摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-25页 |
1.1 斜带石斑鱼简介 | 第12-13页 |
1.1.1 分类及分布情况 | 第12页 |
1.1.2 形态特征 | 第12页 |
1.1.3 养殖情况 | 第12-13页 |
1.2 鱼类免疫系统 | 第13-15页 |
1.2.1 免疫器官及组织 | 第13-14页 |
1.2.2 免疫细胞 | 第14页 |
1.2.3 体液免疫因子 | 第14-15页 |
1.3 鱼类抗原递呈及其相关基因研究概况 | 第15-22页 |
1.3.1 组织蛋白酶 | 第18-20页 |
1.3.2 γ-干扰素诱导的溶酶体硫还原酶GILT | 第20页 |
1.3.3 主要组织相容性复合体 | 第20-22页 |
1.4 刺激隐核虫及其免疫学研究 | 第22-24页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
第二章 石斑鱼组织蛋白酶S克隆及序列分析 | 第25-36页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 试验试剂 | 第25页 |
2.1.2 试验仪器及工具准备 | 第25页 |
2.1.3 实验鱼 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-29页 |
2.2.1 组织样品的采集 | 第26页 |
2.2.2 组织总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.3 RNA反转录 | 第27页 |
2.2.4 CTSS全长克隆和序列分析 | 第27-28页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
2.2.6 PCR产物的回收纯化 | 第28-29页 |
2.2.7 序列分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
2.3.1 RNA样品质量鉴定 | 第29-30页 |
2.3.2 cDNA质量鉴定 | 第30页 |
2.3.3 CTSS 全长克隆 | 第30-31页 |
2.3.4 蛋白比对 | 第31-34页 |
2.3.5 进化树 | 第34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-36页 |
第三章 刺激隐核虫感染后石斑鱼MHC Ⅱ免疫相关分子表达谱分析 | 第36-50页 |
3.1 试验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 试验试剂及主要仪器 | 第38-39页 |
3.1.2 试验石斑鱼 | 第39页 |
3.1.3 感染用刺激隐核虫 | 第39页 |
3.2 试验方法 | 第39-41页 |
3.2.1 刺激隐核虫感染 | 第39页 |
3.2.2 组织样品采集 | 第39-40页 |
3.2.3 RNA提取及cDNA合成 | 第40页 |
3.2.4 MHC Ⅱ免疫相关分子引物设计 | 第40-41页 |
3.2.5 Real-time PCR | 第41页 |
3.2.6 数据分析 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-45页 |
3.3.1 免疫相关分子的正常组织分布 | 第41-43页 |
3.3.2 感染后MHC Ⅱ相关信号通路分子表达谱 | 第43-45页 |
3.4 讨论 | 第45-48页 |
3.5 本章小结 | 第48-50页 |
第四章 刺激隐核虫感染后石斑鱼MHC Ⅰ类分子表达谱分析 | 第50-60页 |
4.1 试验材料 | 第51页 |
4.2 试验方法 | 第51-52页 |
4.2.1 刺激隐核虫感染及组织样品的采集 | 第51页 |
4.2.2 石斑鱼组织总RNA提取 | 第51页 |
4.2.3 cDNA合成 | 第51页 |
4.2.4 引物设计 | 第51页 |
4.2.5 Real-time PCR | 第51-52页 |
4.2.6 数据分析及信息学分析 | 第52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-57页 |
4.3.1 石斑鱼 β_2m蛋白比对及进化分析 | 第52-55页 |
4.3.2 健康石斑鱼中MHC Ⅰα 和 β_2m组织分布 | 第55页 |
4.3.3 刺激隐核虫免疫MHC Ⅰα 和 β_2m基因表达谱 | 第55-57页 |
4.4 讨论 | 第57-59页 |
4.5 本章小结 | 第59-60页 |
结论与展望 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-74页 |
附录 | 第74-75页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
附件 | 第77页 |