| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英语缩写词汇及其符号说明 | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1 IFN及其特异受体 | 第12-13页 |
| 1.1 IFN | 第12页 |
| 1.2 IFNR | 第12-13页 |
| 2 IFN介导的抗病毒信号通路 | 第13-14页 |
| 2.1 JAK-STAT通路 | 第13-14页 |
| 2.2 IRF调控因子 | 第14页 |
| 2.3 正反馈调控机制 | 第14页 |
| 3 IFN诱导的主要抗病毒蛋白 | 第14-16页 |
| 3.1 PKR | 第14-15页 |
| 3.2 OAS | 第15页 |
| 3.3 Mx | 第15页 |
| 3.4 Viperin | 第15-16页 |
| 4 Ⅰ型和Ⅱ型IFN免疫活性及抗病毒活性 | 第16-17页 |
| 5 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 鹅IFNα和IFNγ受体的分子克隆 | 第18-26页 |
| 1 材料 | 第18页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第18页 |
| 1.2 实验动物 | 第18页 |
| 1.3 实验试剂 | 第18页 |
| 1.4 主要溶液及其配制 | 第18页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-20页 |
| 2.1 引物的设计与合成 | 第18-20页 |
| 2.2 保守区克隆 | 第20页 |
| 2.3 序列末端克隆 | 第20页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第20页 |
| 3 结果 | 第20-25页 |
| 3.1 保守序列扩增电泳结果 | 第20-21页 |
| 3.2 基因全长序列扩增电泳结果 | 第21页 |
| 3.3 核酸与氨基酸序列分析 | 第21-23页 |
| 3.4 结构域分析 | 第23页 |
| 3.5 系统进化分析 | 第23-25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 鹅IFN及其受体的组织表达谱与免疫特性研究 | 第26-32页 |
| 1 材料 | 第26页 |
| 1.1 主要实验试剂 | 第26页 |
| 1.2 实验动物 | 第26页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-28页 |
| 2.1 组织分离及研磨 | 第26页 |
| 2.2 总RNA抽提 | 第26-27页 |
| 2.3 反转录 | 第27页 |
| 2.4 外周血淋巴细胞分离 | 第27页 |
| 2.5 荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-31页 |
| 3.1 Ⅰ型与Ⅱ型干扰素及其受体组织表达谱 | 第28-29页 |
| 3.2 Ⅰ型与Ⅱ型干扰素体外免疫特性 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 第四章 不同病毒感染对鹅干扰素表达的影响 | 第32-44页 |
| 1 材料 | 第32页 |
| 1.1 实验毒株与动物 | 第32页 |
| 1.2 实验试剂 | 第32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-34页 |
| 2.1 实验设计 | 第32-33页 |
| 2.2 组织样本采集 | 第33页 |
| 2.3 免疫组化染色 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-41页 |
| 3.1 H9N2病毒抗原定位与干扰素的表达 | 第34-37页 |
| 3.2 TMUV与GPV病毒抗原定位与干扰素的表达 | 第37-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 4.1 H9N2感染对宿主抗病毒免疫反应的影响 | 第41-42页 |
| 4.2 TMUV与GPV感染对宿主抗病毒免疫反应的影响 | 第42-44页 |
| 第五章 鹅IFNα和IFNγ的亚细胞定位 | 第44-49页 |
| 1 材料 | 第44页 |
| 1.1 质粒和试剂 | 第44页 |
| 1.2 仪器和设备 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-46页 |
| 2.1 引物设计 | 第44页 |
| 2.2 质粒构建 | 第44-45页 |
| 2.3 质粒抽取 | 第45页 |
| 2.4 细胞转染 | 第45-46页 |
| 2.5 爬片制作 | 第46页 |
| 2.6 免疫印迹 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-48页 |
| 3.1 荧光质粒的鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2 IFNα和IFNγ的亚细胞定位 | 第47页 |
| 3.3 IFNα和IFNγ的免疫印迹 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 第六章 鹅Ⅰ型干扰素和Ⅱ型干扰素的真核表达与鉴定 | 第49-53页 |
| 1 材料 | 第49页 |
| 1.1 质粒与细胞 | 第49页 |
| 1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 2 方法 | 第49-50页 |
| 2.1 引物设计 | 第49页 |
| 2.2 产物连接转化 | 第49-50页 |
| 2.3 重组质粒鉴定 | 第50页 |
| 2.4 质粒转染 | 第50页 |
| 2.5 免疫印迹 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-52页 |
| 3.1 真核表达质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3 蛋白的表达鉴定 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 第七章 鹅Ⅰ型干扰素和Ⅱ型干扰素的抗病毒效应研究 | 第53-65页 |
| 1 材料 | 第53页 |
| 1.1 鸭胚 | 第53页 |
| 1.2 细胞与病毒 | 第53页 |
| 1.3 主要试剂 | 第53页 |
| 1.4 主要仪器 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-55页 |
| 2.1 GFP荧光强度观察 | 第53页 |
| 2.2 病毒基因拷贝数的检测 | 第53-54页 |
| 2.3 TCID_(50)的测定 | 第54页 |
| 2.4 流式细胞仪的分析 | 第54页 |
| 2.5 免疫印迹 | 第54页 |
| 2.6 免疫基因的检测 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-63页 |
| 3.1 病毒荧光强度观察 | 第55-56页 |
| 3.2 病毒拷贝数检测 | 第56-58页 |
| 3.3 病毒滴度检测 | 第58页 |
| 3.4 流式细胞仪分析 | 第58-59页 |
| 3.5 免疫印迹分析 | 第59-60页 |
| 3.6 抗病毒免疫小分子变化规律 | 第60-61页 |
| 3.7 剂量依赖的鹅IFNα与IFNγ抗病毒效果 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
