| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述与研究概况 | 第12-21页 |
| 1.1. 禾谷镰刀菌简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1. 禾谷镰刀菌生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1.2. 禾谷镰刀菌引起的小麦赤霉病害循环 | 第13页 |
| 1.2. 禾谷镰刀菌中基因功能研究进展 | 第13-18页 |
| 1.2.1. 与生殖相关基因研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.2. 与生长发育及抗逆相关基因研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.3. 与致病性和毒性相关基因研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.4. 禾谷镰刀菌毒素合成相关基因研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3. 蛋白激酶与PKA信号通路研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1. 蛋白激酶研究概况 | 第18-19页 |
| 1.3.2. PKA蛋白研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4. 本课题的研究背景、目的及内容 | 第20-21页 |
| 第二章 cpk1,cpk2,fac1突变体的获得 | 第21-32页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第21-25页 |
| 2.1.1. 材料 | 第21页 |
| 2.1.2. 试剂（盒）与酶 | 第21-23页 |
| 2.1.3. 主要试剂配方 | 第23-25页 |
| 2.1.4. 仪器 | 第25页 |
| 2.2. 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1. 构建CPK1，CPK，FAC1基因敲除同源重组片段 | 第25-26页 |
| 2.2.2. 禾谷镰刀菌的原生质制备与转化 | 第26-27页 |
| 2.2.3. 转化子初步PCR检测 | 第27-28页 |
| 2.2.4. CTAB法提取转化子基因组DNA | 第28-29页 |
| 2.2.5. cpk1，cpk2和fac1基因敲除转化子的Southern blotting检测 | 第29-30页 |
| 2.3. 实验结果与讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 cpk1,cpk2和fac1突变体的表型及致病性分析 | 第32-40页 |
| 3.1. 材料、试剂与仪器 | 第32页 |
| 3.1.1. 材料 | 第32页 |
| 3.1.2. 试剂（盒）与酶 | 第32页 |
| 3.1.3. 主要试剂配方 | 第32页 |
| 3.1.4. 实验仪器 | 第32页 |
| 3.2. 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1. 菌落生长速率测定和形态观察 | 第32-33页 |
| 3.2.2. cpk1，cpk2和fac1突变体的产孢率统计、孢子萌发形态观察 | 第33页 |
| 3.2.3. 有性生殖试验 | 第33页 |
| 3.2.4. 小麦穗接种实验与发病情况统计 | 第33-34页 |
| 3.3. 实验结果与讨论 | 第34-40页 |
| 3.3.1. 实验结果 | 第34-39页 |
| 3.3.2. 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 cpk1突变体的耐热性实验 | 第40-45页 |
| 4.1. 材料、试剂与仪器 | 第40页 |
| 4.1.1. 材料 | 第40页 |
| 4.1.2. 试剂与酶 | 第40页 |
| 4.1.3. 主要试剂配方 | 第40页 |
| 4.1.4. 仪器 | 第40页 |
| 4.2. 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1. cpk1突变体的菌落热激反应 | 第40页 |
| 4.2.2. cpk1突变体孢子萌发热激反应实验 | 第40-41页 |
| 4.2.3. cpk1突变体中热激蛋白的RNA水平表达 | 第41-42页 |
| 4.3. 实验结果与讨论 | 第42-45页 |
| 4.3.1. 实验结果 | 第42-44页 |
| 4.3.2. 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 cpk1突变体的功能互补和亚细胞定位 | 第45-50页 |
| 5.1. 材料、试剂与仪器 | 第45-46页 |
| 5.1.1. 材料 | 第45页 |
| 5.1.2. 试剂（盒）与酶 | 第45页 |
| 5.1.3. 主要试剂配方 | 第45页 |
| 5.1.4. 实验仪器 | 第45-46页 |
| 5.2. 实验方法 | 第46-48页 |
| 5.2.1. PCR扩增CPK1基因的完整ORF | 第46页 |
| 5.2.2. CPK1基因互补片段与pFL2质粒的酵母转化 | 第46页 |
| 5.2.3. 提取酵母转化子质粒 | 第46-47页 |
| 5.2.4. 电击转化质粒到大肠杆菌 | 第47页 |
| 5.2.5. 提取大肠杆菌质粒 | 第47页 |
| 5.2.6. 获取cpk1突变体的基因互补转化子 | 第47页 |
| 5.2.7. CPK1蛋白的亚细胞定位 | 第47页 |
| 5.2.8. CPK1互补转化子的表型分析 | 第47-48页 |
| 5.3. 实验结果与讨论 | 第48-50页 |
| 5.3.1. 实验结果 | 第48-49页 |
| 5.3.2. 讨论 | 第49-50页 |
| 第六章 cpk1,fac1突变体中DON合成量分析 | 第50-53页 |
| 6.1. 材料，试剂与实验仪器 | 第50页 |
| 6.1.1. 材料 | 第50页 |
| 6.1.2. 试剂（盒）与酶 | 第50页 |
| 6.1.3. 仪器 | 第50页 |
| 6.2. 实验方法 | 第50-51页 |
| 6.2.1. 小麦穗接种点的毒素含量测定 | 第50页 |
| 6.2.2. 大米培养基中cpk1，fac1突变体产毒量测定 | 第50-51页 |
| 6.3. 实验结果与讨论 | 第51-53页 |
| 6.3.1. 实验结果 | 第51-52页 |
| 6.3.2. 讨论 | 第52-53页 |
| 第七章 cpk1,fac1基因缺失突变体中DON生物合成重要基因的表达分析与亚细胞定位 | 第53-64页 |
| 7.1. 材料、试剂与试验仪器 | 第53-54页 |
| 7.1.1. 材料 | 第53页 |
| 7.1.2. 试剂（盒）与酶 | 第53页 |
| 7.1.3. 主要试剂配制 | 第53-54页 |
| 7.1.4. 仪器 | 第54页 |
| 7.2. 实验方法 | 第54-57页 |
| 7.2.1. 产毒相关基因表达量的RNA水平分析 | 第54页 |
| 7.2.2. 产毒相关基因的荧光标记与亚细胞观察 | 第54-55页 |
| 7.2.3. 产毒相关基因蛋白水平定量分析 | 第55-57页 |
| 7.3. 实验结果与讨论 | 第57-64页 |
| 7.3.1. 实验结果 | 第57-62页 |
| 7.3.2. 讨论 | 第62-64页 |
| 第八章 全文总结与讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
