| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 1 前言 | 第18-42页 |
| ·植物内生菌研究概况 | 第18-25页 |
| ·植物内生菌概念的发展演变 | 第18-19页 |
| ·植物内生菌的生物多样性 | 第19-21页 |
| ·植物内生菌种类的多样性 | 第19-20页 |
| ·内生菌宿主植物的多样性 | 第20页 |
| ·内生菌在宿主植物体内存在部位的多样性 | 第20-21页 |
| ·植物内生菌的生物学作用 | 第21-23页 |
| ·富集营养物质 | 第21页 |
| ·产生植物激素 | 第21-22页 |
| ·产生酶类 | 第22页 |
| ·增强宿主植物的抗性 | 第22-23页 |
| ·植物内生菌的应用 | 第23-25页 |
| ·植物内生菌作为生物防治因子 | 第23-24页 |
| ·植物内生菌是生物活性物质的资源库 | 第24-25页 |
| ·作为外源基因表达的载体 | 第25页 |
| ·巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）的应用研究进展 | 第25-30页 |
| ·巨大芽孢杆菌在微生物肥料中的应用 | 第26页 |
| ·巨大芽孢杆菌在环境保护中的应用 | 第26-27页 |
| ·用于水质净化 | 第26页 |
| ·降解残留农药 | 第26-27页 |
| ·治理土壤重金属离子污染 | 第27页 |
| ·巨大芽孢杆菌在生物活性物质生产中的应用 | 第27页 |
| ·巨大芽孢杆菌作为原核表达系统 | 第27-30页 |
| ·巨大芽孢杆菌外源蛋白表达系统的优点 | 第28页 |
| ·巨大芽孢杆菌表达系统的发展 | 第28页 |
| ·利用巨大芽孢杆菌表达的外源蛋白 | 第28-30页 |
| ·转基因植物作为生物反应器的研究进展 | 第30-34页 |
| ·利用转基因植物生产的蛋白产品 | 第30-33页 |
| ·疫苗 | 第30-31页 |
| ·抗体 | 第31-32页 |
| ·药用蛋白 | 第32页 |
| ·其他蛋白 | 第32-33页 |
| ·植物转化的途径 | 第33-34页 |
| ·细胞核转化 | 第33页 |
| ·质体转化 | 第33页 |
| ·植物细胞悬浮液培养 | 第33-34页 |
| ·瞬时表达系统 | 第34页 |
| ·植物生物反应器的优化 | 第34页 |
| ·干扰素-γ 的生理作用及其体外表达的研究进展 | 第34-38页 |
| ·干扰素-γ 的分子特征 | 第35页 |
| ·干扰素-γ 的主要功能 | 第35-36页 |
| ·抗病毒作用 | 第35-36页 |
| ·免疫调节作用 | 第36页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第36页 |
| ·重组干扰素-γ 的表达 | 第36-38页 |
| ·重组干扰素-γ 在原核细胞中的表达 | 第37-38页 |
| ·重组干扰素-γ 在昆虫细胞中的表达 | 第38页 |
| ·重组干扰素-γ 在哺乳动物细胞中的表达 | 第38页 |
| ·家蚕素Ⅱ的研究进展 | 第38-40页 |
| ·家蚕素的发现 | 第38-39页 |
| ·家蚕素Ⅱ的结构与基因特点 | 第39页 |
| ·家蚕素Ⅱ的生理功能 | 第39-40页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第40-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-64页 |
| ·试验材料 | 第42-48页 |
| ·生物材料 | 第42页 |
| ·质粒和菌株 | 第42页 |
| ·生化试剂 | 第42-46页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第42-43页 |
| ·主要试剂配制 | 第43-46页 |
| ·供试家蚕人工饲料和小鼠饲料的配方与加工 | 第46页 |
| ·PCR引物 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46-47页 |
| ·主要软件及数据库 | 第47-48页 |
| ·试验方法 | 第48-64页 |
| ·马铃薯块茎中内生细菌的分离与鉴定 | 第48-51页 |
| ·马铃薯块茎中内生细菌的分离纯化 | 第48-49页 |
| ·内生细菌 16S rDNA序列测定 | 第49-51页 |
| ·内生细菌系统发育分析 | 第51页 |
| ·马铃薯内生细菌菌株Bacillus megaterium PE1原生质体制备 | 第51-53页 |
| ·PE1生长曲线的制作 | 第51页 |
| ·原生质体制备及再生方法 | 第51-52页 |
| ·溶菌酶浓度对PE1原生质体形成及再生的影响 | 第52页 |
| ·酶解温度对PE1原生质体形成及再生的影响 | 第52页 |
| ·酶解时间对PE1原生质体形成及再生的影响 | 第52页 |
| ·正交试验优化PE1原生质体形成及再生条件 | 第52-53页 |
| ·小鼠干扰素-γ 基因的克隆与表达 | 第53-60页 |
| ·小鼠干扰素-γ 基因的克隆 | 第53-55页 |
| ·小鼠干扰素-γ 基因与表达载体pHIS1522的连接 | 第55-57页 |
| ·重组质粒pHIS1522/mIFN-γ 转化PE1的原生质体 | 第57-58页 |
