| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-25页 |
| 一 宿主与病原菌对铁元素的营养争夺机制 | 第14-18页 |
| 1 宿主的营养免疫 | 第14-15页 |
| 1.1 机体铁的存在形式 | 第14-15页 |
| 1.2 血清铁含量的变化 | 第15页 |
| 1.3 机体分泌噬铁蛋白 | 第15页 |
| 2 革兰氏阴性菌获取宿主铁的机制 | 第15-18页 |
| 2.1 siderophore介导的铁离子转运系统 | 第15-16页 |
| 2.2 血红素转运系统 | 第16页 |
| 2.3 亚铁离子转运系统 | 第16-18页 |
| 二 革兰氏阴性菌TonB蛋白的研究进展 | 第18-24页 |
| 1 TonB系统参与的物质转运 | 第18-19页 |
| 2 TonB蛋白的结构特点 | 第19-20页 |
| 2.1 氨基端结构域 | 第19页 |
| 2.2 中间结构域 | 第19页 |
| 2.3 羧基端结构域 | 第19-20页 |
| 2.4 TonB-box反应 | 第20页 |
| 3 TonB系统作用机制模型 | 第20-21页 |
| 3.1 螺旋模型 | 第20-21页 |
| 3.2 穿梭模型 | 第21页 |
| 3.3 牵引模型 | 第21页 |
| 3.4 周质绑定蛋白辅助模型 | 第21页 |
| 4 TonB系统的表达调控 | 第21-22页 |
| 5 TonB系统在宿主致病中的作用 | 第22页 |
| 6 问题与展望 | 第22-24页 |
| 三 研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二部分 试验研究 | 第25-62页 |
| 四 鸭疫里默氏杆菌tonB基因的生物信息学分析、克隆表达及其多克隆抗体的制备 | 第25-41页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第25页 |
| 1.2 引物 | 第25页 |
| 1.3 主要试剂 | 第25-27页 |
| 1.4 主要仪器 | 第27页 |
| 1.5 实验动物 | 第27页 |
| 2 试验方法 | 第27-33页 |
| 2.1 鸭疫里默氏杆菌TonB系统的生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2 鸭疫里默氏杆菌tonB基因的克隆 | 第27-30页 |
| 2.3 重组TonB蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第30-33页 |
| 3 试验结果 | 第33-39页 |
| 3.1 鸭疫里默氏杆菌tonB基因的特点 | 第33-36页 |
| 3.2 鸭疫里默氏杆菌tonB基因的克隆表达及纯化 | 第36-37页 |
| 3.3 TonB蛋白多克隆抗体的检测 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 五 鸭疫里默氏杆菌tonB基因缺失株的构建 | 第41-53页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第41页 |
| 1.2 引物 | 第41页 |
| 1.3 主要试剂 | 第41-43页 |
| 1.4 主要仪器与耗材 | 第43页 |
| 2 试验方法 | 第43-47页 |
| 2.1 自杀质粒的构建 | 第43-45页 |
| 2.2 tonB基因缺失株的筛选和鉴定 | 第45-47页 |
| 3 试验结果 | 第47-52页 |
| 3.1 重组自杀质粒的构建 | 第47-49页 |
| 3.2 基因缺失株的构建与PCR鉴定 | 第49-51页 |
| 3.3 基因缺失株的Western-blot鉴定和极效反应检测 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 六 鸭疫里默氏杆菌tonB基因的功能研究 | 第53-62页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 菌株 | 第53页 |
| 1.2 引物 | 第53-54页 |
| 1.3 主要试剂 | 第54页 |
| 1.4 主要仪器 | 第54页 |
| 2 试验方法 | 第54-56页 |
| 2.1 对铁离子和血红素的利用 | 第54-55页 |
| 2.2 对血红蛋白的利用 | 第55页 |
| 2.3 对生物被膜形成的作用 | 第55页 |
| 2.4 血红素和铁离子对tonB基因的调节 | 第55-56页 |
| 3 试验结果 | 第56-60页 |
| 3.1 参与血红素与铁离子的转运 | 第56-57页 |
| 3.2 参与血红蛋白的利用 | 第57-58页 |
| 3.3 影响生物被膜的形成 | 第58-59页 |
| 3.4 tonB基因不受铁离子和血红素的调节 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间完成的学术论文 | 第70页 |
