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粘质沙雷氏菌磷脂酶A1辅助蛋白PlaS功能特性研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 绪论第12-24页
   ·磷脂酶以及工业应用第12-14页
     ·磷脂酶在面包制造中的应用第13页
     ·磷脂酶在乳制品中的应用第13页
     ·磷脂酶在蛋黄乳化中的利用第13-14页
     ·磷脂酶在功能性食品生产中的应用第14页
     ·磷脂酶在植物油脱胶的应用第14页
   ·磷脂酶A1第14-16页
   ·磷脂酶A1辅助蛋白第16-18页
     ·磷脂酶A1辅助蛋白第16页
     ·辅助蛋白第16-17页
     ·锚蛋白重复子第17-18页
   ·蛋白质间相互作用的研究方法第18-22页
     ·GST融合蛋白第19页
     ·免疫共沉淀第19-20页
     ·酵母双杂交的方法第20页
     ·荧光共振能量转移技术(FRET)第20-21页
     ·双分子荧光互补技术(BiFC)第21-22页
   ·研究目的和意义第22-24页
第二章 融合蛋白的构建与表达第24-45页
   ·实验材料和仪器第25-29页
     ·菌株和质粒第25页
     ·实验药品和仪器第25-28页
     ·培养基和试剂的配制第28-29页
   ·实验方法第29-35页
     ·Western Blotting第29页
     ·PL-06基因组的提取第29-30页
     ·融合蛋白菌株的构建第30-33页
     ·菌株的表达诱导第33-34页
     ·荧光观察第34-35页
   ·实验结果第35-44页
     ·SP28 Western Blotting第35页
     ·PL-06基因组的提取第35-36页
     ·目的基因plaS和EGFP的PCR第36页
     ·重组质粒的验证第36-37页
     ·ESP28和SEP28生长曲线的测定第37-38页
     ·ESP28和SEP28表达菌株的诱导优化第38-43页
     ·荧光观察第43-44页
   ·本章小结第44-45页
第三章 PlaA与PlaS的相互作用第45-58页
   ·实验材料与仪器第45-46页
     ·菌株和仪器第45-46页
   ·实验方法第46-48页
     ·引物设计第46页
     ·表达菌株的构建第46-47页
       ·YFP-plaS-pET28a/BL21(YSP)的构建第46-47页
       ·重组菌plaA-CFP-pWSK29/BL21(ACP)的构建第47页
       ·重组菌YFP-plaS-pET28a-plaA-CFP-pWSK29/BL21(YSAC)的构建第47页
     ·重组菌生长曲线的测定第47页
     ·表达诱导第47-48页
     ·荧光分光光度计的测定第48页
     ·荧光显微镜观察第48页
   ·实验结果第48-57页
     ·目的基因的PCR扩增第48-49页
     ·重组融合质粒验证第49-50页
     ·重组菌的生长曲线的测定第50页
     ·重组菌的表达诱导条件优化第50-54页
     ·荧光分光光度计测量结果第54-56页
     ·荧光观察结果第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第四章 重组菌形态观察第58-63页
   ·实验材料与仪器第58页
     ·实验材料第58页
     ·实验仪器第58页
   ·实验方法第58-59页
     ·样品的前处理第58页
     ·透射电镜样品制备第58-59页
     ·扫描电镜样品制备第59页
   ·实验结果第59-62页
     ·扫描电镜第59-61页
     ·透射电镜第61-62页
   ·本章小结第62-63页
第五章 结论与展望第63-65页
   ·结论第63页
   ·展望第63-65页
参考文献第65-72页
攻读硕士期间发表论文第72-73页
致谢第73-74页

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