| 内容摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第17-57页 |
| 1.1 基因治疗的意义与困难 | 第17页 |
| 1.2 病毒与非病毒基因载体的优缺点 | 第17-19页 |
| 1.3 树形高分子的结构特点 | 第19-20页 |
| 1.4 树形高分子作为基因载体的优势 | 第20-21页 |
| 1.5 表面功能化修饰的树形高分子作为基因载体 | 第21-42页 |
| 1.5.1 糖基化修饰 | 第22-25页 |
| 1.5.2 氨基酸修饰 | 第25-28页 |
| 1.5.3 阳离子分子修饰 | 第28-31页 |
| 1.5.4 脂质分子修饰 | 第31-36页 |
| 1.5.5 氟化修饰 | 第36-38页 |
| 1.5.6 多肽及蛋白修饰 | 第38-39页 |
| 1.5.7 高分子聚合物修饰 | 第39-41页 |
| 1.5.8 纳米材料修饰 | 第41-42页 |
| 1.6 氢键与生物材料 | 第42-53页 |
| 1.6.1 什么是氢键 | 第42-43页 |
| 1.6.2 超分子化学与氢键自组装 | 第43-45页 |
| 1.6.3 生物材料中的氢键白组装 | 第45-50页 |
| 1.6.4 氢键参与的基因运输系统 | 第50-53页 |
| 1.7 论文研究思路与研究内容 | 第53-57页 |
| 第二章 树形高分子表面修饰氢键配体作为基因载体的制备和应用 | 第57-91页 |
| 2.1 引言 | 第57-58页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第58-64页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 2.2.2 合成DAT修饰的树形高分子 | 第59页 |
| 2.2.3 合成二甲氧基三嗪(DMT)和二氨基嘌呤(APu)修饰的树形高分子 | 第59页 |
| 2.2.4 合成DAT修饰的PAA和PPI | 第59页 |
| 2.2.5 一维和二维核磁共振技术表征 | 第59-60页 |
| 2.2.6 茚三酮检测法 | 第60页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第60页 |
| 2.2.8 转染复合物的颗粒尺寸和zeta电势分析 | 第60-61页 |
| 2.2.9 细胞培养 | 第61页 |
| 2.2.10 体外基因转染 | 第61-62页 |
| 2.2.11 细胞毒性分析 | 第62页 |
| 2.2.12 溶血实验分析 | 第62页 |
| 2.2.13 细胞摄入分析 | 第62-63页 |
| 2.2.14 内涵体逃逸分析 | 第63页 |
| 2.2.15 细胞质核酸酶活性分析 | 第63页 |
| 2.2.16 血清抗性分析 | 第63页 |
| 2.2.17 制备多细胞球体 | 第63-64页 |
| 2.2.18 多细胞球体基因转染实验 | 第64页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第64-89页 |
| 2.3.1 DAT修饰的PAMAM树形高分子的合成和表征 | 第64-66页 |
| 2.3.2 DMT和APu修饰的PAMAM树形高分子的合成和表征 | 第66-67页 |
| 2.3.3 DAT修饰的PPI和PAA | 第67页 |
| 2.3.4 树形高分子降解分析 | 第67-69页 |
| 2.3.5 转染复合物尺寸和zeta电势分析 | 第69-71页 |
| 2.3.6 凝胶电泳实验 | 第71-73页 |
| 2.3.7 DAT修饰的G5 PAMAM树形高分子基因转染研究 | 第73-77页 |
| 2.3.8 DAT修饰的其他阳离子聚合物基因转染研究 | 第77-79页 |
| 2.3.9 细胞毒性实验 | 第79-81页 |
| 2.3.10 氢键调控基因转染机制 | 第81-82页 |
| 2.3.11 碱基修饰的树形高分子转染研究 | 第82-83页 |
| 2.3.12 氢键调控基因转染的其他机制 | 第83-87页 |
| 2.3.13 DAT修饰树形高分子中伯胺基团的作用研究 | 第87-88页 |
| 2.3.14 血清抗性研究 | 第88页 |
| 2.3.15 3D肿瘤细胞转染研究 | 第88-89页 |
| 2.4 本章小结 | 第89-91页 |
| 第三章 二氨基三嗪修饰的PAMAM树形高分子基因载体运输MDM2 siRNA抑制PC-9肿瘤生长的应用 | 第91-107页 |
