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苏云金芽胞杆菌BMB171中两个c-di-GMP Riboswitches的功能研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-23页
    1.1 研究问题的由来第10页
    1.2 文献综述第10-22页
        1.2.1 苏云金芽胞杆菌第10-12页
        1.2.2 细菌的信号转导系统第12-14页
        1.2.3 细菌中核酸类第二信使第14-15页
        1.2.4 c-di-GMP(环二鸟苷酸)第15-16页
        1.2.5 c-di-GMP riboswitches第16-17页
        1.2.6 细菌的运动与粘附第17-21页
        1.2.7 生物膜的形成第21-22页
    1.3 研究的目的和意义第22-23页
2 材料和方法第23-33页
    2.1 材料第23-27页
        2.1.1 菌株第23-24页
        2.1.2 质粒第24-25页
        2.1.3 引物第25-26页
        2.1.4 试剂与仪器第26页
        2.1.5 培养基与缓冲液第26-27页
    2.2 研究方法第27-33页
        2.2.1 质粒抽提第27页
        2.2.2 基因组DNA抽提(CTAB法)第27-28页
        2.2.3 酶切第28页
        2.2.4 切胶回收与纯化第28页
        2.2.5 连接第28页
        2.2.6 感受态的制备第28页
        2.2.7 转化与转化子的验证第28-29页
        2.2.8 β-半乳糖苷酶活性的测定第29页
        2.2.9 蛋白质浓度的测定第29页
        2.2.10 生物膜的形成第29-30页
        2.2.11 I-SceI介导的基因敲除第30-31页
        2.2.12 运动性(Swarm试验)第31页
        2.2.13 趋化性(毛细管法)第31-32页
        2.2.14 胶原粘附试验第32-33页
3 结果与分析第33-47页
    3.1 生物信息学分析第33-39页
        3.1.1 c-di-GMP riboswitches的分布第33-34页
        3.1.2 c-di-GMP riboswitches的调控机理第34-35页
        3.1.3 c-di-GMP riboswitches的调控机理下游基因的转录情况第35页
        3.1.4 下游基因的功能分析第35-38页
        3.1.5 c-di-GMP信号蛋白第38-39页
    3.2 c-di-GMP riboswitches介导的的转录调控第39-42页
        3.2.1 最小转录调控区查找第39-41页
        3.2.2 c-di-GMP riboswitches的作用第41-42页
    3.3 下游基因的功能研究第42-47页
        3.3.1 基因敲除突变体的构建第42-43页
        3.3.2 表型观察第43-45页
        3.3.3 趋化性第45页
        3.3.4 胶原粘附试验第45-46页
        3.3.5 基因回补第46-47页
4 讨论第47-49页
参考文献第49-56页
附录第56-64页
致谢第64页

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