| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 部分缩写的中英文对照 | 第15-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 上篇 文献综述 | 第17-49页 |
| 一、热应激概述 | 第17-22页 |
| 1 热应激的概念 | 第17-18页 |
| 1.1 应激的概念 | 第17页 |
| 1.2 应激的分类 | 第17页 |
| 1.3 应激的调节 | 第17-18页 |
| 2 热应激对机体的影响 | 第18-22页 |
| 2.1 热应激对动物行为的影响 | 第18页 |
| 2.2 热应激对动物采食量的影响 | 第18-19页 |
| 2.3 热应激对动物生产性能的影响 | 第19页 |
| 2.4 热应激对动物血液生化指标的影响 | 第19-20页 |
| 2.5 热应激对动物内分泌系统的影响 | 第20页 |
| 2.6 热应激对动物免疫功能的影响 | 第20-21页 |
| 2.7 热应激对动物生殖系统的影响 | 第21-22页 |
| 二、热休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs) | 第22-35页 |
| 1 HSPs的概念 | 第22页 |
| 2 HSPs的分类和特点 | 第22-23页 |
| 3 HSPs与热应激损伤 | 第23-24页 |
| 4 Hsp60/Hsp10的结构与功能 | 第24-25页 |
| 5 Hsp60/Hsp10的分布与功能 | 第25-26页 |
| 6 Hsp60/Hsp10与疾病 | 第26-30页 |
| 6.1 Hsp60/Hsp10与心血管疾病的关系 | 第26-28页 |
| 6.2 Hsp60/Hsp10与癌症的关系 | 第28-30页 |
| 7 Hsp60/Hsp10与免疫的关系 | 第30-33页 |
| 8 Hsp60/Hsp10基因表达的调控 | 第33-34页 |
| 9 Hsp60/Hsp10的研究展望 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-49页 |
| 下篇 试验研究 | 第49-131页 |
| 第一章 体内、外大鼠心肌细胞热应激模型建立及热应激性损伤特点 | 第51-63页 |
| 1 材料和方法 | 第52-56页 |
| 1.1 材料 | 第52-53页 |
| 1.1.1 试验动物及细胞 | 第52页 |
| 1.1.2 器材与设备 | 第52-53页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第53页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第53页 |
| 1.2 方法 | 第53-56页 |
| 1.2.1 在体实验动物分组及取样 | 第53-54页 |
| 1.2.2 离体实验细胞分组及取样 | 第54-55页 |
| 1.2.3 HE染色 | 第55-56页 |
| 1.2.4 MTT试验 | 第56页 |
| 2 结果 | 第56-60页 |
| 2.1 受试大鼠的临床症状 | 第56页 |
| 2.2 热应激对H9C2离体大鼠心肌细胞活力及存活率的影响 | 第56-57页 |
| 2.3 在体和离体大鼠心肌细胞在热应激状态下的组织病理学变化 | 第57-59页 |
| 2.4 热应激导致的死亡大鼠心肌细胞的病理学变化 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第二章 热应激状态下Hsp60在大鼠离体和在体心肌细胞中的表达与定位 | 第63-89页 |
| 1 材料和方法 | 第64-75页 |
| 1.1 材料 | 第64-67页 |
| 1.1.1 试验动物及细胞 | 第64页 |
| 1.1.2 器材与设备 | 第64-65页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第65页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第65-66页 |
| 1.1.5 分析工具软件 | 第66-67页 |
| 1.2 方法 | 第67-75页 |
| 1.2.1 在体实验动物分组及取样 | 第67页 |
| 1.2.2 离体实验细胞分组及取样 | 第67-68页 |
| 1.2.3 Westem blot检测 | 第68-70页 |
| 1.2.4 荧光定量PCR检测 | 第70-73页 |
| 1.2.5 免疫组织化学方法检测Hsp60蛋白在热应激大鼠心肌细胞中的表达 | 第73-74页 |
| 1.2.6 间接免疫荧光检测Hsp60蛋白在热应激H9C2大鼠心肌细胞中的表达 | 第74-75页 |
| 2 结果 | 第75-83页 |
| 2.1 热应激大鼠体内、外心肌细胞Hsp60表达水平的变化 | 第75-77页 |
| 2.2 热应激大鼠体内、外心肌细胞hsp60 mRNA表达水平的变化 | 第77-79页 |