| ·小鼠干扰素-γ 在PE1中的表达 | 第58-59页 |
| ·重组小鼠干扰素-γ 的检测 | 第59页 |
| ·小鼠干扰素-γ 在马铃薯中的表达 | 第59-60页 |
| ·马铃薯中表达小鼠干扰素-γ 的检测 | 第60页 |
| ·家蚕素Ⅱ基因的克隆与表达 | 第60-64页 |
| ·家蚕素Ⅱ基因的克隆 | 第60页 |
| ·家蚕素Ⅱ基因与表达载体pHIS1522的连接 | 第60页 |
| ·重组质粒pHIS1522/BBX-Ⅱ转化PE1 | 第60-61页 |
| ·家蚕素Ⅱ在PE1中的表达 | 第61页 |
| ·SDS-PAGE检测家蚕素Ⅱ的表达 | 第61页 |
| ·家蚕素Ⅱ在马铃薯中的表达 | 第61页 |
| ·马铃薯组培苗中家蚕素Ⅱ的检测 | 第61页 |
| ·PE1表达的家蚕素Ⅱ的纯化与注射液的配制 | 第61-62页 |
| ·PE1表达的家蚕素Ⅱ对家蚕的降血糖作用试验 | 第62页 |
| ·PE1表达的家蚕素Ⅱ对小鼠的降血糖试验 | 第62-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-94页 |
| ·马铃薯块茎中内生细菌的分离及鉴定 | 第64-69页 |
| ·表面灭菌方法对马铃薯块茎中内生细菌分离效果的影响 | 第64页 |
| ·马铃薯块茎中内生细菌的培养及鉴定 | 第64-69页 |
| ·内生细菌 16S rDNA的扩增结果 | 第65页 |
| ·内生细菌 16S rDNA序列系统进化分析与分类鉴定 | 第65-69页 |
| ·制备马铃薯内生细菌Bacillus megaterium PE1原生质体 | 第69-73页 |
| ·Bacillus megaterium PE1的生长曲线 | 第69-70页 |
| ·溶菌酶浓度对Bacillus megaterium PE1原生质体形成及再生的影响 | 第70-71页 |
| ·酶解温度对Bacillus megaterium PE1原生质体形成及再生的影响 | 第71页 |
| ·酶解时间对Bacillus megaterium PE1原生质体形成及再生的影响 | 第71-72页 |
| ·Bacillus megaterium PE1原生质体形成及再生条件的正交试验优化 | 第72-73页 |
| ·小鼠干扰素-γ 在马铃薯内生巨大芽孢杆菌PE1菌株和马铃薯组培苗中的表达 | 第73-80页 |
| ·小鼠干扰素-γ 基因的克隆 | 第73-75页 |
| ·小鼠淋巴细胞总RNA的提取 | 第73页 |
| ·RT-PCR结果 | 第73-74页 |
| ·重组质粒pEASY-T1 simple/mIFN-γ 的鉴定 | 第74-75页 |
| ·mIFN-γ cDNA序列测定结果 | 第75页 |
| ·小鼠干扰素-γ 在马铃薯内生巨大芽孢杆菌PE1菌株中的表达 | 第75-78页 |
| ·重组表达质粒pHIS1522/mIFN-γ 的构建 | 第76页 |
| ·重组表达质粒pHIS1522/mIFN-γ 转化PE1原生质体 | 第76-77页 |
| ·小鼠干扰素-γ 在PE1中的表达 | 第77-78页 |
| ·小鼠干扰素-γ 在回接内生巨大芽孢杆菌PE1的马铃薯组培苗中的表达 | 第78-80页 |
| ·家蚕素Ⅱ在马铃薯内生巨大芽孢杆菌PE1菌株和马铃薯组培苗中的表达 | 第80-94页 |
| ·家蚕素Ⅱ基因的克隆 | 第80-83页 |
| ·家蚕头部总RNA的提取 | 第80-81页 |
| ·RT-PCR结果 | 第81页 |
| ·重组质粒pEASY-T1 simple/BBX-Ⅱ的鉴定 | 第81-82页 |
| ·BBX-Ⅱ cDNA序列测定结果 | 第82-83页 |
| ·BBX-Ⅱ在马铃薯内生巨大芽孢杆菌PE1菌株中的表达 | 第83-87页 |
| ·重组表达质粒pHIS1522/BBX-Ⅱ的构建 | 第83-84页 |
| ·重组表达质粒pHIS1522/BBX-Ⅱ转化PE1原生质体 | 第84-85页 |
| ·BBXⅡ在B. megateriuim PE1中的表达及纯化 | 第85-87页 |
| ·BBXⅡ在回接内生巨大芽孢杆菌PE1菌株的马铃薯组培苗中的表达 | 第87页 |
| ·内生巨大芽孢杆菌PE1菌株表达的家蚕素Ⅱ对家蚕的降血糖作用 | 第87-92页 |
| ·PE1中表达的BBXⅡ对正常家蚕血糖水平及海藻糖酶活性的影响 | 第87-89页 |
| ·PE1中表达的BBXⅡ对饥饿后进食的家蚕血糖和海藻糖酶活性的影响 | 第89-91页 |
| ·PE1中表达的BBXⅡ对高糖饲料诱导的高血糖家蚕的降血糖效果 | 第91-92页 |
| ·内生巨大芽孢杆菌PE1菌株表达的家蚕素Ⅱ对小鼠的降血糖作用 | 第92-94页 |
| ·PE1表达的BBXⅡ对正常小鼠血糖的影响 | 第92页 |
| ·PE1表达的BBXⅡ对糖尿病小鼠血糖水平的影响 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-100页 |
| ·马铃薯内生菌种群分析及外源基因表达载体菌株的确定 | 第94-96页 |
| ·巨大芽孢杆菌原生质体制备条件的确定 | 第96-97页 |
| ·利用转基因内生菌在植物中表达外源基因的可行性及其优势 | 第97-98页 |
| ·今后进一步研究的方向 | 第98-100页 |
| 5 结论 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第124页 |
