| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第13-22页 |
| 1.1 ABA的合成、分解与转运 | 第13-16页 |
| 1.1.1 ABA的合成与分解代谢 | 第13-14页 |
| 1.1.2 ABA的跨膜运输 | 第14-16页 |
| 1.2 ABA信号通路 | 第16-20页 |
| 1.2.1 ABA受体 | 第17-18页 |
| 1.2.2 ABA信号通路中的PYL蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.3 ABA信号通路中的A类PP2C蛋白和SnRK2蛋白 | 第19-20页 |
| 1.3 立题依据及研究意义 | 第20-22页 |
| 二、材料与方法 | 第22-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第22页 |
| 2.1.3 工具酶 | 第22页 |
| 2.1.4 常用贮存液 | 第22-23页 |
| 2.1.5 常用试剂盒 | 第23页 |
| 2.1.6 常用培养基 | 第23页 |
| 2.1.7 常用仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 GhPYL基因序列的分离 | 第23-24页 |
| 2.2.2 GhPYLs和AtPYLs的多序列比对与同源进化分析 | 第24页 |
| 2.2.3 GhPYL基因的表达分析 | 第24页 |
| 2.2.4 酵母双杂交实验 | 第24页 |
| 2.2.5 拟南芥的培养、遗传转化及阳性苗的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.6 野生型与转基因拟南芥的萌发率、绿苗率统计 | 第25页 |
| 2.2.7 野生型和转基因拟南芥的根长统计 | 第25页 |
| 2.2.8 GhPYL12蛋白的原核诱导表达及纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.9 过量表达和RNAi转基因棉花的创建 | 第26-27页 |
| 三、实验结果 | 第27-56页 |
| 3.1 GhPYL基因的分离 | 第27-28页 |
| 3.2 GhPYL蛋白的进化分析与序列比对 | 第28-31页 |
| 3.2.1 棉花PYL蛋白与拟南芥PYL蛋白的同源进化分析 | 第28-29页 |
| 3.2.2 棉花PYL蛋白与AtPYR1蛋白的多重序列比对 | 第29-31页 |
| 3.3 GhPYL基因的表达分析 | 第31-33页 |
| 3.3.1 GhPYL基因的组织表达 | 第31-32页 |
| 3.3.2 GhPYL基因在干旱胁迫下的表达分析 | 第32-33页 |
| 3.4 棉花PYL蛋白与PP2C蛋白在酵母细胞中的相互作用 | 第33-35页 |
| 3.5 过量表达GhPYL转基因拟南芥的创建 | 第35-37页 |
| 3.5.1 GhPYL的过量表达载体的构建及农杆菌转化 | 第35-36页 |
| 3.5.2 过量表达GhPYL转基因拟南芥的阳性苗鉴定 | 第36-37页 |
| 3.6 过量表达GhPYL转基因拟南芥对ABA的敏感性分析 | 第37-43页 |
| 3.6.1 过量表达GhPYL10转基因拟南芥对ABA的敏感性分析 | 第38-40页 |
| 3.6.2 过量表达GhPYL26转基因拟南芥对ABA的敏感性分析 | 第40-42页 |
| 3.6.3 过量表达GhPYL12转基因拟南芥对ABA的敏感性分析 | 第42-43页 |
| 3.7 过量表达GhPYL转基因拟南芥对NaCl的敏感性分析 | 第43-47页 |
| 3.7.1 过量表达GhPYL10的转基因拟南芥对NaCl的敏感性分析 | 第43-45页 |
| 3.7.2 过量表达GhPYL26的转基因拟南芥对NaCl的敏感性分析 | 第45-46页 |
| 3.7.3 过量表达GhPYL12的转基因拟南芥对NaCl的敏感性分析 | 第46-47页 |
| 3.8 过量表达GhPYL转基因拟南芥对甘露醇的敏感性分析 | 第47页 |
| 3.9 过量表达GhPYL转基因拟南芥根长分析 | 第47-50页 |
| 3.10 GhPYL1蛋白的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 3.11 GhPYL12蛋白的原核诱导表达及纯化 | 第51-53页 |
| 3.11.1 带His标签的GhPYL12融合蛋白的原核表达与纯化 | 第51-52页 |
| 3.11.2 带MBP标签的GhPYL12融合蛋白的原核表达与纯化 | 第52-53页 |
| 3.12 GhPYL12的棉花转化和继代培养 | 第53-56页 |
| 3.12.1 GhPYL12过量表达载体及RNAi载体的构建 | 第53-54页 |
| 3.12.2 GhPYL12转基因棉花的继代培养 | 第54-56页 |
| 四、讨论 | 第56-61页 |
| 4.1 GhPYL蛋白的结构分析和进化分析 | 第56页 |
| 4.2 部分GhPYL在棉花受到干旱胁迫后呈下调表达 | 第56-57页 |
| 4.3 棉花PYL蛋白与PP2C蛋白的相互作用 | 第57-58页 |
| 4.4 GhPYL转基因拟南芥的表型分析 | 第58-61页 |
| 4.4.1 过量表达GhPYL增加了拟南芥在种子萌发和幼苗生长时期对ABA的敏感性 | 第58-59页 |
| 4.4.2 过量表达GhPYL增加了拟南芥在种子萌发和幼苗生长时期对盐胁迫的敏感性 | 第59页 |
| 4.4.3 过量表达GhPYL12或GhPYL26促进了拟南芥在幼苗时期主根的生长 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