| 2.3 热应激大鼠体内、外心肌细胞内Hsp60的定位 | 第79-83页 |
| 2.4 热应激导致的死亡大鼠心肌细胞中Hsp60的表达 | 第83页 |
| 2.5 热应激4h后H9C2大鼠心肌细胞中Hsp60的定位 | 第83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 第三章 热应激状态下Hsp60相关蛋白Hsp10在大鼠心肌细胞中的表达与定位 | 第89-103页 |
| 1 材料和方法 | 第90-94页 |
| 1.1 材料 | 第90-91页 |
| 1.1.1 试验动物及细胞 | 第90页 |
| 1.1.2 器材与设备 | 第90-91页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第91页 |
| 1.2 方法 | 第91-94页 |
| 1.2.1 在体实验试验分组及取样 | 第91页 |
| 1.2.2 离体实验分组及取样 | 第91-92页 |
| 1.2.3 Western blot检测 | 第92页 |
| 1.2.4 荧光定量PCR检测 | 第92-93页 |
| 1.2.5 间接免疫荧光测Hsp10蛋白在热应激H9C2大鼠心肌细胞中的表达 | 第93-94页 |
| 1.2.6 软件统计分析 | 第94页 |
| 2 结果 | 第94-97页 |
| 2.1 热应激大鼠心肌细胞Hsp10蛋白表达水平的变化 | 第94-95页 |
| 2.2 热应激大鼠心肌细胞hsp10 mRNA表达水平的变化 | 第95页 |
| 2.3 热应激处理的H9C2大鼠心肌细胞系Hsp10蛋白的定位结果 | 第95-97页 |
| 2.4 大鼠组织细胞中Hsp60和Hsp10的相关性分析 | 第97页 |
| 3 讨论 | 第97-100页 |
| 参考文献 | 第100-103页 |
| 第四章 细胞外的Hsp60对热应激处理H9C2心肌细胞的保护效应及其机理的初步研究 | 第103-131页 |
| 1 材料与方法 | 第105-113页 |
| 1.1 材料 | 第105-107页 |
| 1.1.1 试验用细胞 | 第105页 |
| 1.1.2 器材与设备 | 第105页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第105-106页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第106-107页 |
| 1.2 方法 | 第107-113页 |
| 1.2.1 H9C2大鼠心肌细胞上清液中Hsp60的检测 | 第107-108页 |
| 1.2.2 MAPK通路相关蛋白ERK、JNK抑制剂浓度的选择 | 第108页 |
| 1.2.3 流式细胞术检测心肌细胞的损伤 | 第108页 |
| 1.2.4 Western Blotting | 第108-110页 |
| 1.2.5 荧光定量 | 第110-113页 |
| 2 结果 | 第113-126页 |
| 2.1 H9C2大鼠心肌细胞上清液中Hsp60的检测 | 第113页 |
| 2.2 抑制剂PD98059和SP600125浓度的筛选 | 第113-116页 |
| 2.3 热应激对H9C2心肌细胞凋亡和坏死的影响 | 第116-117页 |
| 2.4 抑制细胞膜外的Hsp60对热应激H9C2心肌细胞损伤及相关基因的影响 | 第117页 |
| 2.4.1 抑制细胞膜外的Hsp60对热应激H9C2细胞损伤的影响 | 第117页 |
| 2.4.2 抑制细胞膜外的Hsp60对热应激H9C2心肌细胞损伤相关基因的影响 | 第117页 |
| 2.5 抑制ERK和JNK的活化对热应激H9C2细胞损伤的影响 | 第117-118页 |
| 2.6 热应激对H9C2心肌细胞ERK和JNK蛋白磷酸化的影响 | 第118-121页 |
| 2.6.1 热应激对H9C2心肌细胞ERK和JNK蛋白磷酸化的影响 | 第118-120页 |
| 2.6.2 热应激对抑制了细胞外的Hsp60后的H9C2心肌细胞ERK和JNK蛋白磷酸化的影响 | 第120-121页 |
| 2.7 抑制细胞外的Hsp60对热应激H9C2细胞ERK和JNK蛋白磷酸化的影响 | 第121页 |
| 2.8 抑制细胞外的Hsp60及MAPK相关蛋白对热应激H9C2细胞内Hsp60及其相关蛋白Hsp10的影响 | 第121-126页 |
| 2.8.1 MAPK抑制剂对热应激H9C2细胞内Hsp60和Hsp10的影响 | 第121页 |
| 2.8.2 抑制细胞膜外的Hsp60对热应激H9C2细胞内Hsp60和Hsp10的影响 | 第121-126页 |
| 3 讨论 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-131页 |
| 全文总结 | 第131-133页 |
| 本文创新点 | 第133-135页 |
| 致谢 | 第135-137页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第137页 |
