| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略语表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-42页 |
| 第一节 植物耐盐性与钠离子转运体 | 第16-28页 |
| ·土壤盐渍化及高盐胁迫 | 第16-17页 |
| ·土壤盐渍化 | 第16页 |
| ·高盐胁迫 | 第16-17页 |
| ·植物耐盐性与钠离子流 | 第17-22页 |
| ·钠离子的内流 | 第18-19页 |
| ·钠离子的外排 | 第19-20页 |
| ·钠离子区域化与体内重分布 | 第20-21页 |
| ·盐胁迫信号转导 | 第21-22页 |
| ·钠离子内向转运体 | 第22-28页 |
| ·低亲和性阳离子转运体1 | 第22页 |
| ·高亲和性钾离子转运体 | 第22-25页 |
| ·非选择性阳离子通道 | 第25-28页 |
| 第二节 CNGCs | 第28-41页 |
| ·CNGCs家族及其结构 | 第28-32页 |
| ·CNGCs家族 | 第28-31页 |
| ·CNGCs结构 | 第31-32页 |
| ·CNGCs离子选择性 | 第32-38页 |
| ·CNGCs离子选择性的鉴定方法 | 第32-37页 |
| ·CNGCs离子选择性 | 第37-38页 |
| ·CNGCs的生物学功能 | 第38-41页 |
| ·CNGCs参与病原反应 | 第38页 |
| ·CNGCs与重金属胁迫 | 第38-39页 |
| ·CNGCs参与盐胁迫 | 第39页 |
| ·CNGCs与钙信号和生长调控 | 第39-41页 |
| 第三节 研究目的和意义 | 第41-42页 |
| 第二章 AtCNGC基因克隆、酵母功能验证及突变体苗期耐盐性初步试验 | 第42-60页 |
| 摘要 | 第42页 |
| 引言 | 第42-44页 |
| 第一节 材料与方法 | 第44-53页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·菌株、质粒 | 第44页 |
| ·主要培养基 | 第44-46页 |
| ·实验方法 | 第46-53页 |
| ·提取RNA | 第46页 |
| ·cDNA合成 | 第46-47页 |
| ·CNGCs的克隆 | 第47页 |
| ·PCR产物酶切、回收、链接 | 第47-48页 |
| ·转化、菌落PCR鉴定 | 第48页 |
| ·小量提取质粒DNA | 第48-49页 |
| ·酵母转化(PEG/LiAc小量制备) | 第49页 |
| ·酵母功能互补 | 第49-50页 |
| ·植物DNA提取 | 第50页 |
| ·启动子克隆 | 第50页 |
| ·过表达载体的构建 | 第50页 |
| ·农杆菌电击感受态的制备及电击转化 | 第50-51页 |
| ·花序浸染法转基因 | 第51页 |
| ·T-DNA插入突变体3引物法鉴定 | 第51-52页 |
| ·种子播种及移苗 | 第52-53页 |
| 第二节 实验结果 | 第53-59页 |
| ·突变体表型初筛 | 第53页 |
| ·酵母功能互补 | 第53-55页 |
| ·T-DNA插入突变体的获得与鉴定 | 第55-56页 |
| ·过表达转基因植株的获得与鉴定 | 第56页 |
| ·突变体、过表达植株目的基因RNA水平上的检测 | 第56-57页 |
| ·启动子克隆及GUS报告基因转基因植株的获得 | 第57-59页 |
| 第三节 讨论 | 第59-60页 |
| 第三章 AtCNGC10和AtCNGC13的定位及其功能分析 | 第60-84页 |
| 摘要 | 第60页 |
| 引言 | 第60-62页 |
| 第一节 材料与方法 | 第62-67页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·菌株、质粒 | 第62页 |
| ·培养基 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-67页 |
| ·生物信息学分析 | 第63页 |
| ·酵母转化 | 第63页 |
| ·酵母功能互补 | 第63页 |
| ·定点突变 | 第63-64页 |
| ·洋葱表皮基因枪转化 | 第64-65页 |
| ·组织荧光定量PCR | 第65-66页 |
| ·GUS报告基因检测 | 第66页 |
| ·种子萌发存活率的测定 | 第66页 |
| ·离子含量测定 | 第66-67页 |
| 第二节 实验结果 | 第67-80页 |
| ·AtCNGC10,AtCNGC13的膜定位 | 第67-69页 |
| ·AtCNGC10,AtCNGC13在酵母中的离子通透性 | 第69-71页 |
| ·AtCNGC10,AtCNGC13的功能位点分析 | 第71-75页 |
| ·AtCNGC10,AtCNGC13的组织表达分析 | 第75-76页 |
| ·AtCNGC10,AtCNGC13与耐盐调控 | 第76-80页 |
| 第三节 讨论 | 第80-84页 |
| 第四章 AtCNGC13电生理分析 | 第84-98页 |
| 摘要 | 第84页 |
| 引言 | 第84-86页 |
| 第一节 材料与方法 | 第86-91页 |
| ·实验材料 | 第86-87页 |
| ·菌株和质粒 | 第86页 |
| ·培养基和试剂 | 第86-87页 |
| ·实验方法 | 第87-91页 |
| ·质粒大量提取 | 第87页 |
| ·质粒的纯化 | 第87-88页 |
| ·体外转录 | 第88-89页 |
| ·分离蛙卵 | 第89页 |
| ·微注射 | 第89页 |
| ·电压钳检测 | 第89-91页 |
| 第二节 实验结果 | 第91-96页 |
| ·AtKAT1及AtCNGC13电生理记录 | 第91-94页 |
| ·AtKAT1及AtCNGC13电流分析 | 第94-96页 |
| 第三节 讨论 | 第96-98页 |
| 全文总结与创新之处 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-114页 |
| 攻读博士学位期间发表及完成的科研论文 | 第114-116页 |
| 附录一 常用试剂、培养基配方 | 第116-118页 |
| 附录二 所用引物 | 第118-123页 |
| 附录三 所克隆AtCNGCs及突变体的登录号 | 第123-124页 |
| 附录四 AtCNGC10,AtCNGC13可以在酵母中表达 | 第124-125页 |
| 附录五 AtCNGC10回补转基因植株耐盐性分析 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
