与方法第88-89页
        4.1.1 试验材料第88-89页
        4.1.2 RNA提取与反转录第89页
        4.1.3 荧光定量PCR分析第89页
        4.1.4 叶组织叶绿素含量测定第89页
    4.2 结果与分析第89-105页
        4.2.1 干旱胁迫下蛋白激酶相关基因表达分析第89-92页
        4.2.2 干旱胁迫复水下三个转录因子表达量分析第92-94页
        4.2.3 干旱胁迫复水下活性氧清除相关基因表达量分析第94-97页
        4.2.4 干旱胁迫复水下渗透调节相关基因表达量分析第97-101页
        4.2.5 干旱胁迫复水下保护因子相关基因表达量分析第101-104页
        4.2.6 干旱胁迫复水下 1433-like蛋白和皮部储存蛋白基因表达量分析第104-105页
    4.3 讨论第105-109页
    4.4 小结第109-110页
第五章 古侧柏叶冬季自然低温响应的差异蛋白质组学研究第110-133页
    5.1 材料与方法第111-113页
        5.1.1 试验材料和生长环境第111-112页
        5.1.2 生理指标测定第112-113页
        5.1.3 蛋白质提取第113页
        5.1.4 等电聚焦、SDS-PAGE电泳和图像分析第113页
        5.1.5 差异蛋白质鉴定第113页
        5.1.6 鉴定蛋白质数据库检索第113页
        5.1.7 蛋白质功能分类第113页
    5.2 结果与分析第113-125页
        5.2.1 不同树龄侧柏叶绿素、MDA、可溶性蛋白质含量,SOD、POD活性变化第113-114页
        5.2.2 二维凝胶电泳分析与差异蛋白质的鉴定第114-123页
        5.2.3 蛋白质功能分类与定位第123页
        5.2.4 鉴定蛋白质在3个树龄中的表达聚类分析第123-125页
    5.3 讨论第125-132页
        5.3.1 生理参数变化第125-126页
        5.3.2 参与光合作用蛋白第126-127页
        5.3.3 能量和碳水化合物相关蛋白第127-128页
        5.3.4 胁迫响应相关蛋白第128-130页
        5.3.5 脂类代谢相关蛋白第130页
        5.3.6 蛋白质水解相关蛋白第130页
        5.3.7 激素代谢相关蛋白第130-132页
    5.4 小结第132-133页
第六章 结论与创新点第133-136页
    6.1 主要结论第133-134页
    6.2 创新点第134-135页
    6.3 研究展望第135-136页
参考文献第136-159页
附录第159-171页
致谢第171-172页
作者简介第172页

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