摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
·磷脂酶以及工业应用 | 第12-14页 |
·磷脂酶在面包制造中的应用 | 第13页 |
·磷脂酶在乳制品中的应用 | 第13页 |
·磷脂酶在蛋黄乳化中的利用 | 第13-14页 |
·磷脂酶在功能性食品生产中的应用 | 第14页 |
·磷脂酶在植物油脱胶的应用 | 第14页 |
·磷脂酶A1 | 第14-16页 |
·磷脂酶A1辅助蛋白 | 第16-18页 |
·磷脂酶A1辅助蛋白 | 第16页 |
·辅助蛋白 | 第16-17页 |
·锚蛋白重复子 | 第17-18页 |
·蛋白质间相互作用的研究方法 | 第18-22页 |
·GST融合蛋白 | 第19页 |
·免疫共沉淀 | 第19-20页 |
·酵母双杂交的方法 | 第20页 |
·荧光共振能量转移技术(FRET) | 第20-21页 |
·双分子荧光互补技术(BiFC) | 第21-22页 |
·研究目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 融合蛋白的构建与表达 | 第24-45页 |
·实验材料和仪器 | 第25-29页 |
·菌株和质粒 | 第25页 |
·实验药品和仪器 | 第25-28页 |
·培养基和试剂的配制 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-35页 |
·Western Blotting | 第29页 |
·PL-06基因组的提取 | 第29-30页 |
·融合蛋白菌株的构建 | 第30-33页 |
·菌株的表达诱导 | 第33-34页 |
·荧光观察 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-44页 |
·SP28 Western Blotting | 第35页 |
·PL-06基因组的提取 | 第35-36页 |
·目的基因plaS和EGFP的PCR | 第36页 |
·重组质粒的验证 | 第36-37页 |
·ESP28和SEP28生长曲线的测定 | 第37-38页 |
·ESP28和SEP28表达菌株的诱导优化 | 第38-43页 |
·荧光观察 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
第三章 PlaA与PlaS的相互作用 | 第45-58页 |
·实验材料与仪器 | 第45-46页 |
·菌株和仪器 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-48页 |
·引物设计 | 第46页 |
·表达菌株的构建 | 第46-47页 |
·YFP-plaS-pET28a/BL21(YSP)的构建 | 第46-47页 |
·重组菌plaA-CFP-pWSK29/BL21(ACP)的构建 | 第47页 |
·重组菌YFP-plaS-pET28a-plaA-CFP-pWSK29/BL21(YSAC)的构建 | 第47页 |
·重组菌生长曲线的测定 | 第47页 |
·表达诱导 | 第47-48页 |
·荧光分光光度计的测定 | 第48页 |
·荧光显微镜观察 | 第48页 |
·实验结果 | 第48-57页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
·重组融合质粒验证 | 第49-50页 |
·重组菌的生长曲线的测定 | 第50页 |
·重组菌的表达诱导条件优化 | 第50-54页 |
·荧光分光光度计测量结果 | 第54-56页 |
·荧光观察结果 | 第56-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
第四章 重组菌形态观察 | 第58-63页 |
·实验材料与仪器 | 第58页 |
·实验材料 | 第58页 |
·实验仪器 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-59页 |
·样品的前处理 | 第58页 |
·透射电镜样品制备 | 第58-59页 |
·扫描电镜样品制备 | 第59页 |
·实验结果 | 第59-62页 |
·扫描电镜 | 第59-61页 |
·透射电镜 | 第61-62页 |
·本章小结 | 第62-63页 |
第五章 结论与展望 | 第63-65页 |
·结论 | 第63页 |
·展望 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |