摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
前言 | 第8-16页 |
第一部分 人源化RPP蛋白与HCV RNA体外结合的实验研究 | 第16-44页 |
·研究目的 | 第16页 |
·实验仪器、材料与试剂 | 第16-23页 |
·实验仪器 | 第16-17页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·实验试剂 | 第18-20页 |
·本章所用到的实验溶液的配制 | 第20-23页 |
·实验方法 | 第23-33页 |
·RPP基因慢病毒载体的构建 | 第23-29页 |
·稳定表达RPP蛋白的HEK293细胞系的建立 | 第29页 |
·人源化RPP蛋白表达的免疫印记验证 | 第29-31页 |
·人源化RPP蛋白的表达及纯化 | 第31页 |
·HCV RNA 5’ UTR的体外转录及与人源化RPP蛋白结合实验 | 第31-33页 |
·实验结果 | 第33-41页 |
·RPP基因慢病毒载体的构建结果 | 第33-35页 |
·稳定表达RPP蛋白的HEK293细胞系的细胞显微图像及免疫印记验证结果 | 第35-37页 |
·稳转细胞系的流式细胞仪分选及分选后的细胞显微图像结果 | 第37-39页 |
·纯化后的人源化RPP蛋白的SDS-PAGE检测及浓度检测 | 第39-40页 |
·RPP蛋白与HCV基因组RNA 5’ UTR结合能力检测 | 第40-41页 |
·小结与讨论 | 第41-44页 |
第二部分 在Huh7.5.1 细胞系中过表达和下调表达RPP蛋白对HCV增殖的影响 | 第44-58页 |
·研究目的 | 第44页 |
·实验仪器、材料和试剂 | 第44-46页 |
·实验仪器 | 第44-45页 |
·实验材料 | 第45页 |
·实验试剂 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-51页 |
·构建稳定表达RPP20,RPP21,RPP25,RPP29基因的Huh7.5.1 细胞系 | 第46页 |
·RPP20,RPP21,RPP25,RPP29干扰RNA(sh RNA)的合成 | 第46-47页 |
·细胞的收集及RNA提取 | 第47-48页 |
·RNA逆转录及实时荧光定量PCR(QRT-PCR) | 第48-49页 |
·在huh7.5.1 细胞系中过表达和干扰RPP蛋白表达的免疫印记验证 | 第49-51页 |
·实验结果 | 第51-56页 |
·RPP蛋白过表达和干扰QRT-PCR检测 | 第51-52页 |
·RPP蛋白过表达和干扰western-blot检测 | 第52-54页 |
·RPP蛋白过表达和下调表达对HCV RNA复制的影响 | 第54-56页 |
·小结与讨论 | 第56-58页 |
第三部分 全文总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65-68页 |
附录一 缩略词中英文对照 | 第65-66页 |
附录二 构建的RPP20,RPP21,RPP25,RPP29慢病毒载体图谱 | 第66-67页 |
附录三 硕士期间发表的论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |