| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第11-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-36页 |
| 1.材料 | 第14-17页 |
| 1.1 临床样本 | 第14页 |
| 1.2 人肝癌细胞株 | 第14页 |
| 1.3 实验动物 | 第14-15页 |
| 1.4 主要试剂 | 第15-16页 |
| 1.5 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2 方法 | 第17-36页 |
| 2.1 组织芯片的PAIP1免疫组化检测 | 第17-20页 |
| 2.2 肝癌细胞系中PAIP1的检测 | 第20-23页 |
| 2.3 慢病毒来源及构成 | 第23页 |
| 2.4 慢病毒感染细胞 | 第23-25页 |
| 2.5 Western Blot验证靶点有效性 | 第25-27页 |
| 2.6 Cellomics检测细胞生长情况 | 第27-28页 |
| 2.7 FACS细胞周期检测 | 第28-29页 |
| 2.8 Annexin V-APC单染法检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 2.9 细胞克隆形成检测 | 第30页 |
| 2.10 裸鼠成瘤实验 | 第30-31页 |
| 2.11 RNA测序 | 第31-35页 |
| 2.12 统计学处理 | 第35-36页 |
| 第3章 结果 | 第36-66页 |
| 第一部分 PAIP1在肝癌细胞及肝癌组织中的表达及临床意义 | 第36-40页 |
| 1. PAIP1蛋白在肝癌组织和癌旁组织中表达水平的比较 | 第36-37页 |
| 2. PAIP1在肝细胞癌中的表达水平与临床病理参数的关系 | 第37页 |
| 3. 肝癌细胞PAIP1表达水平与肝细胞癌患者预后的关系 | 第37-38页 |
| 4. PAIP1基因在肝癌细胞株SMMC-7721中的表达 | 第38-40页 |
| 第二部分 PAIP1的表达下调对肝癌细胞体内外生物学行为的影响 | 第40-54页 |
| 1. 慢病毒感染SMMC-7721细胞 | 第40-41页 |
| 2. PAIP1基因表达沉默对SMMC-7721细胞PAIP1基因表达的影响 | 第41-43页 |
| 2.1 PAIP1基因表达沉默对PAIP1 mRNA表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.2 PAIP1基因表达沉默对PAIP1蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
| 3. PAIP1基因表达沉默对SMMC-7721细胞增殖能力的影响 | 第43-45页 |
| 4. PAIP1基因表达沉默后对SMMC-7721细胞周期的影响 | 第45-46页 |
| 5. PAIP1基因表达沉默对SMMC-7721细胞凋亡的影响 | 第46-48页 |
| 6. PAIP1基因表达沉默对SMMC-7721细胞的克隆形成能力的影响 | 第48-50页 |
| 7. PAIP1基因表达沉默对SMMC-7721细胞裸鼠体内成瘤能力的影响 | 第50-54页 |
| 第三部分 PAIP1基因表达沉默后差异表达基因的筛选及验证 | 第54-66页 |
| 1. PAIP1下游应答基因 | 第54-56页 |
| 2. Pathway分析 | 第56-58页 |
| 3. Gene Ontology分析 | 第58-63页 |
| 4. 基因相关性分析 | 第63-64页 |
| 5. PAIP1下游相关基因 | 第64-65页 |
| 6. PAIP1沉默后差异表达基因的验证 | 第65-66页 |
| 第4章 讨论 | 第66-71页 |
| 全文总结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第80-81页 |
| 综述 | 第81-98页 |
| 参考文献 | 第93-98页 |
