| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4页 |
| 第一章 引言 | 第7-13页 |
| 1.1 萜类物质及其生物学功能 | 第7页 |
| 1.2 萜类物质的合成途径 | 第7-9页 |
| 1.3 萜类合酶基因家族 | 第9-11页 |
| 1.4 TPS-g家族研究现状 | 第11-12页 |
| 1.5 研究目的意义与内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第13页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第13页 |
| 2.1.3 药品及试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第14页 |
| 2.1.5 主要试剂配置方法 | 第14-17页 |
| 2.1.6 引物合成 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-31页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第18-24页 |
| 2.2.2 FhTPS4基因组全长的克隆 | 第24页 |
| 2.2.3 生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.4 载体构建 | 第24-26页 |
| 2.2.5 亚细胞定位实验 | 第26-27页 |
| 2.2.6 可溶性蛋白体外诱导 | 第27-28页 |
| 2.2.7 FhTPS4体外酶活反应的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.8 Real-time PCR及FhTPS4在香雪兰中的表达量分析 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-43页 |
| 3.1 香雪兰FhTPS4基因的克隆及生物信息学分析 | 第31-35页 |
| 3.1.1 FhTPS4基因全长cDNA克隆 | 第31-32页 |
| 3.1.2 FhTPS4基因生物信息学分析 | 第32-35页 |
| 3.1.3 FhTPS4基因组序列的克隆 | 第35页 |
| 3.2 pUC19-FhTPS4和pET32a-FhTPS4表达载体的构建结果 | 第35-36页 |
| 3.2.1 成功构建瞬时表达载体 | 第35-36页 |
| 3.2.2 成功构建原核表达载体 | 第36页 |
| 3.3 亚细胞定位结果分析 | 第36-37页 |
| 3.4 可溶性重组蛋白的制备及其酶活检测的结果分析 | 第37-40页 |
| 3.4.1 含重组质粒的大肠杆菌BL21的生长曲线 | 第37-38页 |
| 3.4.2 可溶性重组蛋白诱导条件的确定及制备 | 第38-39页 |
| 3.4.3 重组蛋白FhTPS4的Western Blot结果分析 | 第39页 |
| 3.4.4 重组蛋白FhTPS4的体外酶活检测 | 第39-40页 |
| 3.5 不同品系香雪兰各时期、各组织挥发物与FhTPS4基因表达量相关性分析 | 第40-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 从香雪兰中克隆得到一个萜类合酶基因FhTPS4 | 第43-44页 |
| 4.2 FhTPS4是一种具有双功能性质的萜类合酶基因 | 第44-45页 |
| 4.3 在香雪兰体内FhTPS4催化花托和花萼的沉香醇的合成释放 | 第45-47页 |
| 第五章 小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附件 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
