| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 雅致放射毛霉的概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 雅致放射毛霉的简介 | 第11页 |
| 1.1.2 雅致放射毛霉的产酶特征 | 第11-12页 |
| 1.1.3 雅致放射毛霉的应用 | 第12页 |
| 1.1.4 雅致放射毛霉的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 羧肽酶总述 | 第13-19页 |
| 1.2.1 羧肽酶的概况 | 第13-16页 |
| 1.2.2 丝氨酸羧肽酶的概况 | 第16-18页 |
| 1.2.3 羧肽酶的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 本论文立题依据及研究内容 | 第19-21页 |
| 1.3.1 立题依据 | 第19页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 雅致放射毛霉转录组羧肽酶数据分析 | 第21-30页 |
| 2.1 材料和主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.1 研究菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 分析的数据来源 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要的软件和数据库 | 第22页 |
| 2.2 RNA-Seq测序数据及分析方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 雅致放射毛霉的RNA-Seq测序 | 第22页 |
| 2.2.2 羧肽酶序列的上传 | 第22页 |
| 2.2.3 羧肽酶信号肽的分析 | 第22-23页 |
| 2.2.4 开放阅读框（ORF）的分析 | 第23-24页 |
| 2.2.5 羧肽酶所属家族分析 | 第24页 |
| 2.2.6 构建羧肽酶系统进化树 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-29页 |
| 2.3.1 雅致放射毛霉的RNA-Seq测序结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 羧肽酶信号肽分析结果 | 第26页 |
| 2.3.3 开放阅读框（ORF）分析 | 第26-27页 |
| 2.3.4 羧肽酶所属家族分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 羧肽酶系统进化树分析 | 第28-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 雅致放射毛霉羧肽酶基因AecpY的克隆及其在毕赤酵母中的表达 | 第30-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 3.1.1 供试菌株和质粒 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.4 培养基和溶液配制 | 第32页 |
| 3.1.5 引物设计与合成 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-46页 |
| 3.2.1 雅致放射毛霉菌株的培养 | 第33页 |
| 3.2.2 雅致放射毛霉菌丝体总RNA的提取 | 第33-35页 |
| 3.2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第35-36页 |
| 3.2.4 雅致放射毛霉羧肽酶全长编码基因的克隆 | 第36-41页 |
| 3.2.5 雅致放射毛霉羧肽酶基因转化毕赤酵母 | 第41-45页 |
| 3.2.7 重组羧肽酶在毕赤酵母中的诱导表达 | 第45-46页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第46-50页 |
| 3.3.1 雅致放射毛霉菌株的培养情况 | 第46页 |
| 3.3.2 雅致放射毛霉总RNA的提取结果 | 第46-47页 |
| 3.3.3 雅致放射毛霉羧肽酶基因AecpY的克隆结果 | 第47-48页 |
| 3.3.4 阳性重组羧肽酶基因的筛选结果 | 第48-49页 |
| 3.3.5 重组羧肽酶在毕赤酵母中的诱导表达结果 | 第49-50页 |
| 3.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 雅致放射毛霉粗酶液和羧肽酶的酶学性质研究 | 第51-66页 |
| 4.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 主要试剂和材料 | 第51页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第51-52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-57页 |
| 4.2.1 酶液的分离纯化 | 第52-53页 |
| 4.2.2 酶液的脱盐 | 第53-54页 |
| 4.2.3 BCA法测定蛋白浓度 | 第54-55页 |
| 4.2.4 雅致放射毛霉羧肽酶酶学性质的测定 | 第55-57页 |
| 4.2.5 雅致放射毛霉粗酶液的酶活测定 | 第57页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第57-64页 |
| 4.3.1 酶液分离纯化结果 | 第57-58页 |
| 4.3.2 酶液脱盐的结果 | 第58页 |
| 4.3.3 BCA法测定蛋白浓度结果 | 第58页 |
| 4.3.4 羧肽酶基因酶活性质的测定结果 | 第58-62页 |
| 4.3.5 粗酶液酶活性质的测定结果 | 第62-64页 |
| 4.4 本章小结 | 第64-66页 |
| 结论和展望 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 攻读博士/硕士学位期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附件 | 第75页 |