| 3.1 引言 | 第91-93页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第93-98页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第93页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第93页 |
| 3.2.3 合成DAT修饰的树形高分子 | 第93页 |
| 3.2.4 一维核磁共振技术表征 | 第93页 |
| 3.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第93-94页 |
| 3.2.6 转染复合物的颗粒尺寸和zeta电势分析 | 第94页 |
| 3.2.7 细胞培养 | 第94页 |
| 3.2.8 皮下荷瘤实验 | 第94页 |
| 3.2.9 体外siRNA运输实验 | 第94-95页 |
| 3.2.10 体内siRNA运输实验 | 第95页 |
| 3.2.11 蛋白质免疫印迹实验 | 第95-96页 |
| 3.2.12 RNA抽提 | 第96页 |
| 3.2.13 Real-Time PCR | 第96-97页 |
| 3.2.14 组织块石蜡包埋 | 第97-98页 |
| 3.2.15 组织免疫组化和组织HE染色 | 第98页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第98-106页 |
| 3.3.1 DAT修饰的树形高分子的合成与表征 | 第99页 |
| 3.3.2 转染复合物尺寸和zeta电势分析 | 第99-101页 |
| 3.3.3 凝胶电泳实验 | 第101页 |
| 3.3.4 在细胞水平上干扰MDM2基因对PC-9细胞凋亡的影响 | 第101-103页 |
| 3.3.5 在动物水平上干扰MDM2基因抑制小鼠皮下PC-9肿瘤生长 | 第103-106页 |
| 3.4 本章小结 | 第106-107页 |
| 第四章 一种超分子的方法提高低代数树形高分子的基因转染效率 | 第107-133页 |
| 4.1 引言 | 第107-108页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第108-112页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第108页 |
| 4.2.2 合成DAT修饰的低代数树形高分子 | 第108-109页 |
| 4.2.3 合成二甲氧基三嗪(DMT)修饰的低代数树形高分子 | 第109页 |
| 4.2.4 一维和二维核磁共振技术表征 | 第109页 |
| 4.2.5 脉冲梯度场(PGSE)扩散核磁实验 | 第109页 |
| 4.2.6 转染复合物的形成 | 第109-110页 |
| 4.2.7 转染复合物的尺寸和zeta电势表征 | 第110页 |
| 4.2.8 溴化乙锭(EB)置换分析 | 第110页 |
| 4.2.9 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第110-111页 |
| 4.2.10 细胞培养 | 第111页 |
| 4.2.11 体外基因转染实验 | 第111页 |
| 4.2.12 细胞毒性实验 | 第111页 |
| 4.2.13 细胞摄入实验 | 第111-112页 |
| 4.2.14 激光共聚焦显微镜实验(CLSM) | 第112页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第112-131页 |
| 4.3.1 DAT修饰的阳离子聚合物的合成与表征 | 第112-114页 |
| 4.3.2 DMT修饰的阳离子聚合物的合成与表征 | 第114-115页 |
| 4.3.3 CyA与G3-DAT_(13)之间的氢键自组装 | 第115-117页 |
| 4.3.4 转染复合物稳定性研究 | 第117-121页 |
| 4.3.5 体外基因转染实验 | 第121-126页 |
| 4.3.6 细胞毒性实验 | 第126-128页 |
| 4.3.7 细胞摄入实验 | 第128-130页 |
| 4.3.8 激光共聚焦实验 | 第130-131页 |
| 4.4 本章小结 | 第131-133页 |
| 第五章 结论与展望 | 第133-137页 |
| 参考文献 | 第137-157页 |
| 攻读博士学位期间所取得的科研成果 | 第157-159页 |
| 致谢 | 第159-160页 |
